MMP-9基因多态性与老年动脉僵硬度的相关性研究

目的探讨老年动脉僵硬度与基质金属蛋白酶-9(MMP-9)基因多态性的相关性。方法对437例老年人(年龄60～95岁)进行一般情况、实验室指标及臂-踝脉搏波传导速度(ba-PWV)的检测,并综合baPWV值及年龄-ba-PWV曲线,分为低baPWV组和高baPWV组。应用PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)法确定基因型,分析比较两组MMP-9三种基因型的分布。结果高baPWV组TT基因型频率(16.4%)明显高于低baPWV组(8.8%),两组差异有显著统计学意义(χ2=6.470,P=0.008)。两组T等位基因分布有显著统计学意义(χ2=7.929,P=0.003)。MMP-9三种基因型中以C/C型作为比较基线,C/T型和T/T型的OR分别为1.227(95%CI:0.793～1.899)和2.170(95%CI:1.184～3.976)。以C等位基因作为比较基线,T等位基因的OR为1.550(95%CI:1.141～2.105)。经单因素非条件Logistic回归分析后进行多因素非条件Logistic回归分析,结果显示年龄、体重指数、收缩压、脉压、平均动脉压、吸烟、高密度脂蛋白(HDL)及MMP-9TT基因型为动脉僵硬度增加的危险因素。结论老年动脉僵硬度与MMP-9基因多态性密切相关,MMP-9基因1562T等位基因可能是老年动脉僵硬增高的遗传基因标记之一。     

免疫金电转移印斑技术检测华支睾吸虫病人血清抗体

我们应用电转移印斑结合免疫金技术,进行了华支睾吸虫病人血清中抗体的研究,以寻找一个敏感、特异的华支睾吸虫病免疫诊断方法。一、材料和方法 (一)抗原的制备自人工感染华支睾吸虫囊蚴的猫肝中取华支睾吸虫成虫100条,以生理盐水洗涤数次.超声粉碎100w,10min,4℃冰箱冷浸72h,5000r/min离心15min,取上清液。 (二)实验血清1.华支睾吸虫病人血清:采自山东金乡县及宁阳县,经粪便检查,华支睾吸虫虫卵阳性     

桑银降糖胶囊在体外对猪胰岛细胞增殖及分泌功能的影响

目的观察桑银降糖胶囊对体外培养猪胰岛细胞分泌功能的影响。方法体外分离纯化猪胰岛细胞进行单层细胞培养,链脲霉素（STZ）处理后分别与桑银降糖胶囊及其组分桑叶多糖、牛磺酸、银杏黄酮等共同孵育24、48 h,用放射免疫法检测培养液中胰岛素、C肽水平;光镜下观察细胞形态变化;MTT法检测胰岛细胞增殖情况。结果与其他组分比较,桑银降糖胶囊可明显提高培养液中胰岛素、C肽水平,胰岛β细胞数目明显增多。结论桑银降糖胶囊可减轻STZ对胰岛β细胞的损伤,促进胰岛细胞增殖,并使损伤的胰腺恢复正常功能,增强胰岛素的分泌功能。     

山东临沂地区华支睾吸虫病防治试点研究

山东临沂地区华支睾吸虫病防治试点研究山东省寄生虫病防治研究所（济宁２７２１３３）李登俊，朱育光，杨国华，缪峰，寇景轩，赵中平，温培娥通过多年防治，我省华支睾吸虫感染率已有大幅度下降，流行呈明显下降趋势，但各地仍然存在一些感染较重的区域，本试点研究目的...     

HL-60细胞淫羊藿甙诱导后信号传导因子表达变化与意义

目的检测急性早幼粒白血病细胞HL-60经过淫羊藿甙（ICA）诱导后信号传导与转录激活因子（STAT1、STAT3）和有丝分裂原激活蛋白激酶（p38MAPK、p42MAPK）表达变化在分化中的作用。方法建立ICA诱导分化模型，用瑞氏染色观察细胞形态，MTF实验测定细胞增殖的变化，NBT还原实验测定细胞分化状态，RT-PCR方法检测STATI、STAT3、p38MAPK、p42MAPK的mRNA的表达。结果HL-60细胞经ICA作用24h后，随着细胞增殖降低和分化的发生，p42MAPK的mRNA表达增加，STAT3的mRNA表达降低，STAT1和p38MAPK的mRNA未见明显的表达。结论p42MAPK和STAT3与ICA诱导HL-60细胞分化有关，而p38MAPK和STAT1则与ICA诱导HL-60细胞分化无关。     

小剂量As2O3体外诱导HL-60细胞发生非终末分化分子机制的研究

目的探讨增强子结合蛋白C／EBPs在小剂量三氧化二砷（As2O3）诱导HL-60细胞发生非终末分化中的作用。方法采用瑞式染色观察细胞形态，WSTl实验测定细胞增殖变化，测定和分析细胞周期，NBT还原实验测定细胞分化状态，RT-PCR方法检测C／EBPct和C／EBPε的mRNA表达。结果HL-60细胞经全反式维甲酸（ATRA）作用24h后，随着细胞分化的发生，C／EBPε mRNA的表达明显增加，C／EBPα mRNA的表达降低。HL-60细胞经As2O3作用24h后，C／EBPα mRNA的表达降低，C／EBPε mRNA的表达轻微增加。结论经As2O3和ATRA诱导后不同分化状态HL-60细胞，C／EBPα mRNA的表达降低，二者差异无显著意义；C／EBPε的表达差异较大（P〈0．05），二者差异有显著意义。小剂量As2O3诱导HL-60细胞发生非终末分化可能是由于C／EBPε不能持续表达升高引起的。     

HL-60细胞淫羊藿甙诱导后信号传导因子表达变化与意义

目的检测急性早幼粒白血病细胞HL-60经过淫羊藿甙(ICA)诱导后信号传导与转录激活因子(STAT1、STAT3)和有丝分裂原激活蛋白激酶(p38MAPK、p42MAPK)表达变化在分化中的作用。方法建立ICA诱导分化模型,用瑞氏染色观察细胞形态,MTT实验测定细胞增殖的变化,NBT还原实验测定细胞分化状态,RT-PCR方法检测STAT1、STAT3、p38MAPK、p42MAPK 的mRNA的表达。结果 HL-60细胞经ICA作用24 h后,随着细胞增殖降低和分化的发生, p42MAPK的mRNA表达增加,STAT3的mRNA表达降低,STAT1和p38MAPK的mRNA未见明显的表达。结论 p42MAPK和STAT3与ICA诱导HL-60细胞分化有关,而p38MAPK和STAT1则与ICA诱导HL-60细胞分化无关。     

三氧化二砷与HMBA对白血病K562细胞增殖抑制作用及其分子机制的研究

目的:探讨诱导分化荆对K562细胞增殖抑制的作用与分子机制.方法:通过MTT试验和细胞形态学观察K562细胞增殖的改变和分化情况.通过流式细胞仪实验检测细胞周期改变,RT-PCR检测EⅥ1、TGF-β1和WT1基因表达的变化.结果:K562细胞经六亚甲基二乙酰胺(HMBA)和(或)三氧化二砷(As2O3)作用后增殖明显受到抑制,并向不同方向分化,细胞被阻滞在G1期.K562细胞的增殖抑制作用与EVI1和WT1基因表达下调,TGF-β1基因表达上调一致.EⅥ1/β-aetin从0.925 3渐降至0.137 9,WT1/β-actin从0.995 3降至0.197 8.TGF-β1/β-actin从0.331 5增至1.245 2.结论:HMBA、As2O3及其联合抑制K562细胞增殖作用与EⅥ1和WT1基因表达下调,TGF-β1基因表达上调有关.     

膀胱癌组织端粒酶活性定量分析及临床应用的研究

目的：组装简便实用的端粒酶活性相对定量检测试剂盒,建立了膀胱肿瘤端粒酶活性非同位素相对定量检测技术。方法：用银染－TRAP略行改良,对54例膀胱癌组织、癌旁组织、12例正常膀胱黏膜,其中46例膀胱癌患者同时收集了尿液及膀胱冲洗液的脱落细胞进行端粒酶活性相对定量值分析。结果：54例膀胱癌组织中端粒酶活性相对定量值阳性率与正常膀胱黏膜和癌旁组织端粒酶活性相对定量值相比,差异有显著性（P＜0．001,P＜0．001）;癌旁组织略高于正常膀胱黏膜,但差异无显著性（P＞0．05）,46例膀胱癌膀胱冲洗液与尿液相比差异有显著性（P＜0．01）;54例膀胱癌与癌旁组织中端粒酶活性相对定量均值及标准差相比,差异有显著性（P＜0．001）;46例膀胱癌冲洗液与尿液端粒酶活性相对定量均值及标准差相比差异有显著性（P＜0．05）。结论：建立了膀胱肿瘤端粒酶活性的非同位素相对定量分析方法,具有特异性强、灵敏性高的特点,该方法可作为恶性肿瘤诊断和预后的指标之一。     

修饰的肿瘤抗原肽CEA_（610D）疫苗的体外抗肿瘤作用

目的:评价修饰的CEA610D抗原肽疫苗体外抗肿瘤免疫的有效性,为其临床应用提供依据.方法:多肽固相合成法合成HLA-A2 CEA修饰肽(CEA610D)、HLA-A2天然肽CEA605-613(天然肽)和HLA-A2无关肽MAGE-3(无关肽),采用同种异体混合淋巴细胞与肽共孵育的方法,诱导肽特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL),利用MTT法检测CTL的增殖和杀伤活性;流式细胞术观察细胞表型;RT-PCR检测细胞穿孔素的表达;ELISA法检测CTL上清中IFN-γ的水平.结果:CEA610D疫苗产生肽特异性CTL的能力最强(P<0.05),其CD8+T细胞数也高于天然肽组和无关肽组;在效靶比为40∶1时,CEA610D和天然肽所诱导的CTL对CEA+HLA-A2限制性人结肠癌细胞T84的杀伤活性可达(56.7±3.73)%和(51.2±1.86)%,而3种肽特异性CTL细胞对CEA+HLA-A2人结肠癌lovo细胞杀伤活性维持在本底水平;CEA610D组的CTL所释放的杀伤相关介质穿孔素和上清中IFN-γ的水平也显著高于其余两组(P<0.01).结论:与天然肽相比,CEA610D疫苗可打破自身表位的免疫耐受,在体外抗肿瘤免疫中更具优势.