白芍总苷抗血栓形成作用

白芍为毛茛科植物芍药P aeon ia lactif loraPall.的根,具有养血、止痹、益气、通络的作用。白芍总苷(total g lycosides of paeony,TGP)是从白芍中提取的有效成分,主要含有芍药苷、芍药新苷、芍药内酯苷、苯甲酰芍药苷等成分。现代药理证明,TGP具有抗炎、免疫调节、镇静、镇痛、耐缺氧、抗氧化和抗心肌缺血等作用[1~4]。本实验采用大鼠实验性静脉血栓模型,旨在探讨TGP抗血栓形成作用及其可能机制。1材料1.1动物:W istar大鼠,雌雄兼用,体重为250~300 g,由吉林大学实验动物中心提供,合格证号SCXK-(吉)2003-2004。1.2药品:TGP(含芍药…     

Iodogen法用于蛋白质的^125I标记：介绍一种高标 记方法

本文报道了一种用Ｉｏｄｏｇｅｎ法进行蛋白质的＾１２５Ｉ标记方法，该方法具有操作方便、＾１２５Ｉ利用率高、分离蛋白快速等优点。利用固相免疫放射分析法，对该法标记的＾１２５Ｉ－驴抗兔ＩｇＧ抗体活性进行分析，其抗体结合力和效价均明显高于氯胺Ｔ洒标记的抗体，上述结果提示，Ｉｏｄｏｇｅｎ法更适合于蛋白质的＾１２５Ｉ标记。     

强力天麻杜仲胶囊活性成分的提取及其对巨噬细胞的抑制作用

目的: 提取强力天麻杜仲胶囊（QLTM）的活性成分,检测其药物活性及其对巨噬细胞的调节作用。方法: 随机将小鼠分为对照组（生理盐水组）、QLTM胶囊组（阳性药物组）及QLTM活性成分高、中、低剂量提取物组,连续灌胃14 d,通过热板致痛法观察小鼠首次舔后足时间和1 min内的舔后足次数,通过醋酸致痛法观察小鼠首次扭体时间和15 min内的扭体次数,通过腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验检测巨噬细胞活性。结果:在热板致痛实验中,高、中剂量提取物组小鼠首次舔后足时间延长,1 min内的舔后足次数减少（P<0.05或P<0.01）;在醋酸致痛实验中,高、中剂量提取物组小鼠首次扭体时间延长,15 min内的扭体次数减少（P<0.05）;高、中剂量提取物组及QLTM胶囊组小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞百分率均降低,但中剂量组低于对照组（P<0.05）。结论: QLTM活性成分具有镇痛和抑制巨噬细胞活性作用。     

重组Lin-7蛋白的表达

目的:表达具有PDZ功能区的Lin-7蛋白,并制备抗Lin-7蛋白的特异性抗体.方法:采用质粒构建表达重组GST-Lin-7蛋白,SDS-PAGE分析表达蛋白;以GST-Lin-7蛋白为抗原免疫家兔,制备抗Lin-7多克隆抗体,ELISA法检测抗体特异性.结果:重组GST-Lin-7蛋白呈分泌型表达于胞浆内;制备的抗Lin-7抗体与GST、ARIPs等蛋白无交叉反应.结论:成功地构建了Lin-7蛋白表达质粒,并制备了抗Lin-7 的特异性抗体.     

NF-kB活性抑制对人外周血树突细胞功能及Ⅰ型糖尿病治疗的影响

目的:研究体外定向诱导培养Ⅰ型糖尿病患者外周血单核来源树突状细胞表面标记(CD83、CD80、CD86)及细胞因子的分泌,及其抑制树突状细胞中核转录因子kB(NF-kB)活性的变化,探讨其在Ⅰ型糖尿病发病机制中的作用。方法:糖尿病患者20名随机分为IDM组和ODN组各10名,无偿献血员对照组(N组)10名。每组外周血中分离出单个核细胞(PBMC),加入IL-4、GM-CSF对DC进行诱导培养,同时向ODN组中加入NF-kB特异性低脱氧核苷酸(ODN)培养细胞,流式细胞仪测定细胞表面标记CD83、CD80、CD86的水平,ELISA方法检测培养上清液中IL-12的水平。结果:培养物上清液IL-12水平的测定结果为:N组和ODN组IL-12水平显著低于IDM组(P0.05);N组和ODN组IL-12水平无显著差异(P0.05)。DC表面标志的测定显示,在N组和ODN组中的CD83、CD80、CD86显著地低于IDM组(P0.05);N组和ODN组CD83、CD80、CD86无显著差异(P0.05)。结论:Ⅰ型糖尿病患者DC细胞成熟增强而功能异常,与DC中的NF-kB活性增强有关。ODN可以抑制Ⅰ型糖尿病患者DC中NF-kB活性,减少共刺激分子的表达和IL-12的分泌。     

抗ACTH单克隆抗体制备及鉴定

本文报道了应用淋巴细胞杂交瘤技术将促肾上腺皮质激素(ACTH)与碳化二亚胺偶联后免疫小景(Balb/c)与骨髓瘤细胞融合,制备了3株分泌抗ACTH单克隆抗体的杂交瘤。建立了稳定的测定小分子肽类物质的间接ELISA方法。对其腹水效价进行了测定,并对其特异性进行了分析。     

激活素ⅡA型受体在免疫细胞上的表达

目的　探讨激活素ⅡA受体 (ActRⅡA)在免疫细胞中的表达 ,揭示激活素 (Activin)对免疫细胞的作用方式。方法　以ActRⅡAC末端肽作为抗原免疫家兔制备特异性抗ActRⅡAC末端抗体 ,通过免疫细胞化学染色技术观察ActRⅡA在免疫细胞上的分布。RT PCR检测ActRⅡAmRNA表达情况 ,硝酸还原酶法检测小鼠腹腔巨噬细胞产生NO水平。结果　采用特异性抗ActRⅡAC末端抗体进行免疫细胞化学染色 ,结果显示ActRⅡA在小鼠巨噬细胞上高水平表达 ,而在其它免疫细胞 (T、B、NK、DC)上未见表达。RT PCR检测结果进一步表明ActRⅡAmRNA在巨噬细胞中表达。硝酸还原酶法检测结果显示 ,激活素A能明显抑制LPS刺激的巨噬细胞NO的产生。结论　ActRⅡA主要在巨噬细胞上高水平表达 ,提示激活素可通过ActRⅡA介导的信号传导途径参与巨噬细胞功能调控。     

卵泡休止素固相放射免疫分析法的建立及初步应用

本研究利用抗卵泡休止素的单克隆抗体与免抗卵泡休止素的多克隆抗体，建立了用于检测卵泡休止素的双抗体夹心固相放射免疫分析法。结果显示，该分析法对印泡休止素的最小检出量为２５ｐｇ／管；与相关肽激活素Ａ、抑制素，以及促肾上腺皮质激素等均无明显交叉反应。组间及批间的变异系数分别为４．７％和７．８％。应用本方法对部分生物样品中的卵泡休止素进行了检测。结果发现，人卵泡液内含有极高的卵泡休止素（５．２±２．１μｇ／ｍｌ），羊水中含量次之（７３±３８ｎｇ／ｍｌ），健康人血浆中印泡休止素的水平为１０．１±４．８ｎｇ／ｍｌ。     

抗人绒毛滋养细胞单克隆抗体的研制及鉴定

抗人绒毛滋养细胞单克隆抗体的研制及鉴定柳忠辉，王树和，陈越（白求恩医科大学免疫学教研室，长春１３００２１）陈宝江（吉林省计划生育科研所遗传室，长春１３００４１）胎儿绒毛滋养细胞在母胎间物质交换及妊娠期的免疫调节等方面起重要作用。它是胎儿产前遗传病诊断...     

激活素A对RAW264.7巨噬细胞活性的调节作用

目的探讨激活素A对参与炎症反应的小鼠巨噬细胞活性调节作用。方法以LPS刺激活化的小鼠巨噬细胞系RAW264．7细胞作为阳性参照,ELISA法检测激活素A及LPS刺激的小鼠腹腔巨噬细胞系RAW264．7细胞IL-1β分泌水平,还原酶法分析NO分泌水平,RT-PCR检测IL-1β和iNOS mRNA的表达,瑞氏染色检测RAW264．7细胞吞噬活性。结果在激活素A刺激下RAW264．7细胞IL-1β和NO分泌水平均明显升高,IL-1β和iNOS mRNA表达亦增加,巨噬细胞吞噬活性增强;激活素A和LPS共刺激RAW264．7细胞时,激活素A明显抑制LPS刺激的RAW264．7细胞IL-1β和NO产生水平,以及IL-1β和iNOS mRNA表达,巨噬细胞吞噬活性也明显低于LPS单独刺激组。结论激活素对巨噬细胞的活性调节具有双重作用,这种作用与巨噬细胞的激活状态有关。