siRNA沉默p28GANK对结肠癌细胞增殖的影响

背景：研究发现p28GANK表达与结肠癌恶性程度相关,其高表达提示预后不良。然而,p28GANK在结肠癌中的作用尚未完全明确。目的：探讨沉默p28GANK对结肠癌细胞增殖能力的影响。方法：以针对p28GANK基因的慢病毒携带siRNA转染人结肠癌HT29细胞,以蛋白质印迹法检测干扰效果,以MTr法检测细胞增殖,以平板克隆实验检测细胞克隆能力,以流式细胞术检测细胞周期变化。结果：与HT29、Con—HT29细胞相比,Si—HT29细胞中p28GANK蛋白表达水平显著降低;细胞增殖速度显著减缓;细胞克隆数量显著减少;G0／G1期细胞比例显著增多,S期细胞比例显著减少,PI值显著降低（P〈0．05）。结论：沉默p28GANK在结肠癌细胞中的表达可抑制细胞增殖能力,使细胞周期阻滞。p28GANK可作为治疗结肠癌的新靶点。     

左旋精氨酸对气道上皮细胞白细胞介素6和8的调节作用

目的研究左旋精氨酸对NCI-H292细胞中白细胞介素6(IL-6)和IL-8的影响。方法细胞共分为5组:最低需要培养基(MEM)组、MEM+A组(MEM+左旋精氨酸)、RPMI组(RPMI1640培养基,含1 mmol.L-1精氨酸)、常规培养基组(精氨酸含量>1 mmol.L-1)、地塞米松组(MEM+10μg.L-1地塞米松)。通过TNF-α和脂多糖刺激NCI-H292细胞建立哮喘气道炎症微环境,观察不同浓度TNF-α和脂多糖对IL-6和IL-8释放的影响,并比较各组间IL-6和IL-8水平。采用ELISA法测定细胞IL-6和IL-8释放水平,斑点印迹法测定其mRNA水平。结果 IL-6和IL-8水平与TNF-α的浓度正相关(r=0.644、0.715,均P<0.01)。不论有无脂多糖或TNF-α的刺激,MEM组IL-6和IL-8水平高于MEM+A组、RPMI组和地塞米松组(P<0.01)。MEM组IL-6水平高于常规培养基组(P<0.01),TNF-α刺激下IL-8水平高于常规培养基组(P<0.01),脂多糖刺激下2组IL-8水平相当(P>0.05)。地塞米松组IL-6和IL-8水平与MEM+A组相当(P>0.05)。细胞培养4、8、24 h,MEM+A组IL-6 mRNA和IL-8 mRNA表达显著低于MEM组(P<0.05)。结论一定浓度左旋精氨酸可抑制NCI-H292细胞IL-6和IL-8的释放,可能通过降低IL-6和IL-8转录活性引起,在哮喘治疗中具有潜在的应用价值。     

中药莪术油对小鼠Lewis肺癌抑制作用的实验研究

目的：探讨中药莪术油对肺癌的抑瘤作用及机理。方法：采用Lewis肺癌瘤小鼠腹水于小鼠右腋皮下接种造模，以5—Fu做阳性对照，观察小鼠瘤重，并用免疫组化法检测细胞增殖核抗原(PCNA)视网膜母细胞瘤蛋白(RB)的表达。结果：莪术油组小鼠瘤重明显较模型组轻，与5—Fu组无明显差异，PCNA指数明显降低，RB蛋白标记指数显著升高，与5—Fu组接近。结论：莪术油能有效抑制Lewis肺癌细胞，抑制细胞增殖，上调RB蛋白表达是其可能的作用机理之一。     

注射用母牛分枝杆菌对支气管哮喘病人的辅助治疗作用

目的:探讨注射用母牛分枝杆菌对支气管哮喘病人的辅助治疗作用。方法:初次诊断的轻度持续或中度持续支气管哮喘病人34例,随机分为2组。观察组19例,予沙美特罗替卡松(50／250μg,吸入,bid)联合母牛分枝杆菌22．5μg,im,q 10 d。对照组15例,除不用母牛分枝杆菌外,余同观察组。疗程均为3 mo,治疗前后观察血清细胞因子和肺功能水平。结果:2组治疗后白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素5(IL-5)、免疫球蛋白E(IgE)下降,干扰素γ(IFN-γ)上升,但仅观察组中IL-5[下降(46±s 13)ng·L~(-1)]和IgE[下降(86±43)IU·L~(-1)]变化有非常显著意义(P＜0．01)。2组用力肺活量和第1秒用力呼气量变化无显著差异(P＞0．05)。观察组治疗后每日最大呼气流量有所上升,治疗mo 2、3与对照组比较,差异非常显著(P＜0．01)。结论:注射用母牛分枝杆菌可促进Th 1型细胞因子分泌,抑制Th 2型细胞因子分泌,调节Th 1／Th 2平衡;并可能在一定程度上减轻气道阻力,对支气管哮喘病人具有明显辅助治疗作用。     

基于MDT的TPS教学法在胃肠外科住院医师规范化培训中的应用研究

目的 探讨基于多学科协作诊疗（MDT）模式下TPS教学法在胃肠外科住院医师规范化培训中的应用效果及价值。方法 选取在湖州市中心医院胃肠外科轮转的住培医师共40名,随机分为观察组和对照组,每组20名。观察组采用MDT模式下的TPS教学法,对照组采用传统教学法,以消化道恶性肿瘤为教学内容,观察两组住培医师的学习成效,通过考核成绩和教学满意度调查问卷进行教学效果的分析比较。结果 观察组住培医师的单选题成绩、病例分析题成绩和总成绩均高于对照组,差异均有统计学意义（t分别=2.07、5.64、6.47,P均<0.05）。观察组住培医师在学习兴趣、自学能力、合作能力、归纳和表达能力、临床诊疗信心、临床思维能力、综合能力和总体满意度方面的自我评价均高于对照组,差异均有统计学意义（t分别=3.19、4.18、5.16、4.49、2.44、8.10、8.49、3.01,P均<0.05）。带教医生对观察组住培医师的分析辅助检查结果意义、制定综合治疗方案、前沿知识、主动性及合作性等方面的满意程度明显高于对照组,差异有统计学意义（t分别=3.89、1.99、2.96、2.12、3.19,P均<...     

老年慢性支气管炎ET-1 TXB_2和6-k-PGF_(1a)的临床意义

为探讨血浆内皮-1(ET-1),血栓素B_2(TXB_2)和6-酮-前列腺素F_(la)(6-k-PGF_(la))与慢性支气管炎(慢支)的关系而测定了21例老年慢支急性期和缓解期血浆ET-1(放射免疫均相竞争法)、TXB_2和6-k-PGF_(la)(酶联免疫吸附法)水平。结果显示慢支急性期血浆ET-1,TXB_2显著高于其缓解期,缓解期又高于健康人。提示老年慢支患者血浆ET-1、TXB_2水平升高与呼吸道感染有关,且在急性感染控制后仍高于正常。     

siRNA沉默表达对胆囊癌细胞NOZ和GBC-SD增殖和转移的影响

目的探讨NUMB对胆囊癌细胞NOZ和GBC-SD的增殖和迁移的作用。方法应用RNA干扰技术敲低人胆囊癌细胞NOZ和GBC-SD中NUMB的表达,将人胆囊癌细胞NOZ和GBC-SD分别分为实验组（si-NUMB组）和对照组（CTRL组）,其中si-NUMB组转染si-NUMB,CTRL组转染阴性对照剂si-NC。采用CCK-8法检测两组细胞的增殖能力[吸光度（OD）值来表示];采用Transwell小室实验检测两组细胞的迁移能力;采用Westernblot法检测NUMB及上皮间质转化关键蛋白的表达水平。结果NOZ细胞中,与CTRL组相比,si-NUMB组中的OD值在第2、3、4、5天时均明显为高（均P＜0.05）;GBC-SD细胞中,与CTRL组相比,si-NUMB组中的OD值在第3、4、5天时均明显为高（均P＜0.05）。与CTRL组比较,si-NUMB组中人胆囊癌NOZ和GBC-SD细胞的迁移细胞的数量均明显升高（均P＜0.05）。与CTRL组相比,NOZ和GBC-SD细胞在si-NUMB组中NUMB、E-cadherin蛋白表达水平均明显为低而Snail-1、N-cadherin蛋白表达水平均明显为高（均P＜0.01）。结论NUMB能够抑制胆囊癌细胞的增殖和迁移能力,可能作为胆囊癌治疗的靶标。     

miR-3662在胆囊癌组织中的表达及对胆囊癌细胞增殖的影响

目的探讨miR-3662在胆囊癌组织中的表达及对胆囊癌细胞增殖的影响。方法选取30对人胆囊癌组织及其癌旁组织标本;将GBC-SD和SGC-996细胞分为miR-3662组和miR-NC组,其中miR-3662组细胞转染miR-3662,miR-NC细胞转染miR-NC;将8只裸鼠随机分为实验组和阴性对照组,每组4只,其中实验组裸鼠接种miR-3662组细胞,阴性对照组裸鼠接种miR-NC组细胞。采用qRT-PCR法检测miR-3662在30对人胆囊癌组织及癌旁组织中的相对表达量;采用CCK-8法检测转染细胞的吸光度（A）值、平板克隆形成实验观察细胞集落形成数、制取裸鼠皮下移植瘤检测瘤体质量。结果miR-3662在人胆囊癌组织中的相对表达量明显低于癌旁组织（P＜0.05）;miR-3662组GBC-SD和SGC-996的miR-3662的相对表达量较miR-NC组均明显上调（均P＜0.05）;加入CCK-8后第5天时,与miR-NC组相比,miR-3662组细胞A450值明显为小（P＜0.05）;miR-3662组GBC-SD和SGC-996的集落形成数较miR-NC组均明显减少（均P＜0.05）;实验组的裸鼠皮下移植瘤体质量较阴性对照组明显减少（P＜0.05）。结论miR-3662在人胆囊癌组织中低表达,能够抑制人胆囊癌细胞的增殖能力,可能作为胆囊癌治疗的新靶点。     

C-反应蛋白水平测定在老年呼吸系统感染中的意义

目的 为了解血清CRP在老年呼吸系统感染中的意义。方法 采用免疫比浊法测定老年呼吸系统感染患者治疗前后的血清CRP水平。结果 治疗前CRP水平(45.22±30.05mg/L)明显高于治疗后(7.65±3.24mg/LP<0.01),且其阳性率(87.5％)远大于常规指标。结论 血清CRP水平是一种反应老年呼吸系统感染的敏感而可靠的指标。