雷公藤甲素亚慢性中毒对昆明种小鼠肾脏及睾丸的影响

为了观察雷公藤甲素肾脏及睾丸的毒性影响，80只昆明小鼠随机成为3个实验组和1个对照组，60d内3个实验组的小鼠每48h腹腔注射雷公藤甲素一次（A组：0.025mg/kg,B组：0.05mg/kg,C组：0.1mg/kg).结果显示：肾脏闰变除肾不眨小皮细胞变性，坏死外，肾小管管腔内出现蛋白管型，最后处死的所有实验组动物的90％以上肾小球囊壁壁层上皮不同和蔼也增生，BUN检测结果表明，B组和C组均显著性升高（P＜0．05），提示有发展成肾功能衰竭的趋势,主明甲素对小鼠的的肾损害可能是亚慢性中毒者的主要死亡原因之一，睾丸病变明显，表现为睾丸萎缩，脏器系数降低，各级生精细胞变性，坏死，数量减少，其中以精子，精子细胞和次级精母细胞最敏感，实验结果还表明甲素对睾丸具有蓄积毒性，提示雷公藤在抗生素作用中，甲素起着非常重要的作用。     

凝血因子Ⅷ内含子X ba Ⅰ多态位点检测及其在血友病A产前诊断中的应用

目的建立凝血因子Ⅷ(FⅧ)基因内含子22的 Xba Ⅰ多态位点高特异的基因连锁分析法,并应用于血友病 A(HA)家系中孕妇携带者检测及产前基因诊断。方法用长距离 PCR 特异性扩增206个无血缘关系个体中 FⅧ基因内含子226.2 kb 片段并进行Ⅹba Ⅰ酶切,计算Ⅹba Ⅰ多态性位点的基因频率和多态信息量;用内含子22倒位检测及 FⅧ基因内Ⅹba Ⅰ,Bcl Ⅰ,Hind Ⅲ和(CA)n 二核苷酸重复序列多态性位点和 FⅧ基因外 DXS52多态性位点对20个 HA 家系进行间接基因诊断。结果ⅩbaⅠ多态性位点的基因频率和多态信息量分别是0.5475和0.4955;20个 HA 家系中,7个为内含子22倒位,13个非倒位家系中有6个家系Ⅹha Ⅰ均提供多态信息,其中2个家系只能用Ⅹba Ⅰ作出分子诊断,诊断率达46.15%;两个或两个以上连锁分析方法均提供多态信息的有8个家系。结论改进的 FⅧ基因内Ⅹba Ⅰ多态位点是一个特异性高,信息量大的分子诊断标志。联合用22内含子倒位及Ⅹba Ⅰ等5种间接检测方法大大地提高了 HA 基因诊断率,是防止患儿出生,阻断致病基因传递的有效措施。     

风疹病毒JR23株包膜糖蛋白E2的基因扩增与序列分析

目的：扩增风疹病毒（RV）JR23株包膜糖蛋白E2的基因片段，分析E2多二级结构特征及E2蛋白跨膜区结果，为研究E2基因结构与蛋白功能的关系。RV结构蛋白之间的相互作用奠定基础。方法：提取感染RV JR23株的BHK21细胞总RNA，利用RT－PCR方法扩增RV JR23株E2基因片段，将PCR产物测序；利用DNAstar软件分析JR23株E2多肽的二级结构特征；利用TmPred软件对E2蛋白的跨膜区进行预测分析。结果：利用BLAST软件分析测序结果，证明扩增产物为RV E2基因片段；DNAstar两个模型对E2多肽的α螺旋、β折叠等区域的分析有较大差异。尤其是β区，G－R模型的预测范围远大于C－F模型，二级结构中带电性与亲水区的分析结果与E2蛋白的已知功能相符；TmPred预测的有意义跨膜区有4个，少于实际值。结论：经RT－PCR扩增，扩增产物的RV JR23株E2基因序列片段，为进一步研究E2基因和蛋白结构与功能奠定基础，软件分析的结果与实际情况有差异，可能是成熟的E2蛋白与E1蛋白形成异二聚体，而部分改变了自身构象。     

动物脾脏RNA生产工艺研究

采用羊脾作为原料，苯酚-稀盐法进行RNA提取，提取率为1．45％。蛋白质浓度检验试剂盒BCA法测定蛋白含量为2．05％，紫外分光光度计测定吸光度比值（260nm／280nm）为1．84，定磷法测DNA含量为2．74％，地衣酚显色法测RNA含量为94．50％。     

唐氏综合征患者永生细胞系的建立

目的建立唐氏综合征患者永生细胞系，为唐氏综合征的基因诊断提供标准品。方法采集唐氏综合征患者外周血，采用EB病毒转化外周血B淋巴细胞和加环孢霉素A抑制T淋巴细胞的技术，建立永生淋巴母细胞系。用细胞遗传学方法、实时荧光定量PCR及短串联重复序列（STR）多态性分析技术检测其建系前后的遗传特性及稳定性。结果建系成功，经过传代、冻存和复苏，建系后第10代染色体核型和DNA标志未发生改变。建系前后染色体核型均为47，XX，＋21。多重荧光相对定量PCR鉴定，唐氏综合征患者外周血原代细胞和转化后第10代细胞株的△Ct值均在-2．55±3s范围内，与正常对照相比△Ct值范围无重叠。21号染色体上的STR基因座D21S11多态性分析表明，唐氏综合征患者外周血原代细胞和转化后第10代细胞株均有同样的3种基因型。结论染色体核型和DNA分析表明，唐氏综合征患者永生细胞系建立前后遗传特点一致，且稳定，可用作基因诊断试剂盒产品质量检测、质量控制的标准品。     

凝血因子Ⅷ内含子ⅩbaⅠ多态位点检测及其在血友病A产前诊断中的应用

目的建立凝血因子Ⅷ（FⅧ）基因内含子22的Ⅹba Ⅰ多态位点高特异的基因连锁分析法，并应用于血友病A（HA）家系中孕妇携带者检测及产前基因诊断。方法用长距离PCR特异性扩增206个无血缘关系个体中FⅧ基因内含子226．2kb片段并进行Ⅹba Ⅰ酶切，计算Ⅹba Ⅰ多态性位点的基凶频率和多态信息量；用内含子22例位检测及FⅧ基因内Ⅹba Ⅰ，BclⅠ，HindⅢ和（CA）n二核苷酸重复序列多态性位点和FⅧ基因外DXS52多态性位点对20个HA家系进行间接基因诊断。结果ⅩbaⅠ多态性位点的基因频率和多态信息量分别是0．5475和0．4955；20个HA家系中，7个为内含子22倒位，13个非倒位家系中有6个家系Ⅹba Ⅰ均提供多态信息，其中2个家系只能用Ⅹba Ⅰ作出分子诊断，诊断率达46．15％；两个或两个以上连锁分析方法均提供多态信息的有8个家系。结论改进的FⅧ基因内Ⅹba Ⅰ多态位点是一个特异性高，信息量大的分子诊断标志。联合用22内含子倒位及Ⅹba Ⅰ等5种间接检测方法大大地提高了HA基因诊断率。是防止患儿出生，阻断致病基因传递的有效措施。     

济南市部分区县老年人生活质量与生活满意度研究

目的:探讨老年人群生活质量和生活满意度的状况及影响因素.方法:采用SF-36健康调查表,对济南市1386名老年人进行调查.结果:老年人群慢性病的患病率为65.1%;影响老年人生活满意度的主要因素是:心理状况、家庭和睦情况、是否丧偶、慢性病和经济收入;老年人生活质量的主要影响因素为:生活满意度、慢性病、心理状况、生活功能状况,家庭和睦和经济收入.结论:老年人的生活满意度与生活质量密切相关.生理、心理和社会经济状况显著影响老年人的生活质量.     

单纯疱疹病毒Ⅰ型糖蛋白D酵母表达载体的构建

目的:构建含有单纯疱疹病毒Ⅰ型包膜糖蛋白D全基因片段的克隆载体及酵母表达载体,为进一步真核表达重组gD蛋白奠定基础.方法:应用PCR方法从HSV-Ⅰ基因组中扩增糖蛋白D的全长基因,产物回收后与pMD-18T载体连接,并转化,经氨苄筛选及测序,建立克隆载体pMD18T-gD;克隆载体与表达载体双酶切后,产物连接、转化大肠杆菌JM109,筛选、测序后确定构建了酵母表达载体pGAPZαA-gD.结果:重组质粒pMD18T-gD和pGAPZαA-gD经PCR和酶切均出现相应长度的片段,测序结果证实为gD基因,序列分析同源性为99.66%.结论:成功构建了含有单纯疱疹病毒Ⅰ型糖蛋白D全基因的克隆载体及酵母表达质粒.     

孕中期血清唐氏综合征筛查与不良妊娠结局关联

目的 研究孕中期唐氏综合征筛查与不良妊娠结局关联及甲胎蛋白(AFP)、β人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)、游离雌三醇(uE3)单个指标与不良妊娠发生的关联。方法 采用连续性入组方法选取2014年3月31日至2021年4月29日在北京朝阳医院进行唐氏综合征筛查的孕妇进行回顾性队列研究。结果 在7 682例孕妇中,筛查高风险者492例,占6.40%;共有100例孕妇出现了不良妊娠结局(1.30%)。筛查高风险孕妇中有21例发生不良妊娠结局,发生率为4.27%,显著高于筛查低风险者(1.10%)。调整了糖尿病史、遗传病家族史、吸烟、饮酒后,与低风险值相比,筛查高风险者发生不良妊娠结局的可能性高达4.022倍(95%CI:2.405-6.442);21三体风险值越高,不良妊娠结局的发生率越高(P<0.001)。筛查高风险组在胎儿畸形、染色体异常、胎停育的发生率显著高于低风险组(P<0.05)。AFP原始数值每升高1 ng/mL,发生不良妊娠结局的可能性上升到1.019倍;AFP中位数倍数值(MOM)每升高1,发生不良妊娠结局的可能性上升2.258倍;uE3原始数值每升高1 ng/m...