AMPK-mTOK信号通路参与百草枯致PC12细胞的自噬抑制作用

目的探讨AMPK-mTOR信号转导通路在百草枯(paraquat,PQ)诱导大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤细胞(PC12)自噬异常中的调控作用。方法用终浓度0、25、50、100、200、300、400 μmol/L PQ处理PC12细胞24 h,300 μmol/L PQ处理细胞不同时间(6、12、24、48 h),四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞相对存活率,确定剂量/时间-效应关系;终浓度0、100、200、300 μmol/L PQ处理细胞24 h,分光光度法检测培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)活力;二氯荧光素双醋酸盐(DCFH-DA)法检测细胞内活性氧(ROS)水平;单丹磺酰尸胺(MDC)染色法观察自噬溶酶体的表达及分布变化;免疫荧光(IF)检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)表达水平;免疫印迹法(Western blot)检测自噬相关蛋白LC3Ⅱ、p62、Beclin1及AMPK-mTOR信号通路蛋白p-AMPK、p-mTOR表达水平。结果与对照组比较,100、200、300、400 μmol/L PQ染毒组的细胞存活率明显降低,且呈剂量依赖关系,差异有统计学意义(P<0.05)。300 μmol/L PQ处理细胞不同时间(6、12、24、48 h),细胞存活率随染毒时间的延长而下降,其中12、24、48 h染毒组的差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,100、200、300 μmol/L PQ染毒组细胞上清液中LDH活力明显升高,细胞内ROS荧光强度明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);MDC染色结果显示,PQ染毒组的自噬溶酶体在核周分布密度降低、荧光强度减弱、自噬水平降低;免疫荧光结果显示,PQ染毒组的LC3荧光强度减弱,细胞自噬水平下降,与MDC染色结果一致。Western blot结果显示,与对照组比较,PQ染毒组的自噬相关蛋白LC3Ⅱ、Beclin1表达水平均明显降低,而p62蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。200、300 μmol/L PQ染毒组的p-AMPK蛋白表达水平降低,p-mTOR蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PQ致PC12细胞损伤过程中,细胞自噬水平降低,AMPK-mTOR信号通路发挥调节作用。     

ABO血型实验室检测方法现状及进展

自20世纪奥地利生理学家Landesteiner发现人类ABO血型以来,ABO血型系统就因为其在临床输血上的重要指导作用成为最具临床意义的血型系统[1]。ABO血型的实验室检测方法也由最初的玻片法发展为敏感性特异性更强的方法。笔者就ABO血型系统的实验室检测方法做一综述。1ABO血型系统概述ABO血型抗原是由ABO血型抗原基因编码的特异性糖基转移酶催化合成的红细胞膜表面的糖蛋白和糖脂。ABO抗原决定簇共有5种类型,由单糖经转移酶转移到特定核心多糖链的末端生成,分别决定血型抗原基础物质、H抗原、A抗原、A1抗原以及B抗原的抗原表型,如图…     

山莨菪碱股动脉注射治疗糖尿病性痛性周围神经病变的临床观察

糖尿病性周围神经病变(DPN)是糖尿病最常见的慢性并发症之一,发病率为50%～80%,痛性周围神经病变会直接影响病人的生活质量,目前缺乏疗效显著的治疗方法。我院于2005年3月～2006年3月对80例住院的糖尿病性痛性周围神经病变患者在用一般全身扩血管、改善微循环、控制血糖等综合治疗效果欠佳时经山莨菪碱(654-2)股动脉注射治疗,取得较好疗效,现报告如下:资料与方法1.一般资料入选标准:80例患者均符合1999年WHO糖尿病及中华医学会糖尿病分会所制定的《中国糖尿病防治指南》诊断标准,且具有下肢皮肤麻木、蚁走感、发凉,针刺痛、烧灼样疼痛等…     

椎管内髓外黑素瘤1例

<正>患者,女,55岁。进行性双下肢无力,乏力4个月入院行MR胸椎检查示(图1):T7⁹水平椎管内髓外可见梭形占位影,于T1WI呈等信号,于T2WI呈低信号,于脂肪抑制序列呈等信号,病变边界清楚,增强扫描后病变均匀强化,相应水平椎管狭窄并脊髓受压、移位、变细。另外数个胸椎体内可见多发结节影,边界较清楚,于各序列均呈等高信号,强化后明显     

电化学免疫传感器及其在临床检验中的应用进展

电化学免疫传感器将传感技术的高灵敏度和免疫反应的特异性结合起来,把抗原-抗体特异性反应过程中产生的信号通过换能器转变成电信号,从而对抗原或抗体进行定量检测.与传统的检测技术相比较,具有高灵敏度、高特异性、操作简便、分析速度快、价格低廉等优势,且易于实现自动化操作,已经在临床诊断、医疗保健、环境监测、食品安全等领域得到广泛应用,成为传感器领域的研究热点.     

临床急诊检验实习教学改革

临床急诊患者大多数在晚上、少数在白天因急症来医院急诊科看病,临床急诊检验是检验医学科重要的工作内容。每届实习人员均反应临床急诊检验项目较多、仪器也较多,患者均为急诊,病情紧急,要求在较短的时间内保质保量完成检验工作,实习压力大。近几年本院对临床急诊检验实习进行教学改革[1-2],取得较好效果。临床急诊检验实习培训手册编写及虚拟实验室建设     

幽门螺杆菌ssDNA适配子的筛选及其应用

目的通过富集的配基系统进化技术(SELEX)筛选出与幽门螺杆菌(HP)菌体具有高亲和性适配子,并且利用其检测组织和活体内HP的感染。方法培养HP细菌,利用SELEX筛选获得HP菌体的适配子。在HP感染患者活检组织验证其结合。结果从第6轮筛选所得ssDNA中筛选出一条高结合力的适配子命名为HP1,将适配子HP1区别于其他筛选出的适配子,并检测其与幽门螺旋杆菌的亲和力。结论初步获得了针对HP菌体筛选出高亲和性适配子,为开发HP诊断试剂奠定了基础。     

医务人员艾滋病 梅毒和乙型肝炎母婴传播防治知识知晓率及其影响因素

目的了解重大公共卫生服务专项经费支持开展预防艾滋病、梅毒和乙型肝炎(乙肝)母婴传播(Inte-grated prevention of mother-to-child transmission,IPMTCT)项目地区的医务人员,对母婴传播防治相关知识的知晓状况及其影响因素,为明确下一步项目工作中人员能力建设及支持重点提供参考依据。方法于2011年9-10月,对2省4个项目县(市、区)所有承担IPMTCT工作的医务人员进行问卷调查。结果734名医务人员IPMTCT综合知识知晓率为48.9%(359/734)。88.1%(647/734)的医务人员近1年接受过相关培训。多因素Logistic分析结果显示,调整地域和年龄因素后,有预防艾滋病母婴传播工作(Prevention of mother-to-child transmission,PMTCT)基础的项目地区,医务人员的IPMTCT综合知识知晓率高于无PMTCT工作基础的地区的医务人员[比值比(Odds ratio,OR)=5.810,95%可信区间(Confidence interval,CI)=4.037～8.362];近1年接受过相关培训的医务人员知识知晓率高于未接受过培训的医务人员(OR=3.014,95%CI=1.674～5.426);乡镇级医务人员相关知识水平低于县级及以上医务人员(OR=0.335,95%CI=0.226～0.496);相对于临床人员,保健、检验等专业人员相关知识水平低(OR=0.413,95%CI=0.256～0.668;OR=0.274,95%CI=0.154～0.487)。结论医务人员IPMTCT综合知识水平普遍较低,乡镇医务人员和从事保健、检验工作的医务人员相关知识更为薄弱,有PMTCT工作基础的地区和近期接受过相关培训的医务人员,IPMTCT综合知识水平高。应进一步加强培训,尤其重视对乡镇医务人员、保健人员和检验人员的培训。加大对没有PMTCT工作基础的地区的培训支持。     

模拟微重力对机体内皮细胞、血小板功能的影响

重力状态的改变将引起机体一系列生理机能的异常,如心血管系统中血液的重新分布、骨骼系统中骨质破坏的增加、造血系统中造血组织的减少等.人类登月计划的顺利实现以及空间站的成功建立,为研究微重力状态下机体生理功能的改变开启了新的篇章.随着模拟微重力仪的研发更是使这一领域出现了飞速的发展,但关于微重力状态下机体凝血功能的改变还有...     

2例异体手移植术后受者T细胞亚群与CD3~+HLA-DR~+细胞水平的动态观察

目的　研究异体复合组织移植 手移植术后病人外周血T淋巴细胞亚群及CD3+ HLA DR +T细水平的动态变化。方法　用流式细胞术测定了 2例异体手移植术后不同时间外周血CD3+ 、CD3+ CD4+ 、CD3+ CD8+ 、CD3+ HLA DR+ (活化T细胞 )细胞百分率 ,及CD4/CD8比值 ,以病人术前一周结果作对照。结果　使用免疫抑制剂后 ,于术后第 1日CD3+ 、CD3+ CD4+ 、CD3+CD8+ 、CD3+ HLA DR+ 细胞水平 ,CD4/CD8比值都开始降低 ,以 3～ 5日为最低水平。术后 8日 ,上述指标逐渐回升 ,至 15日后基本趋于平稳 ,但CD3+ 、CD3+ CD4+ 细胞及CD4/CD8比值仍明显低于术前 ,而CD3+ CD8+ 、CD3+ HLA DR+ 细胞水平则高于术前。结论　异体复合组织 手移植术后病人外周血T淋巴细胞亚群及CD3+ HLA DR+ 细胞水平的变化与单一组织器官移植 (肾移植 )术后稳定期的变化一致 ,也与病人术后的稳定病情相吻合。