血管生成素样蛋白3调节人肾小球内皮细胞的通透性

血管生成素样蛋白3(Angptl 3)为血管生成素样蛋白家族成员之一,在正常肾组织微弱表达,在一些肾脏疾病中有较强的表达[1].我们以往的研究发现,在阿霉素肾病大鼠模型中,随着蛋白尿的加重,肾小球中Angptl 3表达增加[2,3].Camenlisch等[4]发现Angptl 3能诱导内皮细胞黏附和迁移.本研究检测Angptl 3对肾小球内皮细胞(GEnC)通透性的影响,探讨Angptl 3在肾脏疾病中的作用.     

醛糖还原酶ELISA测定及意义

从牛睾丸分离纯化醛糖还原酶(AR),皮下注射免疫新西兰兔制备抗血清,血清纯化后用辣根过氧化物酶(HRP)标记制备抗体-HRP交联物,利用夹心ELISA(抗体-抗原-酶标抗体)测定了22例糖尿病人及10例正常对照的红细胞AR水平.结果①糖尿病AR水平显著高于正常人;②AR水平病人约有5倍、正常人约有3倍的变异;③病人AR水平与空腹血糖水平明显相关,正常人无相关;④AR水平与性别、年龄、糖尿病病程无关.结论ELISA测定红细胞AR水平方法简便、特异,为研究AR提供了一个有用的方法.     

过表达整合蛋白α5β1的SMMC7721细胞株的建立和鉴定

构建过表达整合蛋白α５β１的ＳＭＭＣ７７２１细胞株。方法应用分子克隆技术和基因转染建立过表达整合蛋白α５β１的ＳＭＭＣ７７２１细胞株,应用ＲＴ－ＰＣＲ及流式细胞术鉴定ＳＭＭＣ７７２１细胞表面整合蛋白α５β１的表达。结果获得过表达整合蛋白α５／β１的ＳＭＭＣ７７２１细胞株α５．３－７７２１,β１．６－７７２１,α５β１．６－７７２１细胞。结论整合蛋白α５β１基因转染后,ＳＭＭＣ７７２１细胞整合蛋白α５β１的ＲＮＡ及蛋白质表达明显提高。过表达整合蛋白α５β１的ＳＭＭＣ７７２１细胞株的建立有助于研究整合蛋白α５β１在肝癌中的作用     

醛糖还原酶的分离纯化和性质分析

利用离心、盐析及ＤＥＡＥ－纤维素、羟基磷灰石、葡聚糖－Ｇ１００多步层析法将牛睾丸ＡＲ分离纯化，醛糖还原酶（ａｌｄｏｓｅｒｅｄｕｃｔａｓｅ，ＡＲ），并利用体外酶动力学方法测定其底物特异性，为寻找有效的醛糖还原酶抑制剂提供线索。结果：纯化的酶经ＳＤＳ－ｐＡＧＥ电泳鉴定示一单一蛋白条带，牛睾丸ＡＲＭｒ约为（４００００±１０００）ｕ，ＡＲ底物特异性，按１／ｋｍ大小依次排列为：Ｐ－硝基苯醛，ＤＬ－甘油醛，Ｄ－葡萄糖醛酸，Ｄ－木糖，Ｄ－半乳糖，Ｄ－葡萄糖。     

人皮肤成纤维细胞纤连蛋白的纯化及其N-糖链结构

研究人皮肤成纤维细胞纤连蛋白及其片段 Ｎ－糖链结构。用明胶－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ亲和柱纯化培养的人皮肤成纤维细胞所分泌的纤连蛋白（Ｆｎ），用胰糜蛋白酶限制性水解，获得明胶结合片段和肝素结合片段；用肼化的凝集素与经过碘酸氧化后的辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）缩合的方法制备 ４种 ＨＲＰ－凝集素（Ｃｏｎ Ａ， ＤＳＡ，ＷＧＡ，ＬＣＡ）探针，用Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ法检测明胶结合片段（Ｍｒ４３ × １０３）、肝素结合片段（Ｍｒ３０ ×１０３，２５ ×ｌ０３）在切除唾液酸及平分型 Ｎ－乙酰氨基葡萄糖（ＧＩｃＮＡｃ）前后的 Ｎ－糖链结构。结果： Ｆｎ的 Ｎ－糖链主要存在于 Ｍｒ分别为４３ × １０３、３０ ×１０３、２５ ×１０３的３个片段上，其结构为二、三（主要是Ｃ２Ｃ２６）或四天线的复杂型糖链；糖链末端连有唾液酸（ＳＡ）；都含有核心岩藻糖（ｃ－Ｆｕｃ；平分型 ＧｌｃＮＡｃ只存在于 ４３ × １０３片段所连的糖链中，而且很可能与 Ｃ—Ｆｕｃ共同存在于二天线或Ｃ２Ｃ２６三天线精链上；Ｆｎ的糖链中不含有Ｎ－乙酰乳糖胺重复顺序。结论：在Ｆｎ不同片段上均含有复杂型Ｎ糖链，并存在核心岩藻糖结构，平分型ＧｌｃＮＡｃ只存在于４３ ×１０３片段上。     

亚硒酸钠对人肝癌细胞株甲胎蛋白、纤维连接蛋白及细胞膜糖链的影响

微量元素硒是机体正常生长的必需营养素,它能作为谷胱甘肽过氧化物酶组成部分,参与破坏机体代谢过程中产生的过氧化物,保障细胞膜或蛋白质中特定基团免受损害。随研究深入,发现体内硒水平与肿瘤发生率有密切关系。从实验动物获得的绝大多数资料支持硒是肿瘤细胞抑制剂的论点,特别是对上皮细胞。流行病学调查也提示硒缺乏与某些疾病产生有关。近年来报道用硒治疗消化道肿瘤,有一定成效。但从细胞水平研究硒对消化系     

基于胆汁泡相糖蛋白特征而研制诊断胆结石ELISA药盒的可行性分析

目的:分析胆汁泡相糖蛋白的特征并评估其ELISA药盒临床应用的可行性。方法:应用凝集素探针介导的点印迹法分析泡蛋白糖链的组成与结构,利用酶解方法测定泡蛋白各组分的构成,并分析其氨基酸组成。利用Westernblot法分析胆汁与血清泡蛋白的同源性,根据ELISAkit测定泡蛋白的含量分布,并以ROC曲线判别ELISAkit的临床应用价值。结果:化学分析泡蛋白由多肽和寡糖组成,其中多肽分子量约为21u,糖链约占总蛋白含量的37.3%,为核心岩藻糖丰富的多天线复杂型聚糖。泡蛋白具胆汁与血清分布两相性,胆固醇性结石组胆囊胆汁和血清33.5u泡蛋白含量分别为(213.4±70.1)μg/ml、(179.8±97.9)μg/ml,明显高于胆色素性结石症组和正常对照组(P<0.05),而后两者间差异无显著性(P>0.05)。ELISAkit判断胆固醇性结石的胆汁相敏感度和特异度分别为85%和90%,而血清相为61.7%和93.3%。结论:胆汁泡蛋白是一种新认识的胆结石促成核因子,其在不同人群中具有表达谱的异质性,ELISAkit辅助诊断胆石症具有一定的临床应用价值,但尚需更多病例的积累和验证。     

醛糖还原酶抑制剂对糖尿病大鼠肾脏超微结构的影响

研究醛糖还原酶抑制防治糖尿产现肾脏病变的意义，利用糖尿产现ＳＤ大鼠动物模型观察了醛还原酶抑制剂ｓｏｒｂｉｎｉｌ对大鼠尿蛋白和是能脏超微结构的影响，结果：糖尿病鼠用ｓｏｒｂｉｎｉｌ治疗后尿蛋白呈下降趋势，肾小球基底膜厚度及系膜基质堆积明显减少。     

醛糖还原酶抑制剂对糖尿病大鼠肾脏超微结构的影响

研究醛糖还原酶抑制剂防治糖尿病肾脏病变的意义。利用糖尿病ＳＤ大鼠动物模型观察了醛糖还原酶抑制剂ｓｏｒｂｉｎｉｌ对大鼠尿蛋白和肾脏超微结构的影响。结果：糖尿病鼠用ｓｏｒｂｉｎｉｌ治疗后尿蛋白呈下降趋势，肾小球基底膜厚度及系膜基质堆积明显减少。结论： ｓｏｒｂｉｎｉｌ对肾脏病变有明显疗效，使用醛糖还原酶抑制剂防治糖尿病肾病将是一条有希望的新路。     

大鼠丙酮酸激酶同工酶催化性质的比较研究

同工酶谱是研究细胞基因表达的良好指标。近年来国外已广泛利用同工酶谱的变化来观察个体发育或组织癌变时的基因表达,其中以丙酮酸激酶(PyK)的研究较为活跃。丙酮酸激酶至少有三种同工酶;L型主要存在于哺乳动物肝脏、肾皮质等与糖异生有关的组织中;M(或 M_1)型存在于骨胳肌、心肌和脑中;而K(或M_2)型则广泛存在于除骨胳肌