308nm准分子激光联合0.1%糠酸莫米松乳膏治疗面部白癜风疗效观察

目的:探讨308nm准分子激光联合0.1%糠酸莫米松乳膏治疗面部白癜风的疗效及安全性。方法:选取门诊面部白癜风患者180例,随机平均分为三组,共有167例完成了试验观察,A组为治疗组57例,308nm准分子激光(2次/周)联合0.1%糠酸莫米松乳膏(1次/天)治疗;B组为对照1组56例,单用308nm准分子激光治疗(2次/周);C组为对照2组54例,单用0.1%糠酸莫米松乳膏外用治疗(1次/天),疗程均为12周或至皮损完全复色,观察三组治疗方法治疗面部白癜风的疗效及不良反应。结果:A组显效率为75.43%,B组为48.21%,C组为14.81%,A组和B组及C组比较,显效率差异有统计学意义(P<0.05)。三组患者均未出现严重不良反应。结论:308nm准分子激光联合0.1%糠酸莫米松乳膏治疗面部白癜风疗效好、副作用少,显效率明显高于单独治疗。     

白癜风与遗传因素

白癜风是一种常见的色素脱失性皮肤病,几乎世界上所有的种族都可能发病,但发病率有所不同。一般肤色越深的人发病率越高,其中有色人种的发病率高于白色人种,黄种人的发病率介于黑种人和白种人之间。如美国发病率不足1.0%,印度为4.0%,我国人群中发病率约为0.17%～1.00%。白癜风的发病在性别间无明显差异,各年龄组均可发病,但青少年多发,约50%的患者其发病年龄在20岁以内。近年来发现白癜风发病率有增加趋势,这可能与环境的污染加重有关。白癜风的发病机制至今尚不十分清楚,但研究证明与遗传、自身免疫、精神创伤及日光中的紫外线等多种因素有…     

人源性单纯疱疹病毒Ⅱ型抗gD蛋白噬菌体单链抗体库的构建

目的:利用HSV-2病毒IgG、IgM抗体阳性的生殖器疱疹患者外周血淋巴细胞,构建人源单链抗体库。方法:取患者外周血淋巴细胞提取总RNA,逆转录成cDNA,以其为模板,分别扩增抗体重链及轻链可变区基因,将重链、轻链可变区基因拼接成单链抗体(scFv)基因,酶切后连接到噬菌粒载体pFAB5c中,将重组噬菌粒载体电转化大肠杆菌XL-1Blue,构建噬菌体抗体库并测定其库容量。结果:成功构建人源性单纯疱疹病毒抗gD蛋白噬菌体抗体库,库容达1.86×106。结论:利用RT-PCR和噬菌体表面展示技术成功构建了HSV-2抗gD蛋白人源性单链抗体库,为其进一步的研究打下了基础。     

单纯疱疹病毒Ⅱ型CTL表位DNA疫苗的Th1/Th2免疫应答研究

目的探讨单纯疱疹病毒Ⅱ型（HSV-2）CTL表位疫苗对小鼠Th1/Th2型免疫应答的影响。方法用构建的HSV-2pVAX-gD-CTL重组质粒免疫BALB/c小鼠3次,末次免疫后第4周检测小鼠血清中gDIgG水平;MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖情况;ELISA法检测脾淋巴细胞培养上清中INF-γ,IL-4水平;流式细胞仪测定小鼠CD4^＋,CD8^＋T淋巴细胞亚群。结果HSV-2pVAX-gD-CTL疫苗免疫小鼠后可以诱导脾淋巴细胞增殖及分泌INF-γ和IL-4,诱导CD4^＋,CD8^＋T细胞百分比的升高;并能刺激血清HSV-2gD特异性抗体的产生。其中pVAX-gD-CTL组在脾淋巴细胞刺激指数及其分泌INF-γ水平、CD4^＋,CD8^＋T细胞百分比升高方面均显著高于pVAX-gD对照组。结论CTL表位对单纯疱疹Ⅱ型重组DNA疫苗诱导的Th1型免疫应答有促进作用。     

单纯疱疹病毒2 gD基因的树突细胞疫苗免疫效应研究

【摘要】 目的 观察单纯疱疹病毒2 gD（HSV-2 gD）基因的树突细胞（DC）疫苗在动物实验中诱发特异性免疫应答情况。 方法 用腺病毒介导的、HSV-2 gD基因修饰的DC（pAdeno-HSV-2 gD-DC）疫苗免疫BALB/c小鼠3次,末次免疫后第10天检测小鼠血清中gD IgG水平;同时,分离小鼠脾淋巴细胞,用HSV-2gD蛋白刺激,MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖情况、乳酸脱氢酶释放法测定细胞毒性T淋巴细胞（CTL）活性及ELISA法检测脾淋巴细胞培养上清中干扰素γ（IFN-γ）、白介素4（IL-4）水平。实验分为4组,pAdeno-DC组、pAdeno-HSV-2 gD-DC组、DC组、空白对照组,每组10只。 结果 pAdeno-HSV-2 gD-DC组小鼠血清内可检测到高滴度针对HSV-2gD蛋白的抗体（A450值为0.313 ± 0.034）,与pAdeno-DC组（0.034 ± 0.009）、DC组（0.028 ± 0.009）、空白对照组（0.026 ± 0.010）比较,差异有统计学意义（P < 0.05）。pAdeno-HSV-2 gD-DC可以诱导小鼠脾淋巴细胞增殖（刺激指数为1.600 ± 0.215）、有效杀伤靶细胞（CTL活性为37.1%）,与pAdeno-DC组（分别为1.063 ± 0.070和16.0%）、DC组（1.056 ± 0.063和14.9%）、空白对照组（1.020 ± 0.051和15.7%）比较,差异均有统计学意义（P < 0.05）。pAdeno-HSV-2 gD-DC组小鼠分离的脾细胞培养上清可以检测到高水平IFN-γ（A450值为0.568 ± 0.031）和IL-4（A450值为0.544 ± 0.043）,与pAdeno-DC组（0.266 ± 0.021和0.278 ± 0.037）、DC组（0.271 ± 0.023和0.275 ± 0.044）、空白对照组（0.252 ± 0.012和0.245 ± 0.051）比较,差异均有统计学意义（P < 0.05）。 结论 构建的pAdeno-HSV-2 gD-DC疫苗可以在小鼠中产生较强的特异性免疫应答。     

单纯疱疹病毒2型潜伏相关转录体开放读码框3对Vero细胞凋亡的影响

目的 研究单纯疱疹病毒2型 （HSV-2）潜伏相关转录体（LAT）开放读码框3（ORF3）对顺铂诱导的非洲绿猴肾细胞（Vero细胞）凋亡的影响。方法 构建重组质粒pEGPF-ORF3,并转染Vero细胞,逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）验证目的基因的表达。顺铂诱导Vero细胞凋亡,通过荧光显微镜观察凋亡小体,Giemsa染色检测细胞核形态,噻唑蓝法（MTT法）检测细胞增殖,流式细胞仪分析细胞凋亡情况。实验结果采用SPSS13.0进行分析,各组间两两比较采用单因素方差分析和t检验。 结果 成功克隆HSV-2 333株ORF3基因,构建pEGFP-ORF3真核表达载体,RT-PCR验证该真核表达载体能在Vero细胞中高效表达。转染pEGFP-ORF3的Vero细胞经顺铂诱导凋亡后Giemsa染色,显示胞核蓝染,胞质淡浅,细胞形态正常。MTT 法分析显示,细胞增殖在转染pEGFP-ORF3组（2.56 ± 0.21）与未经任何处理的正常对照组（2.66 ± 0.13）比较,差异无统计学意义（P ＞ 0.05）,但高于顺铂诱导凋亡的正常对照组（1.65 ± 0.11）和pEGFP-C2组（1.56 ± 0.18）,差异均有统计学意义（P ＜ 0.05）;流式细胞仪分析细胞凋亡率,转染pEGFP-ORF3组（4.03% ± 1.04%）与正常对照组（2.13% ± 0.09%）比较,差异无统计学意义（P ＞ 0.05）,但低于空质粒pEGFP-C2组（19.45% ± 2.05%）,且差异有统计学意义（P ＜ 0.05）。结论 HSV-2 LAT ORF3在Vero 细胞中具有抗顺铂诱导的凋亡作用。     

HSV-2 LAT过表达vero细胞中microRNA的表达谱变化

目的分析过表达疱疹病毒Ⅱ型（HSV-2）潜伏相关转录子LAT后vero细胞microRNA表达谱的表达变化。方法通过化
学合成的方法获得LAT基因的全长序列。构建HSV-2LAT逆转录病毒表达载体pRetroQ- AcGFP1-C1,包装获得HSV-2LAT
基因过表达的逆转录病毒。利用microRNA芯片技术,分析感染逆转录病毒HSV-2LAT后vero细胞microRNA表达谱的变化,
得到因LAT基因过表达而产生变化的microRNA。结果通过microRNA芯片分析,逆转录病毒HSV-2LAT感染vero细胞后,
可引起hsa-miR-23a*、kshv-miR-K12-3、hsa-miR-943、hsa-miR-634、hsa-miR-12705种microRNA2倍以上上调;使hsa-miR-181a-2*、hsa-miR-450b-5p、hsa-miR-31、hsa-miR-24、kshv-miR-K12-12*5种microRNA2倍以上下调。结论LAT基因过表达后
可引起vero细胞microRNA表达谱的变化。
     

CTCF在人类疱疹病毒潜伏复发机制中的调控作用

疱疹病毒家族是一类具有包膜结构的双链DNA病毒,是人类病毒性疾病常见的病原体。目前已经鉴定的人类疱疹病毒共有8种,分为α、β、γ三个亚科,8种疱疹病毒所引起的临床表现各不相同,但均可在宿主体内建立长期潜伏感染,并在潜伏感染过程中可出现再激活,再致病。CTCF结合因子作为重要的多功能转录因子,是表观遗传学调控的重要作用因子,可调控多种靶基因的表达。目前研究提示,在多种人类疱疹病毒潜伏的建立及再激活过程中,CTCF发挥着重要的作用,本文就CTCF在人类疱疹病毒潜伏复发机制中的调控作用作一综述。     

伐昔洛韦对频发性生殖器疱疹的抑制疗法

目的研究伐昔洛韦抗病毒抑制疗法治疗频发性生殖器疱疹的临床效果。方法将120例频发性生殖器疱疹患者(复发次数>6次/年)采用数字表法随机分成4组,Ⅰ组:阿昔洛韦400 mg,每d 2次6个月;Ⅱ组:伐昔洛韦500 mg,每d 1次6个月;Ⅲ组:伐昔洛韦500 mg,每d 2次3个月;Ⅳ组:伐昔洛韦500 mg,每d 2次3个月,500 mg,每d 1次3个月。对患者复发情况进行观察,并检测患者单纯疱疹病毒2型(herpes simplex virus 2,HSV-2)DNA病毒载量的变化。结果与治疗前相比,4种治疗方案均能明显减少患者疱疹的复发次数,其中Ⅳ组减少复发次数与其他3组比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。伐昔洛韦500 mg,每d 2次能有效抑制病毒复制,后续的减量抑制疗法可以进一步抑制病毒复制。结论伐昔洛韦能有效预防患者频发性生殖器疱疹复发,并且能够有效抑制病毒复制。     

毕赤酵母表达系统

毕赤酵母表达系统是一种新的真核基因表达系统 ,由于其有许多突出的优点 ,越来越受到分子生物学界的重视 ,已有多种重组蛋白在该系统成功表达。本文从表达菌株、表达载体、转化及整合、外源蛋白的表达及修饰等方面对其进行综述 ,并分析了影响毕赤酵母高效表达外源蛋白的因素。