单纯疱疹病毒2 gD蛋白T细胞表位区的预测及克隆

目的预测并克隆单纯疱疹病毒2 gD蛋白T细胞抗原表位集中区。方法根据相关计算机软件和互联网服务器进行表位预测;提取单纯疱疹病毒2基因组,用特异性引物扩增预测的gD蛋白T细胞抗原表位集中区基因,酶切后将目的基因插入载体pGEX-4T-1,对重组载体酶切及测序鉴定。结果预测得到了单纯疱疹病毒2gD蛋白T细胞抗原表位集中区,构建成功重组载体pGEX-gD,经测序确认序列正确。结论单纯疱疹病毒2 gD蛋白T细胞表位集中区的成功预测及克隆可为今后单纯疱疹病毒疫苗的研究打下基础。     

角蛋白K14反义寡核苷酸对角质形成细胞增殖的影响

目的：研究角蛋白K14反义寡核苷酸(ASODN)对人角质形成细胞(KC)体外增殖活性的影响。方法：利用脂质体将人工合成的正义、反义及错配K14寡核苷酸基因片段导人体外培养的角质形成细胞，应用细胞生长抑制实验、透射电镜(TEM)和流式细胞仪(FCM)检测ASODN对角质形成细胞的增生、超微结构改变和细胞增殖周期的影响。结果：脂质体介导的K14反义寡核苷酸组KC增殖活性受到明显抑制；电镜下可见KC增殖活性受到抑制的改变，角蛋白合成明显减少；流式细胞仪检测见细胞周期发生明显改变，G1期细胞百分率上升，S期细胞百分率下降。而正义寡核苷酸组、错义寡核苷酸组及空白对照组均无此改变。结论：K14反义寡核苷酸可抑制KC体外增殖活性，应用反义寡核苷酸技术封闭K14基因，有望为银屑病的基因治疗提供新的思路。     

人源性单纯疱疹病毒II型抗gD蛋白噬菌体单链抗体库的构建

目的:利用HSV-2病毒IgG、IgM抗体阳性的生殖器疱疹患者外周血淋巴细胞,构建人源单链抗体库。方法:取患者外周血淋巴细胞提取总RNA,逆转录成cDNA,以其为模板,分别扩增抗体重链及轻链可变区基因,将重链、轻链可变区基因拼接成单链抗体(scFv)基因,酶切后连接到噬菌粒载体pFAB5c中,将重组噬菌粒载体电转化大肠杆菌XL-1Blue,构建噬菌体抗体库并测定其库容量。结果:成功构建人源性单纯疱疹病毒抗gD蛋白噬菌体抗体库,库容达1.86×106。结论:利用RT-PCR和噬菌体表面展示技术成功构建了HSV-2抗gD蛋白人源性单链抗体库,为其进一步的研究打下了基础。     

重症哮喘中的自身免疫现象

支气管哮喘（简称哮喘）和自身免疫性疾病均由免疫系统失调所致。通常认为哮喘和自身免疫性疾病具有相互排斥的发病机制,但最近的研究结果显示,自身免疫现象在重症哮喘中广泛存在。哮喘患者出现自身免疫现象,预示着哮喘将发展成重症哮喘及难治性哮喘。本文对哮喘中发生自身免疫现象及其可能发生机制进行综述。     

白癜风患者外周血中IL-17和IL-23检测的临床意义

目的观察白癜风患者外周血IL-17和IL-23的变化,探讨Th17细胞在白癜风发病中的作用。方法采用酶联免疫吸附试验方法检测44例白癜风患者及40例健康对照外周血IL-17和IL-23的含量。结果白癜风患者外周血IL-17和IL-23的水平与健康对照相比均显著升高(P0.05)。白癜风患者IL-17含量与病程呈负相关(r=-0.45,P0.05),与皮损面积呈正相关(r=0.36,P0.05)。结论 Th17细胞在白癜风发病过程中可能发挥一定的作用。     

咪唑斯汀治疗寻常性银屑病临床疗效观察

目的:探讨咪唑斯汀治疗寻常性银屑病的疗效及安全性.方法:采用随机、双盲、安慰剂对照的办法,观察咪唑斯汀治疗60例寻常性银屑病患者的疗效.试验组口服咪唑斯汀10mg/d,对照组服用安慰剂,两组患者均同时给予20%尿素霜外用,每日2次.结果:连续用药4周,试验组和对照组患者的银屑病皮损面积及严重度指数(PASI)评分均有不同程度的下降,治疗前、后PASI的差值试验组为(6.22±9.66)分(P<0.01),对照组为(1.78±3.48)分(P<0.05),试验组与对照组之间的差异有统计学意义(U=249.5,P=0.003);瘙痒程度视觉模拟尺法(VAS)积分治疗组显著降低(P<0.01),对照组改善不明显,两组之间的差异有统计学意义(U=165.0,P=0.000).所有患者均未出现严重不良反应.结论:咪唑斯汀治疗寻常性银屑病在改善其病情和减轻瘙痒症状等方面具有一定的疗效,可以作为一种安全有效的辅助治疗药物.     

白癜风的药物治疗

白癜风是一种常见的后天性色素脱失性皮肤粘膜病，国内人群患病率0．1％-2％。有色人种的发病率高于白色人种，男女发病无显著差异，任何年龄皆可发生。目前病因还不完全清楚，有自身免疫学说、遗传学说、黑素细胞自毁学说以及角质形成细胞功能异常、酪氨酸与铜离子相对缺乏等多种学说。由于病因不明，目前的治疗均为对症处理，常用的方法有饮食疗法、心理治疗、局部外用药物治疗、PUVA治疗、中草药、表皮移植、窄波UVB（311nm）疗法、准分子激光疗法、自体黑素细胞移植以及伪装、脱色等。本文主要介绍药物疗法。     

儿童线状IgA大疱性皮病1例

患儿男,2岁9个月。面颊、背部、双下肢泛发红斑、水疱伴疼痛15天。皮肤科情况:双侧面颊、耳廓可见红斑、糜烂,部分结痂。双下肢遍布黄豆大水疱,疱壁紧张,疱液清亮,尼氏征(-)。皮损组织病理示表皮下水疱形成,疱内可见浆液、中性粒细胞、淋巴细胞及嗜酸性粒细胞。免疫荧光IgA(+),基底膜可见线状沉积。诊断:儿童线状IgA大疱性皮病。     

HSV-2潜伏相关转录体开发读码框2载体的构建及其在SH-SY5Y细胞中的表达

目的:构建单纯疱疹病毒2型(HSV-2)潜伏相关转录体(LAT)的开放读码框2(ORF2)基因的真核表达载体pEGFP-ORF2,并检测其在SH-SY5Y细胞中的表达。方法:采用亚克隆技术构建HSV-2 LAT ORF2与EGFP基因融合的真核细胞表达载体pEGFP-ORF2,双酶切及测序鉴定;脂质体法转染试剂将重组载体转染人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y,G418筛选20天挑取表达pEGFP-ORF2的抗性克隆扩大培养,传代。荧光显微镜直接观察重组体在细胞中的表达。结果:重组质粒pEGFP-ORF2序列和方向正确;EGFP-ORF2融合基因在SH-SY5Y细胞中获得表达。结论:成功建立稳定表达pEGFP-ORF2的SH-SY5Y细胞株,为进一步研究HSV-2 LAT ORF2基因的功能奠定了实验基础。     

308nm准分子激光联合白癜冲剂治疗面部白癜风临床观察

目的探讨308nm准分子激光联合复方中药治疗面部白癜风的疗效和安全性。方法将150例稳定期面部白癜风患者随机分为3组,每组各50例。治疗组予308nm准分子激光照射联合内服复方中药,对照1组单纯予308nm准分子激光照射;对照2组单纯内服复方中药。3组均连续治疗15周,分别于治疗第5,10和15周时评价临床疗效。结果治疗组治疗15周时的有效率为86.00%,对照1组为76.00%、对照2组为40.00%,差异有统计学意义(P=0.01);治疗组不良反应发生率为26.00,对照1组为20.00%,对照2组为19.75%,差异无统计学意义(P=0.65)。结论308nm准分子激光联合内服复方中药治疗白癜风比两者单独应用治疗白癜风的疗效好。