晶状体膜蛋白MIP基因C末端一个新的错义突变导致双眼多形性先天性白内障

目的 定位一个双眼多形性先天性白内障家系的致病位点,寻找疾病家系的致病基因.方法 应用ABI-MD10试剂盒中的常染色体382个微卫星位点,对一个常染色体显性、双眼具有不同白内障形态的先天性白内障家系进行全基因组扫描.MLINK软件进行两点连锁分析.直接测序候选基因外显子.结果 在D12S83处获得最大LOD值Zmax=5.44(θ=0),该家系致病位点被定位到12p11.2-q15之间的区域上,在该区域的白内障候选基因晶状体膜蛋白基因(major intrinsic protein,MIP)的第4外显子中发现单个碱基错义突变,702ntG→A,导致p.R233K.结论 该先天性白内障由MIP基因702ntG→A突变所致,导致MIP蛋白质的C-末端中p.R233K,从而可能减少了氢键的形成,影响了该蛋白C-末端的稳定性,推测影响了MIP对水的调节及由该蛋白质形成的细胞之间的连接.这一新突变为目前世界上首次报道.     

建立一种用重组蛋白检测抗口蹄疫病毒抗体的间接ELISA方法

目的研究以重组蛋白作为包被抗原检测口蹄疫病毒（FMDV）感染后的动物血清中特异性抗体的可能性,为建立一种非病毒颗粒的ELISA检测试剂盒提供实验依据。方法利用自行构建表达的O型口蹄疫病毒VP1表位肽重组蛋白（VP1epi）作为包被抗原,采用间接ELISA方法确定抗原的最佳工作浓度和包被方法,优化各项实验条件,并以FMDV感染后的豚鼠血清作为标准阳性血清确定ELISA方法的特异性和灵敏度。结果FMDV感染后的阳性豚鼠血清可以很好地识别VP1epi重组蛋白,用此蛋白包被检测抗FMDV抗体的灵敏度可达1∶3200,并证明所检测的抗体是FMDV特异性的。结论VP1epi重组蛋白可以替代FMDV颗粒用于建立检测抗FMDV抗体的ELISA试剂盒。     

大鼠睾丸血管构筑的观察

本文通过血管灌注透明标本和微血管腐蚀铸型扫描电镜,观察大鼠睾丸的大血管和微细血管的构筑。大鼠生精小管的周围,有两种小血管配布。1.管间血管:该血管或为1条毛细血管前微动脉,或为2条并行的较大的毛细血管连结成网状,位于生精小管间三角形的间质柱内,并与小管平行走行。2.管周毛细血管:连于管间血管之间,呈绳梯状围绕生精小管,并在生精小管上皮下固有膜内,形成管周毛细血管网。本文还观察了大鼠睾丸较大血管及睾丸固有鞘膜脏层的血管配布特点,讨论了这些血管配布的意义。     

抗BCG Hsp65单克隆抗体的鉴定及应用研究

目的:对制备的5株抗BCG Hsp65单克隆抗体(Hsp65 mAb)做进一步鉴定和应用.方法:采用ELISA方法对mAb的效价、亚类和结合抗原表位特性进行鉴定,应用mAb对Hsp65融合蛋白进行了Western blot和免疫荧光检测.结果:5株mAb的类型均为IgG,其中ⅠC1和ⅡC3株mAb为IgG1亚类,ⅠA5、ⅠC3和ⅠD6株mAb为IgG2a亚类. 抗原表位竞争结合分析显示,在配对的不同亚类mAb中,存在着结合Hsp65表面不同抗原表位的mAb.通过Western blot检测证实,Hsp65 mAb对Hsp65-MUC1检测结果,与MUC1 mAb的一致.细胞免疫荧光检测显示,制备的 mAb能够识别通过蛋白装载进入树突状细胞内的Hsp65-PSA.结论:获得的Hsp65 mAb可做为检测工具,用于研究BCG Hsp65及其融合蛋白的功能和表达.     

CCKB受体诱发的小鼠神经元蛋白质磷酸化的研究

目的：从蛋白质可逆磷酸化修饰的角度初步勾勒出CCK_B型受体介导的胞内信号转导途径。方法:培养的小鼠大脑皮质神经元分为实验组、对照组和受体拮抗剂组，在无磷培养基加入 ［32P］-NaH₂PO₄标记细胞中的磷蛋白后，刺激组给予CCK₈（10^-7 mol/L），对照组加入等量的无磷培养基，受体拮抗剂组在分别加入CCK_A型、CCK_B型受体拮抗剂L364 718、L365 260以及L364 718＋L365 260，浓度均为10^-8 mol/L，孵育10 min后，再加入10^-7 mol/L CCK₈，37 ℃作用60 min，液氮中终止磷酸化反应。裂解细胞提取蛋白质，双向电泳分离，放射自显影7d后，获得磷酸化蛋白的放射自显影双向电泳图谱。采用PDQuest 2D分析软件对图谱进行差异分析，并在Swiss-Prot蛋白质数据库和自建磷蛋白数据库中查询定性。结果:CCK₈作用60 min后，小鼠神经元CCK₈信号转导相关磷酸化蛋白有：多种蛋白激酶、细胞信号分子、生长因子受体、转录因子等。加入L364 718后，神经元中PKCδ、P55G等的磷酸化水平降低，加入L365 260后， PKCα、PKGβ、OGFR、EGFR等的磷酸化水平呈现不同程度的降低，表明皮质神经元中CCK_B受体介导的信号转导更复杂。结论:CCK_A型、GGK_B型受体均可介导CCK₈在神经元的信号转导，但CCK_B型受体可能发挥了更重要的作用，其介导的信号途径可能包括：肌醇磷脂信使系统、cAMP-PKA途径、MAPK途径、JNK途径、PI3K-PKB途径和cGMP-PKG途径。     

浅析万全望小儿头面

万全望小儿头面,包括望整体头面五色形态和局部头面形色神态;其中局部望诊分为望额、眉、目、耳、鼻、口唇、舌、牙、特殊穴位。现笔者基于万全儿科专著,总结整理万全望诊小儿头面的特点和意义,可知万全望小儿头面可助诊疗、断吉凶,知寿夭。此文从望头面和其望诊在临床的应用两方面对万全望小儿头面进行探讨,再结合现代学者对望诊的发展,以期为现代临床诊疗提供思路。     

妊娠期糖尿病并发高脂血症1例

患者 ,2 8岁 ,孕2 产1,停经 3 2周 ,妊高征、胎盘早剥行剖宫产术后 5ｈ伴心慌、胸闷、呼吸急促于 2 0 0 0年 7月 1日上午 1时入院。既往体健 ,无肝肾病史 ,无高血压、糖尿病史。患者因停经 3 2周 ,食欲不振、胸闷 ,进食后呕吐粉红色及暗绿色粘液样物 ,在当地医院给予输液治疗。于 2 0 0 0年 6月 6日下午 5时自感下腹疼痛及少量阴道流血 ,Ｂ超示胎盘早剥行剖宫产术结束分娩。术中示血液呈脂质样 ,量多 ,手术顺利 ,因见血液异常 ,给予腹腔引流。患者术中术后心慌、胸闷、呼吸急促渐加重 ,给予静推西地兰 (具体用量不详 ) 3次 ,无明显改善 ,急…     

异丙酚麻醉下行钳刮术82例临床观察

目的 :探讨异丙酚麻醉下行孕 10～ 13周钳刮术镇痛效果及安全性。方法 :应用异丙酚静脉给药麻醉后钳刮 (观察组 )。与无任何镇痛方法钳刮 (对照组 )。结果 :观察组与对照组在宫口松驰度 ,手术时间 ,出血量方面相比无明显差异 (P >0 .0 5 ) ,人工流产综合征发生率观察组 0 ,对照组 5 9%。结论 :异丙酚麻醉下行钳刮术能安全镇痛 ,避免人流综合征的发生     

脑外伤术后脑梗死8例报告

脑外伤术后脑梗死是颅脑手术后比较严重的并发症 ,是导致病人致残及降低生存质量的一个重要因素。本文作者收治 8例 ,对照其病因分析如下。1　临床资料1 1　一般资料本组病例中男 6例 ,女 2例。年龄 2 8～ 5 4岁 ,平均 4 3岁。车祸伤 4例 ,跌伤 2例 ,重物击伤 2例。致伤后就诊时间 2～14ｈ ,平均 5ｈ ,入院后手术时间 3 5～ 4 5ｍｉｎ ,平均 5ｈ ,术后发现脑梗死时间为 8～ 2 0ｈ ,平均 12ｈ。1 2　治疗及结果以上病例均在 3 5～ 5 5ｍｉｎ内急诊行开颅手术 ,消除血肿压迫 ,去骨瓣减压 ,术后给予抗生素 ,脱水药物 (甘露醇 12 5～2 5 0ｍｌ,1…