心脏手术中小剂量抑肽酶对中性粒细胞CD_(11b)/CD_(18)表达的影响

目的 探讨体外循环术（ＣＰＢ）中小剂量抑肽酶对全身炎性反应的抑制作用。方法２８例首次行心脏瓣膜置换术患者随机分为对照组和抑肽酶组,各１４例,于麻醉诱导前、ＣＰＢ前、ＣＰＢ结束后１ｈ及２４ｈ用免疫流式细胞仪分别测定中性粒细胞表面粘附分子ＣＤ１１ｂ和ＣＤ１８的表达。结果ＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８的表达与ＣＰＢ时间呈正相关（相关系数γ分别为０．６４４、０．５３８,Ｐ＜０．０５）,ＣＰＢ结束后１ｈ及２４ｈ对照组ＣＤ１１ｂ的表达较麻醉诱导前及同时点的抑肽酶组明显上调（Ｐ＜０．０５）;ＣＤ１８的表达仅在ＣＰＢ结束后１ｈ明显上调并高于抑肽酶组（Ｐ＜０．０５）,ＣＰＢ结束后２４ｈ表达下凋有所缓解,但仍高于麻醉前基础值（Ｐ＜０．０５）。结论 ＣＰＢ所致的炎性反应可能与转机时间有关,小剂量抑肽酶对ＣＰＢ术后ＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８表达增加具有抑制作用。     

过氧化氢对内皮细胞表面粘附分子表达的影响

目的　研究 H2 O2 影响内皮细胞与中性粒细胞的粘附机理。方法　采用流式细胞仪检测了 H2 O2(2 5 0 μmol/L)对培养的人脐静脉内皮细胞 (HU VECs)表面粘附分子 ICAM- 1、VCAM- 1、E- selectin表达影响的时程变化 ,和不同浓度 H2 O2 (5 0、15 0、2 5 0、35 0、45 0 μmol/L )作用下内皮细胞粘附分子 ICAM- 1、VCAM- 1、E- selectin表达的变化。结果　 1用浓度为 2 5 0 μmol/L 的 H2 O2 处理内皮细胞 ,三种粘附分子表达的时间过程不完全相同 ,I-CAM- 1表达持续上调 ,VCAM- 1表达在 3小时达到峰值 ,而后随着时间的延长逐渐下降 ;E- selectin表达在 3小时才开始显著上调 ,5小时达到峰值 ,然后随着时间的延长逐渐下降 ;2用不同浓度的 H2 O2 处理内皮细胞 3小时后 ,介导三种粘附分子表达达到峰值的浓度不完全相同。ICAM- 1和 VCAM- 1表达在浓度为 2 5 0 μmol/L 时达到峰值 ,而 E- selectin表达的峰值在浓度为 35 0 μmol/L 时 ,当浓度继续增高时 ,其表达明显下调。结论　 H2 O2 能引起内皮细胞表面粘附分子表达上调 ,在中性粒细胞对内皮细胞的粘附过程中起着重要作用 ,H2 O2 可能通过激活粘附分子的表达而加重炎症过程。     

膀胱癌患者细胞粘附分子水平的变化及其意义

目的：探讨膀胱癌患者外周血白细胞粘附分子β2（整合素（β2－integrin,CD18)和血清可溶性细胞间粘附分子－1（soluble intercellular adhesion molecule-1 sICAM-1,CD54),血管细胞粘附分子（soluble vascular cell adhesion molecule-1,sVCAM-1 CD106)变化及其意义。方法：采用流式细胞技术检测30例膀胱癌患者外周血白细胞CD18以及血清sICAM-1和sVCAM-1的表达，结果：膀胱癌患者外周血白细胞CD18以及血清sICAM-1和sVCAM-1表达显著增加。结论：膀胱癌患者外周血白细胞CD18和血清sICAM-1和sVCAM-1的水平对膀胱癌的早期诊断病理分级、临床分期具有明确的预示作用。     

流体切应力对内皮细胞粘附分子表达的影响

在动脉粥样硬化(Atherosclerosis,As)的发生发展中各种白细胞,包括单核细胞对内皮细胞的粘附可能起着较为重要的作用。在体内,血流切应力对内皮细胞的形态和功能有重要影响。为了阐明流体切应力对内皮细胞表面粘附分子表达的影响,本文研究了流体切应力(2.23～6.08dyne/cm     

蓝光对人视网膜色素上皮细胞线粒体膜电位及细胞色素C的影响

目的　探讨蓝光导致人视网膜色素上皮 (retinal pigm ent epithelium,RPE)细胞损伤的分子机制 ,明确在此过程中线粒体膜电位及细胞色素 C(cytochrom e C,Cyt C)是否发生变化。方法　用蓝光照射体外培养的人 RPE细胞 ,罗丹明 12 3荧光染料孵育人 RPE细胞 ,流式细胞仪检测线粒体膜电位 (ΔΨm)。分为 3组 ,A组 :不同光照强度 ;B组 :同一光照强度 ,不同光照时间 ;C组 :同一光照强度和光照时间 ,不同细胞培养终止时间。用酶联免疫法测定Cyt C的活性 ;比色测定 Caspase- 3的活性。分为两组 :(2 0 0 0± 5 0 0 ) lx,光照 6 h为 组 ,光照 12 h为 组。结果　A组线粒体膜电位随着光照强度增加 ,呈逐渐下降趋势 ;B组在光照 3h,RPE细胞荧光强度无明显变化 ,当光照 6 h,荧光强度明显下降 ;C组光照后 6 h,荧光强度开始明显下降 ,一直持续到光照后 4 8h。 组和 组光照后 2 4及 36 h,Cyt C的浓度明显升高 ,光照后 2 4 h,后者 Cyt C浓度的升高值明显高于前者。未检测到 Caspase- 3活性变化。结论　蓝光照射导致培养的人 RPE细胞损伤过程与线粒体膜电位降低、细胞色素 C释放有关     

Pristane诱导BALB/c狼疮鼠模型的实验研究

目的建立系统性红斑狼疮小鼠模型,探讨环境因素在发病机制中的地位。方法雌性BALB／c小鼠30只,分为两组,造模组一次性腹腔注射Pristane 0．5mL,对照组一次性腹腔注射0．5mL生理盐水,注射前及注射后每月定期检测抗核抗体（ANA）、抗双链DNA（dsDNA）抗体,及随机尿蛋白定量,8个月时处死动物,观察肾脏HE染色及直接免疫荧光染色后镜下变化。结果造模组ANA和抗dsDNA抗体分别于造模3个月和4个月时开始出现18个月时,阳性率分别为87．5％和47．8％;62．5％的小鼠出现≥＋（300mg／L）蛋白尿;肾脏组织HE染色及直接免疫荧光染色见肾小球肾炎表现。对照组中各有1只小鼠分别为ANA、抗dsDNA抗体低滴度阳性;随机尿蛋白定量均≤＋;肾脏组织未见病理改变。抗dsDNA抗体与蛋白尿之间存在一定相关性（r=0．538,P=0．003）。结论Pristane成功诱导系统性红斑狼疮动物模型。     

丙戊酸诱导耐药白血病细胞凋亡及其机理的研究

目的 观察丙戊酸(VPA)对白血病细胞尤其是耐药白血病细胞的体外抗肿瘤作用,探讨细胞内谷胱甘肽(GSH)水平及抗氧化酶系活性与VPA诱导细胞凋亡之间的关系.方法 采用体外细胞培养,通过MTT细胞活力测定,Caspase-3,8,9活性检测、细胞形态学观察、细胞周期分析及Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡,观察VPA对白血病细胞的抗肿瘤作用;通过检测VPA作用前后细胞内总谷胱甘肽(tGSH)与GSH水平、谷胱甘肽还原酶(GSH-Rd)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性改变,以及GSH合成酶抑制剂丁胱亚磺酰亚胺(BSO)、GSH 前体N-乙酰-半胱氨酸(NAC)和过氧化氢酶(CAT)对VPA诱导凋亡的影响,分析谷胱甘肽-氧化还原(GSH-redox)系统在VPA诱导细胞凋亡中的作用.结果 VPA对所有受试细胞株均有增殖抑制作用,其IC50接近VPA抗癫痫有效血药浓度.VPA作用后细胞内Caspase-3,8,9活性增强,细胞出现凋亡形态学改变.VPA可使阿霉素耐药株K562/AO2及糖皮质激素(Gc)耐药株Jurkat细胞周期阻滞于Go/G1期,在VPA作用下,Jurkat和K562/AO2细胞内tGSH和GSH均降低,以GSH降低为主,GSH-Rd和GSH-Px的活性亦显著降低.NAC和CAT减弱VPA诱导的凋亡,而BSO增强VPA诱导的凋亡.结论 VPA抑制耐药白血病细胞增殖、诱导细胞周期阻滞与凋亡,这些作用与细胞内GSH-Rd、GSH-Px活性降低、GSH水平下调所导致的细胞内氧化应激反应激活有关.     

脱氧氟尿苷体内诱导食管癌细胞凋亡的初步研究

目的　探讨脱氧氟尿苷用于食管癌治疗的可行性。方法　将 60例食管癌患者分为实验组与对照组 ,手术中取食管癌组织及远癌食管组织标本 ,用核酸原位标记技术及流式细胞技术检测食管癌组织及远癌食管组织的细胞凋亡指数。结果　用核酸原位标记技术法检测实验组与对照组食管癌组织及对照组远癌食管组织的细胞凋亡指数分别为10 .0 2 3 7± 3 .40 2 4,4.64 83± 1.964 0 ,2 .60 0 0± 1.860 6;P <0 .0 5。用流式细胞技术检测食管癌组织及远癌食管组织的细胞凋亡指数分别为 16.14 0 0± 5 .0 82 8,8.8167± 3 .4899,4.62 5 0± 1.114 7;P <0 .0 5。用流式细胞技术检测实验组不同分化程度食管癌组织的细胞凋亡指数分别为 2 0 .3 1± 2 .71,9.64± 2 .3 5 ,7.0 3± 1 75 ;P <0 .0 5。结论　脱氧氟尿苷能诱导食管癌细胞凋亡 ,并可能对低分化及中分化食管癌的治疗更有效。     

力学刺激对大鼠成骨细胞Integrins α2、β1、β3表达和细胞增殖、合成功能的影响

探讨在成骨细胞中Integrins调节力学信号转导可能的分子机制和周期性双轴力学应变对成骨细胞增殖与合成功能的影响。将3月龄雌性SD大鼠颅顶骨分离的成骨细胞在含10％胎牛血清的F-12培养液中培养并接种在Flexercell type I dish中。当细胞生长至亚融合状态(Subconfluence)，给细胞施加力学刺激，频率为1Hz，力学刺激分别为400、1000、4000μ strain；作用时间分别为每天30min，2h，4h，和8h，共加载2d。以未受力学刺激的细胞为对照组，受力学刺激的细胞为实验组，并进行比较。采用流式细胞技术测定和分析Integrinsα2，β1，β3在成骨细胞膜上的表达量、细胞周期分布与细胞增殖变化；采用同位素标记方法检测成骨细胞骨钙素、Ⅰ型胶原C端前肽(PICP)和总蛋白的分泌量。结果表明：(1)在3月龄雌性SD大鼠成骨细胞膜表面有Integrins α2，β1，β3的表达，β1的表达最高。(2)周期性双轴力学应变对3月龄雌性SD大鼠成骨细胞膜表面Integrins α2，β1，β3的表达量有明显上调作用，但不同强度、不同作用时间的力学应变对成骨细胞膜表面Integrins α2，β1，β3表达量上调的作用亦不相同，而β3对力学刺激最敏感；在4000μ strain力学刺激下，成骨细胞膜表面Integrins α2，β1，β3表达量上调最为明显；(3)周期性双轴力学应变400、1000μ strain的力学刺激可提高成骨细胞的增殖与合成分泌功能；在4000μ strain力学刺激下，可明显增加成骨细胞的增殖功能但成骨细胞的合成分泌功能明显受抑制。在我们实验中，3月龄雌性SD大鼠成骨细胞对力学应变的这些反应提示：(1)Integrins α2，β1，β3表达量随着应变幅度值增大而增高。(2)Integrinsα2、β1、β3的表达量的变化与成骨细胞的增殖分化功能有密切的相关关系，在低应变幅度值，随Integrinsα2、β1、β3的上调，可增加成骨细胞的增殖与合成分泌功能；在高应变幅度值，随Integrinsα2、β1、β3的上调，可明显提高成骨细胞增殖功能，但明显抑制成骨细胞的合成功能。表明Integrinsα2、β1、β3在成骨细胞的力学信号转导和细胞增殖、功能活性方面具有重要的调节作用。