新生大鼠缺氧缺血性脑损伤对脾bcl-2/bax/fas/fasL mRNA的影响

目的 通过检测脾淋巴细胞凋亡基因bcl-2/bax/fas/fasL mRNA表达水平,探讨缺氧缺血性肭损伤(hypoxicischemic brain damage,HIBD)脾细胞凋亡基因的变化与缺氧时间的关系,以此提供HIBD对于免疫功能影响的理论基础.方法 建立新生大鼠HIBD模型测定脾bcl-2/bax/fas/fasL mRNA 的相对表达量.结果 bcl-2处理组相对表达量低于对照组(P＜0.01).bax处理组相对表达量高于对照组(P＜0.01).bcl-2/bax处理组比值低于相应对照组(P＜0.05).fas处理纽相对表达量高于对照组(P＜0.01).fasL 1 h和6 h处理组相对表达量高于对照组,12 h之后则对照组远高于处理组.fas/fasL对照组较分散,除6 h组外其余组均小于1,处理组较集中,除24 h外均大于1.结论 HIBD可促进脾细胞促凋亡基因的表达,减少抑凋亡基因表达;HIBD发生6～12 h是促凋亡基因和抑凋亡基因高峰表达期;HIBD加强了fas/fasL的作用.     

家族性乳腺癌线粒体基因组控制区突变研究

目的研究家族性乳腺癌线粒体基因组控制区(D-loop区)突变的情况。方法用PCR技术,对来自21个家系的23例家族性乳腺癌患者和18名正常对照者线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)的D-loop区进行扩增并基因测序,分析突变。结果在23例乳腺癌患者mtDNA的D-loop区共发现126个突变位点,4个为新发现的突变;37个突变分别发生在所有23例患者D-loop区的突变热点D310区;在所有突变中,第310位点的T→C,311～312位点的TC插入,522～523位点的CA缺失和527位点的C→G是高发突变位点;同一家系中乳腺癌患者D310区的突变与正常对照不同。结论家族性乳腺癌患者D310区的突变可能提高了其对乳腺癌的易感性。     

热疗对人宫颈癌Hela细胞凋亡的影响

目的:观察不同加温温度对人宫颈癌Hela细胞凋亡的影响.方法:人宫颈癌Hela细胞株常规方法培养,采用水浴加热法(温度为41℃、42.5℃、43.5℃、)对细胞进行加温处理,处理后继续培养24h.用流式细胞仪检测细胞凋亡,单细胞凝胶电泳(single cell gel electrophoresis,SCGE)法检测DNA受损状态.结果:随着温度的增加细胞凋亡率增加,42.5℃、43.5℃加温1h后细胞凋亡率最高分别为30.7%和34.6,坏死细胞分别为13.2%和29.6%.单细胞凝胶电泳发现42.5℃加温1h后40.0%的细胞有DNA损伤,43.5℃加温1h后80.0%以上的细胞DNA损伤,而41℃加温处理1h后仅有20.0%细胞DNA受损.结论:单独加温处理1h可诱导细胞凋亡,并导致细胞DNA损伤.     

携TGFβ1正、反义基因载体对膀胱癌细胞体外生长的作用

目的 :探讨表达TGFβ1正、反义基因的复制缺陷型逆转录病毒载体 ,对人膀胱癌细胞生长及细胞周期调控的作用。方法 :以逆转录病毒 pRevTRE为载体 ,构建表达TGFβ1正、反义基因的复制缺陷型逆转录病毒载体 pRevTβ和 pRevTβ AS ;分别转染膀胱癌细胞株EJ ,观察不同载体对膀胱癌细胞体外增殖、克隆形成和细胞周期时相的影响。结果 :pRevTβ、pRevTβ AS载体病毒滴度分别为 0 84、0 88× 10 5CFU/ml,对EJ细胞的整合率为10 0 % ,并有效表达 ;抑制TGFβ1表达可以降低靶细胞的生长速度和克隆形成率 ,同时出现G0 /G1期细胞比例增高和S期细胞比例降低。结论 :携TGFβ1反义基因的复制缺陷型逆转录病毒载体可以下调EJ细胞内源性TGFβ1表达 ,诱导肿瘤细胞G1期阻滞 ,抑制肿瘤细胞体外生长增殖。     

CXCL8/CXCR1对结肠癌细胞增殖和表型及相关基因改变的影响

目的:探讨趋化因子/趋化因子受体(CXCL8/CXCR1)相互作用对结肠癌细胞株colo205增殖、表型及相关基因转录的影响。方法:CXCL8刺激前后,采用流式细胞术分析胞膜CXCR1表达、胞质内F-actin浓度变化,MTT法比较细胞增殖活性,Real-time PCR比较CXCR1、E-cadherin、Ki-67及-βcatenin转录水平变化,蛋白质印迹法比较-βcatenin在胞质与胞核内分布变化。结果:CXCL8刺激后,CXCR1转录、表达和细胞增殖呈波动性变化。刺激6~48 h,E-cadherin、Ki-67转录下降。刺激24~48 h,细胞内F-actin荧光强度逐渐减弱,48~72 h又逐渐升高;0~72 h,细胞表型呈上皮-间叶可逆性转化特征。0~72 h,-βcatenin胞质积累逐渐增加、入核减少。Ly294002阻断CX-CR1抑制-βcatenin的入核效应,但未改变-βcatenin胞质积累效应。结论:CXCL8/CXCR1促进-βcatenin胞质积累、抑制其入核,协调细胞增殖、可逆的上皮-间叶转化(EMT)过程及相关基因转录变化。     

激光散射浊度法测定人血清中a1AGP在癌症诊断中的应用

本文通过激光散射浊度法及火箭电泳法对健康人及癌症患者血清中ａ１一酸性糖蛋白（简称ａＡＧＰ）的分析表明，这两种方法均能准确地定量分析ａ１ＡＧＰ的含量，而激光散射浊度法又有其独特的优点，其分析结果显示：未经治疗的胃、贲门、食管及肺癌患者血清中ａＡＧＰ含量明显高于正常人，其阳性率分别为１００％（１５／１５），９０％（１９／２１），７４％（２０／２７）和８４％（２７／３２），当各种癌症病人经放化疗化后，其     

乳腺癌线粒体DNA拷贝数改变的研究及意义

目的:用实时定量PCR对乳腺癌组织线粒体DNA的拷贝数进行检测,探讨线粒体DNA拷贝数改变与乳腺癌的关系。方法:对30例乳腺癌患者组织及其相应外周全血、30例健康献血员外周全血标本的线粒体DNAD-loop区克隆并制备标准品;用实时定量PCR检测标本线粒体DNA的拷贝数。结果:乳腺癌组织线粒体DNA的拷贝数平均值为7.75×1013copy/μgDNA,高于其相应外周血的平均值3.22×1011copy/μgDNA(P<0.05)和对照的平均值6.55×1010copy/μgDNA(P<0.05)。结论:线粒体DNA拷贝数改变与乳腺癌发生有关。     

高颈段椎管内肿瘤的手术治疗

目的:探讨对8例高颈段脊髓肿瘤手术入路和方法,提高手术治疗效果。方法:显微手术切除8例,根据磁共振成像扫描,采取不同入路和手术方法。结果:髓外肿瘤全切,术后脊髓功能改善或保持稳定。结论:对高颈段髓肿瘤应该采用显微外科手术积极治疗,根据肿瘤位置,大小选择手术入路有利于全切肿瘤。     

人乳腺癌细胞cDNA文库的构建及鉴定

目的 :应用前期制备的一株乳腺癌单克隆抗体 (M4G3) ,筛选出高表达其相关抗原的乳腺癌细胞系T47D ,并利用此细胞系构建了以λgt11为载体的cDNA文库 ,为完成此乳腺癌特异抗原基因的克隆与表达奠定基础。方法 :在4株乳腺癌细胞中应用M4G3单抗进行免疫组化和WesternBlot检测 ,以其中一株T47D细胞为材料构建以λgt11为载体的cDNA文库 ,并进行文库质量鉴定。结果 :文库含有9 97×105个重组子 ,重组效率达到96 7 % ,插入的cDNA片段平均长度为1 0kb。结论 :与M4G3单抗结合的乳腺癌抗原分子量约为48000dalton。构建的T47D细胞cDNA文库完整 ,具有较好的质量 ,为进一步筛选奠定了基础。