青藤碱对PKC⁃α/NF⁃κB⁃p65通路的抑制作用及机制

目的：探讨过表达蛋白激酶C?α（protein kinase C?α,PKC?α）对HEK?293T细胞中核因子?κB?p65（nuclear factor?κB?p65,NF?κB?p65）磷酸化水平的影响,并检查青藤碱（sinomenine,SIN）对PKC?α/NF?κB?p65信号通路的抑制作用。方法：采用PCR技术扩增大鼠PKC?α基因蛋白质编码区（complete sequence coding,CDS）序列,将其插入到pIRES2?EGFP空载质粒中,构建野生型（wide type,WT）PKC?α过表达质粒（pIRES2?PKC?α?WT,PKC?αWT）;在PKC?αWT质粒的基础上,将PKC?α第25位丙氨酸（A）与368位赖氨酸（K）分别突变为谷氨酸（E）和精氨酸（R）,即构建持续活化（constitutively active,CA）突变型PKC?α过表达质粒（pIRES2?PKC?α?A25E,PKC?αCA）和显性负性（dominant negative,DN）突变型PKC?α过表达质粒（pIRES2?PKC?α?K368R,PKC?αDN）。本课题组前期构建的大鼠野生型NF?κB?p65过表达质粒（pIRES2?NF?κB?p65,p65WT）分别与上述各PKC?α过表达质粒共同转染HEK?293T细胞,免疫印迹法检测PKC?α、NF?κB?p65的表达及磷酸化水平。再将上述不同质粒转染HEK?293T细胞,46 h后予50 ng/mL SIN处理细胞2 h,再行免疫印迹实验分析SIN对PKC?α、NF?κB?p65磷酸化的影响。结果：菌液PCR及测序证实,上述PKC?α过表达质粒构建成功。在HEK?293T中过表达PKC?αWT或PKC?αCA可促进NF?κB?p65的磷酸化,且过表达PKC?αCA时尤为显著,而过表达PKC?αDN后NF?κB?p65的磷酸化无明显变化。SIN处理可抑制PKC?αWT、PKC?αCA和PKC?αDN转染组HEK?293T细胞中PKC?α的磷酸化,同时也能抑制过表达PKC?αWT上调的NF?κB?p65磷酸化修饰,但不影响过表达PKC?αCA和PKC?αDN对NF?κB?p65的磷酸化作用。结论：过表达PKC?α可促进HEK?293T细胞中NF?κB?p65的磷酸化,SIN处理HEK?293T细胞后可通过抑制PKC?α的磷酸化下调NF?κB?p65的磷酸化修饰。     

张志礼教授治疗儿童异位性皮炎的经验

<正> 异位性皮炎是一种较顽固易复发的皮肤病,目前尚无特效疗法。张志礼教授积卅余年经验,采用健脾消导为主的法则治疗本病取得满意效果,现报道如下。临床资料一、一般情况门诊患者201例,男117例、女84例。年龄1月～14岁。参照康克非1986年关于     

高原地区55型腺病毒的病原分离及全基因序列分析

目的 探讨高原地区55型腺病毒(HAdV-B55)基因变异特点.方法 采集驻西藏某部队55型腺病毒感染者咽拭子标本,采用HEp-2分离病毒株,通过分片段PCR扩增和测序获得HAdV-B55毒株的全基因序列,通过与内地毒株进行序列比对,发现其变异特点.结果 从55型腺病毒感染者咽拭子标本分离得到HAdV-B55毒株,命名为LS89/Tibet/2016,通过PCR产物测序拼接,获得了本次流行的HAdV-B55毒株的全基因序列,GenBank登录号为KY002683.通过MEGA6软件比对,发现该病毒基因序列并未发生大片段重组,与内地以往流行毒株(QS-DLL株)序列相似性为99.9%.结论 本次分离出的病毒基因序列未发生大片段重组.本研究为揭示55型腺病毒的进化特点及今后高原地区制订疾病防控策略提供了依据.     

宫颈癌化疗患者领悟社会支持与抑郁的关系:冗思的中介机制

目的 探讨宫颈癌化疗患者领悟社会支持与抑郁关系及冗思在宫颈癌化疗患者领悟社会支持与抑郁间的中介作用.方法 采用抑郁量表、领悟社会支持量表、冗思反应量表对320名宫颈癌化疗患者进行问卷调查.结果 宫颈癌化疗患者中63.8％存在抑郁症状;宫颈癌化疗患者的领悟社会支持与抑郁呈负相关(r=-0.570,P＜0.01),冗思与抑郁呈正相关(r=0.656,P＜0.01),冗思与领悟社会支持呈负相关(r=-0.354,P＜0.01);冗思在宫颈癌化疗患者领悟社会支持和抑郁之间的中介效应显著,Bootstrap输出的95％可信区间为(-0.2235,-0.1255).结论 宫颈癌化疗患者领悟社会支持水平通过影响冗思水平来间接影响抑郁水平,应给予宫颈癌化疗患者更多社会支持,促进患者身心健康.     

20008/细胞外信号调节激酶在蛛网膜下腔出血大鼠脑皮质中的动态表达及神经递质对其的调控机制

背景：细胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated kinase,ERK）信号通路在介导细胞的增殖、分化及存活中发挥重要作用。新近研究发现,ERK可能通过介导细胞凋亡等,参与缺血性脑卒中等脑血管疾病的病理生理过程。但其在实验性蛛网膜下腔出血（subarachnoid hemorrhage,SAH）中的作用及机制尚未阐明。 目的：观察ERK在SAH后的大鼠脑皮质中的动态表达及其与神经细胞凋亡的关系,探讨ERK在实验性SAH中的作用及神经递质对其的调控机制。 设计：随机对照动物实验研究 单位：西安交通大学医学院第一附属医院神经外科 材料：114只健康雄性SD大鼠,体重0.3-0.35(0.325±0.025)kg,由西安交通大学实验动物中心提供。ERK1/2多克隆抗体,生物素标记的二抗IgG工作液,SABC试剂盒均购自北京博奥森公司;氯化乙酰胆碱购自上海三爱思试剂有限公司;去甲肾上腺素注射液购自上海禾丰制药有限公司;DAB显色盒购自北京中山公司;TUNEL试剂盒购自美国promega公司。脑立体定位仪（Narishige）由日本制造。 方法： 实验于2008年3月至2008年12月在西安交通大学医学院实验中心进行。①采用枕大池二次注血法建立大鼠SAH动物模型,114只SD大鼠随机分为SAH模型组（n=30）,对照组（n=66）,干预组（n=18）。干预组根据脑室给予的不同药物分为3个亚组,分别是：SAH＋Ach组,SAH＋NE组,SAH＋盐水对照组,每个亚组6只动物。②应用HE染色观察细胞形态学变化,免疫组化SP方法检测ERK在大鼠皮质中的动态表达, TUNEL法检测大鼠皮质神经细胞凋亡情况。③结果用SPSS13.0统计软件进行统计分析。方差齐的指标采用一般线性模型中完全随机设计资料的方差分析,并行LSD法进行组间两两比较,方差不齐的指标则用Kruskal－Wallis法行秩和检验。数据以 ±s 表示,以P﹤0.05为差异有统计学意义。ERK表达与神经细胞凋亡的相关性用双变量相关分析。 主要观察指标：大鼠脑皮质ERK表达的动态变化、神经细胞凋亡情况以及脑皮质神经组织结构形态学变化。 结果： HE染色显示SAH模型组神经组织水肿,神经细胞出现不同程度的凋亡和坏死。免疫组化分析显示,SAH后6 h ERK染色阳性细胞开始出现在皮质,12 h达高峰,此后阳性细胞逐渐减少。神经细胞凋亡在SAH 6 h时即可发生,24 h达到高峰。SAH模型组ERK阳性细胞率和细胞凋亡率较对照组均显著升高（P <0.05）。ERK表达与神经细胞凋亡之间存在显著正相关关系（r =0.742,P =0.001）。与干预组中盐水对照组ERK阳性细胞率（13.7%±2.1%）比较,乙酰胆碱（Ach）可能通过下调ERK的表达（8.1%±1.7%）,使神经细胞凋亡减少（P <0.05）。去甲肾上腺素（NE）可上调ERK的表达（18.4%±2.1%）,但与对照组比较,神经细胞凋亡无统计学意义（P >0.05）。 结论： ERK在SAH大鼠皮质中呈规律性的动态表达,并与神经细胞凋亡之间存在显著正相关关系,ERK信号通路可能通过介导神经细胞凋亡参与SAH导致的脑损伤。Ach可通过下调ERK的表达,使神经细胞凋亡减少。     

血压变异性对冠心病患者认知水平的影响

正冠心病是临床常见疾病,具有极高的死亡率,对人类健康造成了严重威胁~([1])。高血压(EH)是冠心病的一个重要危险因素,临床对冠心病与高血压之间关系的研究多侧重于冠心病与高血压升高幅度之间的关系,而对血压变异性(BPV)与冠心病关系的相关报道甚少。冠心病患者常发认知功能障碍,认知功能障碍主要表现为人格改变、精神错乱、焦虑、记忆、社交能力受到损害~([2,3])。冠心病患者认知功能障碍是临床面临     

高效液相色谱法测定静心片中五味子醇甲的含量

目的采用高效液相色谱法测定静心片中五味子醇甲的含量。方法样品以甲醇提取；Hypersil ODS2柱，流动相为甲醇-水（60∶40），检测波长217nm。结果空白试验阴性无干扰，平均回收率101.10%，RSD为1.9%。结论本法简便可行，重现性好，可用于该制剂的质量控制。     

HCV刺激人脐静脉内皮细胞发生动脉粥样硬化的机制

目的以HCV体外刺激人脐静脉内皮细胞(HUVECs)为模型,探讨HCV感染致动脉粥样硬化发生的机制。方法采用1. 0 MOI HCV病毒颗粒刺激HUVECs,CCK8检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡及周期;划痕实验及单核内皮黏附实验评估HCV对HUVECs迁移及黏附能力的影响;荧光定量PCR及Western blot检测HCV刺激HUVECs炎症因子及内皮损伤因子的表达。2组间比较采用两独立样本t检验,多组间比较采用方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果与对照组比较,HCV对HUVECs的生长增殖、细胞凋亡及周期无明显影响(P值均 0. 05)。HCV刺激抑制了HUVECs的迁移能力,而增强其黏附能力。与对照组比较,HCV刺激促进内皮细胞炎症因子IL-6、IL-1β以及趋化因子CXCL10、单核细胞趋化蛋白-1 mRNA水平升高(t值分别为-10. 155、-12. 048、-5. 025、-20. 116,P值均0. 05)及蛋白表达增加(F值分别为2541. 739、4806. 490、477. 608、501. 380,P值均0. 001)。HCV刺激导致HUVECs内皮损伤因子内皮素-1、血管内皮生长因子以及黏附分子—细胞间黏附分子-1、血管细胞黏附因子-1表达上调(t值分别为-4. 530、-4. 497、-7. 692、-7. 449,P值均0. 05)。结论 HCV可以引起内皮细胞炎症改变和功能障碍,影响动脉粥样硬化的发生。     

司美格鲁肽联合胰岛素治疗高龄糖尿病足坏疽合并感染1例

报道1例在联勤保障部队天津康复疗养中心内分泌科就诊的高龄糖尿病患者糖尿病足坏疽合并感染, 采用司美格鲁肽联合胰岛素降糖、通过换药及改善循环、营养神经等综合治疗, 血糖控制平稳, 创面完全愈合的过程。患者为92岁男性, 因发现血糖高20余年, 左足趾缺如处创面感染1个月入院。结合病史, 完善相关检查, 患者明确诊断为2型糖尿病、糖尿病下肢动脉硬化闭塞症、左足坏疽(Wagner 4级)伴感染。入院后给予司美格鲁肽0.25 mg、1次/周, 联合甘精胰岛素20 U、1次/d, 盐酸二甲双胍片0.5 g、3次/d控制血糖, 后根据血糖逐步调整至司美格鲁肽0.5 mg、1次/周, 甘精胰岛素10 U、1次/d, 联合二甲双胍片0.5 g、3次/d, 同时加用扩血管、改善微循环药物及局部清洁消毒、换药外敷等治疗。治疗半年后, 患者左足足趾缺如处创面愈合。治疗过程中, 患者血糖控制平稳, 且无胃肠道不适症状, 足部创面愈合效果满意。