siRNA沉默人类血红素敏感基因1对膀胱癌T24细胞的影响

目的 观察人类血红素敏感基因1(HRG-1)在膀胱正常组织和膀胱肿瘤组织中的表达情况,通过siRNA干扰技术抑制HRG-1在膀胱癌T24细胞的表达水平,观察其生长增殖的变化.方法 应用免疫组化SP法检测85例膀胱肿瘤(膀胱乳头状瘤25例,低级别膀胱癌30例,高级别膀胱癌30例)和20例膀胱正常组织石蜡标本中HRG-1表达情况,并进行相关临床病理分析.设计针对HRG-1基因的siRNA,转染膀胱癌T24细胞,应用免疫印迹法和RT-PCR分析HRG-1 siRNA的表达,MTT和流式细胞术(FCM)检测其增殖凋亡的变化.结果 正常膀胱组织和膀胱癌组织中HRG-1的表达水平比较差异有统计学意义(P＜0.05);HRG-1的阳性表达与膀胱肿瘤病例分级、临床分期相关(P＜0.05);转染siRNA后,HRG-1表达水平下降,MTT和FCM检测发现,细胞增殖曲线受到抑制,HRG-1-siRNA转染组与空载体转染组及未转染组比较,细胞凋亡比例增加,差异均具有统计学意义(P＜0.01).结论 siRNA-HRG-1处理T24细胞后,细胞的增殖受到抑制,同时凋亡比例增加,提示HRG-1基因可能参与了膀胱癌的发病.     

抑癌候选基因NDRG2在膀胱肿瘤中的表达研究

目的 探讨N-myc下游调节基因(NDRG2)在膀胱正常组织和膀胱肿瘤组织中的表达情况,以及NDRG2的表达与膀胱肿瘤病理分级和临床分期的关系.方法 应用免疫组化SP法检测52例膀胱癌、10例膀胱乳头状肿瘤及10例膀胱正常组织石蜡标本中NDRG2表达情况,并进行相关临床病理分析.结果 NDRG2在正常膀胱组织阳性表达率为80.0％ (8/10),在膀胱肿瘤组织中阳性表达率为40.3％ (25/62),两者比较差异有统计学意义(x2=3.98,P＜0.05);NDRG2的阳性表达与膀胱肿瘤病理分级呈负相关(r=-0.288,P＜0.05),与C-myc表达呈负相关(r=-0.436,P＜0.01),与p53表达呈正相关(r=0.717,P＜0.01).结论 NDRG2基因在膀胱肿瘤组织中的表达水平随恶性程度的增高而降低,提示该基因可能对膀胱肿瘤病理分级和临床分期有一定的指导意义.     

前列腺癌PC-3细胞株蛙皮素受体的检测

目的:观察前列腺癌PC-3细胞株蛙皮素(Bombesin,BBS)受体蛋白和受体mRNA的表达。方法:采用免疫组织化学方法检测PC-3细胞中蛙皮素受体蛋白的表达,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)观察前列腺癌PC-3细胞株蛙皮素受体(BBS-R)mRNA的表达。结果:免疫组化方法检测PC-3细胞中有BBS-R蛋白的表达;RT-PCR产物与预期的BBS-R的cDNA分子量完全相符。结论:实验证明PC-3细胞存在有蛙皮素特异性受体,为探索蛙皮素和蛙皮素受体的拮抗剂应用于肿瘤研究以及蛙皮素作用后细胞内信息传递途径提供了基础。     

多价抗人精浆蛋白/抗CD3双特异性单链抗体的活性研究

目的探讨多价抗人精浆蛋白/抗CD3双特异性单链抗体的生物学活性.方法利用流式细胞仪和51Cr释放试验评价多价双特异性单链抗体的抗原亲和活性和体外介导杀伤靶细胞的效果.利用母性BALB/C裸鼠前列腺癌模型分析多价双特异性单链抗体在体内介导细胞毒T淋巴细胞对肿瘤细胞杀伤的能力.结果多价双特异性抗体可以特异性结合表达PSA的前列腺癌细胞和CD3阳性淋巴瘤细胞,阳性结合率分别为74%和83%.在体外,有细胞毒T淋巴细胞存在时多价抗体可引起前列腺癌细胞裂解.与对照组比较,接种前列腺癌细胞的裸鼠在注射激活的细胞毒T淋巴细胞的同时接受多价抗体治疗后,肿瘤生长明显受到抑制(P＜0.05).结论多价抗人精浆蛋白/抗CD3双特异性单链抗体具有良好的生物学活性,在体内外均可以介导细胞毒T淋巴细胞对靶细胞的杀伤.     

前列腺增生3种外科治疗方法血清IL--6和CRP的水平变化

目的 探讨前列腺增生（BPH）的3种外科治疗方法血清IL－6和CRP水平的变化。方法 对前瞻、对比的临床实验，对117例分别进行开放性手术（OP）、经尿道气化电切术（TUEVAP）和组织间激光消融（ILC）的BPH患者，用酶联免疫吸附法（ELISA）检测其手术前后血清白细胞介素－6（IL－6）和C－反应蛋白（CRP）水平。结果 3组患者血清IL－6和CRP水平术前无显著差异，但术后24h明显高于术前（P＜0．05），其中以开放手术组最高，TUEVAP组次之，ILC组最低；术后24h血清IL－6水平与手术时间，术中出血量明显相关（r=0.69,P=0.0000),术后48h血清CRP水平与手术时间相关（r=0.83,P=0.0000)。结论 3种外科治疗方法中，开放性手术对机体的创伤最为严重，急性时相反应最大，经尿道气化电切术次之，组织间激光消融则最小。手术的操作时间和术中出血量是影响机体创伤程度的主要因素。     

抗前列腺特异抗原/抗CD3双特异性单链抗体四聚体的制备

本实验旨在构建人IgG3上游铰链区/p53四价功能域融合基因和抗前列腺特异抗原/抗CD3双特异性单链抗体的基础之上[1],进一步制备该双特异性单链抗体的四聚体.     

肾上腺嗜铬细胞瘤的诊断与手术治疗

目的：提高肾上腺嗜铬细胞瘤的诊断与外科治疗水平。方法：对109例经手术治疗的肾上腺嗜铬细胞瘤患者的临床资料进行回顾性分析，其中具有典型儿茶酚胺症临床表现者104例，24h尿VMA定性检查106例，99例增高，阳性率为90．8％，B超、CT及MRI定位诊断阳性率分别为89．0％、92．7％及100％。106例经开放手术切除肿瘤，3例行后腹腔镜肿瘤切除术。结果：经病理检查证实，良性102例(93．6％)，恶性7例(6．4％)，本组无手术死亡病例。结论：肾上腺嗜铬细胞瘤主要根据临床表现、生化定性检查及影像学定位检查明确诊断。手术切除肿瘤是唯一有效的措施，术前充分准备是确保手术成功的重要因素。应用腹腔镜技术切除肾上腺肿瘤具有广阔的应用前景。     

酪氨酸激酶受体B在膀胱移行细胞癌组织中的表达

目的：用免疫组化技术探讨酪氨酸激酶受体B（tyrosine kinase B,TrkB）在膀胱移行上皮癌（transi-tional cell carcinoma of bladder,TCCB）中的表达水平和与TCCB病理分级、临床病理分期及预后的相关性。方法：选取移行细胞癌标本60例,16例正常膀胱黏膜作为对照,应用免疫组织化学（S-P法）研究TrkB的表达情况,对患者进行随访,随访6-36个月,对患者术后生存时间进行分析。结果：在所选的60例TCCB中,TrkB的阳性率高于正常对照组（P〈0.05）。在低分化及浸润性TCCB中,TrkB的表达显著高于高分化及浅表的TCCB。在复发病例中,TrkB的阳性率高于初发病例。结论：TrkB很可能是TCCB发病过程中起重要作用的分子,并有可能作为判断预后的肿瘤标志物。     

肾移植术后早期消化道出血的危险因素分析及治疗

目的 研究肾移植患者术后早期发生消化道出血的危险因素及治疗方法.方法 回顾性分析266例次肾移植术后1个月内消化道出血患者的临床资料,用单因素logistic回归分析发病的相关因素,并用多元逐步logistic回归方法分析导致肾移植术后消化道出血的高危因素.总结消化道出血的治疗方法.结果 本组术后消化道出血发生率为10.5%,多发生于肾功能延迟恢复（DGF）期间,甲泼尼松总量、肺部感染、肝素透析及直接血管穿刺是肾移植术后发生消化道出血的高危因素.出血组患者移植肾脏近期存活率显著低于未出血组患者.及时、持续的抑制胃酸分泌有利于消化道出血的治疗.结论 DGF是发生消化道出血的高危时期,导致发病的危险因素多,及时、彻底地控制出血,适当调整免疫抑制剂的用量,积极预防肺部感染,合理应用透析方法有助于患者安全.应用多元逐步logistic回归分析,有助于判断消化道出血发生风险,并进行针对性的临床干预.