丙型肝炎病毒非结构蛋白NS5A反式激活基因的克隆化研究

应用抑制性消减杂交技术构建丙型肝炎病毒非结构蛋白5A（HCV NS5A）反式激活基因差异表达的cDNA消减文库，克隆HCV NS5A蛋白反式激活相关基因。以HCV NS5A表达质粒pcDNA3.1(－）-NS5A转染HepG2细胞，以空载体pcDNA3.1(－）为对照，制备转染后的细胞裂解液，提取mRNA并逆转录为cDNA，经RsaI酶切后，将实验组cDNA分成两组，分别与两种不同的接头衔接，再与对照组cDNA进行消减杂交及两次抑制性PCR，将产物与T／A载体连接，构建cDNA消减文库，并转染大肠杆菌进行文库扩增，随机挑选克隆PCR扩增后进行测序及同源性分析。文库扩增后得到121个阳性克隆，经菌落PCR分析，得到115个200－1000bp的插入片段，对其中的90个片段测序，并进行同源性分析，显示31种在基因编码蛋白和15种未知功能基因序列，包括一些与细胞周期、细胞凋亡、信号传导及肿瘤发生等细胞生长调节密切相关的蛋白编码基因，可能是NS5A反式激活靶基因。结果提示，成功构建了HCV NS5A反式激活基因差异表达的cDNA消减文库，该文库的建立为进一步阐明HCV NS5A反式调节的靶基因及致肝细胞癌发生的分子生物学机制提供了理论依据。     

儿童肾病综合征尿液瘦素、可溶性瘦素受体与不同尿蛋白水平变化

瘦素(leptin)、可溶性瘦素受体(sOBR)作为机体调节脂质代谢的重要物质,是否经肾小球滤过及在肾病综合征(nephrotic syndrome,NS)患儿尿液中水平的变化情况,目前研究甚少.     

氟哌噻吨美利曲辛对老年急性冠脉综合症患者焦虑抑郁情绪及临床疗效的影响

目的观察氟哌噻吨美利曲辛对老年急性冠脉综合症（ACS）伴抑郁患者的临床疗效。方法将人选的88例老年ACS伴抑郁的患者随机分为氟哌噻吨美利曲辛组（n：43）和对照组（n=45）,氟哌噻吨美利曲辛组在常规内科治疗基础上给予氟哌噻吨美利曲辛,每天早晨、中午各1片口服;对照组给予常规内科药物治疗。12周后观察两组SDA和SDS评分、主要心血管不良事件（MACE）发生率及心脏自主神经功能等情况。结果氟哌噻吨美利曲辛组的SDA和SDS评分较对照组明显下降[（34．28±6．35）分,（52．68±5．74）分;（41．19±4．63）分,（54．68±4．32）分,P〈0．05];主要心血管不良事件（MACE）发生率显著减少（4．6％,28．9％,P〈0．05）;氟哌噻吨美利曲辛组较对照组SDNN明显升高[（109．03±23．08）ms,（98．29±27．44）md,P〈0．05]、LF显著降低[（152．89±92．75）ms。,（249．21±64．17）ms2,P〈0．05]。结论氟哌噻吨美利曲辛可明显改善老年ACS伴抑郁患者的抑郁症状,通过改善心脏的自主神经功能,而减少严重心律失常的发作,改善患者的短期预后。     

CT 导引支气管镜肺泡灌洗对治疗重症肺炎合并脓毒症休克的效果

目的：探讨CT导引支气管镜肺泡灌洗对治疗肺感染合并脓毒症休克的疗效。方法对重症医学科2012年10月-2013年6月收治的47例重症肺炎合并脓毒症休克患者的临床资料进行回顾性分析。患者入选标准参照2001年国际脓毒症会议。将入选患者随机分为C T 导引支气管镜肺泡灌洗组（A组）和对照组（B组）,二组均行早期目标导向治疗（EGDT ）,CT 导引支气管镜肺泡灌洗组给予支气管镜肺泡灌洗连续做3d ,1次／d ,而对照组不给予支气管肺泡灌洗。记录患者年龄,性别,开始试验时、治疗后3d、7d的APACHEⅡ评分、肺感染评分、白细胞计数,乳酸降至2mmol／L的时间,机械通气时间,ICU住院时间。结果 A、B二组性别、年龄差异无统计学意义（P＞0．05）,开始治疗时APACHEⅡ评分、肺感染评分以及开始治疗时二组白细胞计数差异无统计学意义（P＞0．05）;治疗后3d和7d时 A组 APACHEⅡ评分、肺感染评分、白细胞计数明显低于B组（P＜0．05）;A组乳酸降至2mmol／L的时间、机械通气时间和ICU住院时间明显短于B组（P＜0．05）;CT 导引支气管镜肺泡灌洗操作无任何并发症的发生。结论CT导引支气管镜肺泡灌洗对治疗重症肺炎合并脓毒症休克患者安全有效,值得临床推广。     

PPARγ、STAT-3和BAD在肝细胞肝癌的表达及相互作用研究

目的研究肝细胞肝癌中过氧化物酶体增殖物活化受体（peroxlsome proliferators activated receptorsγ，PPARγ）、信号转导和转录激活因子3（STAT-3）及bcl-2相关促凋亡蛋白（BAD）的表达情况及其与临床病理特征的关系。方法利用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blotting技术分别对30例肝细胞肝癌,相应癌旁组织和正常组织包括部分硬化组织中上述动三种指标的mRNA及蛋白含量进行半定量分析,将结果与临床资料进行统计分析。结果PPARγ、STAT-3及BAD mRNA和蛋白在肝细胞肝癌,癌旁和正常组织中的表达有统计学意义,其中mRNA表达分别为PPARγ（χ^2=77.268,P〈0.05）,STAT-3（F=370.187,P〈0.05）,BAD（F=82.647,P〈0.05）,蛋白表达分别为PPARγ（χ^2=7,590,P〈0.05）,STAT-3（χ^2=22.419,P〈0.05）,BAD表达与组织分化程度有关（（F=141.625,P〈0.05）,其中mRNA分别为PPARγ（t=-2.628,P〈0.05）,STAT-3（t= -3.810,P〈0.05）,BAD（t=5,042,P〈0.05）,蛋白分别为PPARγ（M=0.000,P〈0.05）,STAT-3 （t=-3.759,P〈0.05）,BAD（M=61.500,P〈0.05）与肿瘤大小,瘤栓有无,微转移灶及是否发生复发转移等无关。PPARγ与STAT-3mRNA及蛋白表达均为正相关（r=0.750,P〈0.05,r=0.717,P〈0.05）。PPARγ与BAD mRNA蛋白表达均为负相关（r=-0.401,P〈0.05,r=-0.417,P〈0.05）。STAT-3与BADmRNA蛋白表达均为负相关（r=-0.617,P〈0.05,r=-0.485,P〈0.05）。结论PPARγ、STAT-3在肝细胞肝癌高表达而BAD低表达并与其组织分化和发展有关。     

HPLC法测定降脂颗粒中人参皂苷Re的含量

目的:建立降脂颗粒中人参皂苷Re的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法测定NH2柱以乙腈-水(84:16)为流动相,检测波长为203nm.结果:人参皂苷Re进样量在0.512～2.56μg之间线性良好,r=0.9998,样品平均加样回收率96.87%,RSD为0.94%.结论:此方法简便、准确、重现性良好,可作为降脂颗粒中人参皂苷Re的含量测定方法.     

皮层下脑小血管病性认知障碍证候分型与影像表型负荷、抑郁严重程度的相关性

目的:探讨皮层下缺血性脑小血管病性认知障碍的证候分型特征与影像表型负荷、抑郁严重程度的相关性。方法:纳入符合标准的受试者131例,分别评估其蒙特利尔认知评估(Montreal cognitive assessment,MOCA)积分、(Hamilton depression rating scale,HAMD-17)积分、脑小血管疾病(small cerebral vascular disease,cSVD)影像总负荷及中医证候分型,二元Logistic回归进行相关性研究。结果:肾精亏虚、痰浊阻络出现的频次显著高于其他基础证型(P0.05);虚实夹杂证候具有更长的病程(P0.05),但认知损害程度却相对较轻(P0.05),肾精亏虚痰浊阻络证具有更高的抑郁严重程度(P0.05);多因素Logistic回归分析显示,cSVD影像负荷积分对肾精亏虚痰浊阻络证型的预测价值最高且独立于认知受损程度及病程存在(P0.05)。结论:"肾虚""痰浊"为主要病理因素时,应同时关注其认知损害及情感症状,脑小血管病性总体负荷对肾精亏虚痰浊阻络证具有独立的预测价值,其临床应用值还须一步深入研究。     

医学生医患关系认知现状及其对专业学习的影响

目的:调查医学生对医患关系的认知情况及其对专业学习的影响.方法:使用自制调查问卷对蚌埠医学院临床医学专业大一至大五的学生进行抽样调查.结果:高年级比低年级有更多的医学生认为现在的医患关系非常紧张(P<0.01),医生是一个高风险职业(P<0.01),在目前的医患关系下工作肯定会压力不小(P<0.01),担心以后会面临医患纠纷的困扰(P<0.01);高年级比低年级有更少的医学生对未来一段时间医患关系的改善比较乐观(P<0.01),认为今后一段时间医患关系的发展前景不断改善(P<0.01),医患纠纷的发生双方均有责任(P<0.01);低年级比高年级更重视职业道德(P<0.05);新闻媒体是医学生了解医患关系的主要途径,教师的言传身教成为影响医学生对医患关系看法的不可忽视的因素;高年级对专业的满意度低于低年级学生(P<0.01);认为医患关系紧张的医学生学习积极性比认为医患关系不紧张的医学生高(P<0.01).结论:当前不良的医患关系已经通过多种渠道对医学生的专业满意度和择业观造成了负面影响,需要从社会、媒体、学校、教师等多方面加强措施减少这种负面影响.