原子吸收光谱仪以非原子化法测定金属硫蛋白

原子吸收光谱仪因灵敏度高,干扰少而广泛用于分析领域,成为比较普及的大型精密仪器.近年来,将其应用于分子吸收测定(即不须将样本原子化)的研究工作也受到极大的重视,已在理论及技术上得到肯定[1～3].     

HPLC测定不同产地佛手中橙皮苷的含量

目的:建立HPLC测定不同产地佛手中橙皮苷的含量.方法:采用Ultimate XB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-2％醋酸溶液(18∶82),体积流量1.0 mL· min-1,检测波长284 nm,柱温30℃.结果:橙皮苷在2.24～44.8 mg·L-1线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为98.55％,RSD 0.97％(n=6).结论:该方法简便,准确,可用于佛手药材的品质评价.     

广东省梅州地区客家人群GSTP1和GSTM1基因多态性研究

目的了解谷胱甘肽硫转移酶P1(GSTP1)、M1(GSTM1)基因多态性在广东梅州地区人群中的分布规律.方法采用聚合酶链式反应-限制性酶切片段长度多态性(PCR-RFLP)方法和以β-Globin为内对照的双重PCR法分别检测广东省梅州地区512名健康客家居民GSTP1和GSTM1基因型.结果调查人群GSTP1基因3种基因型GSTP1 A/A、GSTP1A/G、GSTP1 G/G分布频率分别为69.1%,28.2%,2.7%;GSTM1基因缺失型分布频率为62.1%;GSTM1基因在饮酒人群与不饮酒人群中的分布差异有统计学意义(P＜0.05),GSTP1基因在吸烟与不吸烟人群中的分布差异有统计学意义(P＜0.01),吸烟人群中GSTP1 A/A基因型分布频率较低(62.5%),GSTP1 A/G基因型分布频率较低(29.2%),GSTP1 G/G基因型分布频率较高(8.3%).GSTM1基因型分布与高血压家族史有相关性(OR=1.868,95%CI 1.119～3.119).结论 GSTP1基因多态性在广东梅州地区吸烟与不吸烟客家人群中分布有差异,GSTM1在广东梅州地区饮酒与不饮酒客家人群中分布有差异,GSTM1基因型分布与高血压家族史有相关性.     

倍半萜烯内酯通过非caspase途径诱导人鼻咽癌CNE1细胞凋亡

目的 :探讨半胱天冬酶(caspase)活化途径是否在倍半萜烯内酯(SLs)诱导人鼻咽癌(NPC)细胞凋亡中起作用。方法 :CNE1细胞株给予SLs的活性成分 parthenolide(PN)处理 ,以及与caspase-3和 -9特异性抑制剂联合作用进行caspase途径阻断实验 ,检测细胞内caspase -9和 -3活性 ,观察其与细胞毒性和凋亡指标的关系。 结果 :PN作用后细胞TUNEL阳性率和SubG1细胞亚群增高 ,细胞失贴壁率和LDH漏出率显著增加(P<0.05) ,但caspase-9和 -3活性未见升高。特异性抑制剂作用后caspase活性明显降低(P<0.05) ,而细胞凋亡和毒性指标未见明显改变。 结论 :提示PN诱导CNE1细胞凋亡作用与其细胞毒性效应有关 ,与caspase活化途径无关     

镉诱导大鼠腺垂体细胞凋亡及与p38 MAPK&ERK1/2途径介导机制关系的初步研究

目的了解CdCl2对腺垂体的损伤以及细胞凋亡发生与p38MAPK、ERK12表达的关系,为了解镉致腺垂体毒作用的分子机制提供科学依据。方法采用健康雄性SD大鼠进行整体试验(n=12),分别每天经口灌胃给予0、1.0、2.0、4.0mgkgbwCdCl2,6周后取腺垂体进行指标检测;离体试验采用酶解分离大鼠之原代腺垂体细胞,分别以0、1.56、3.12、6.25、12.50、25.00、50.00、100.00μmolLCdCl2处理,收获细胞进行检测;特异性阻断剂阻断凋亡效应的试验采用2.65μmolLp38MAPK的特异阻断剂SB203580或10μmolLERK12激酶的特异阻断剂U0126处理细胞,然后以3.12μmolL或100.00μmolL的CdCl2处理细胞后进行相应的检测。检测指标包括:TUNEL法和流式细胞术等检测凋亡。结果整体实验和离体实验结果均显示CdCl2以剂量依赖方式诱导腺垂体细胞发生凋亡(P<0.05);特异性阻断剂效应的研究结果显示2.65μmolLSB203580和10μmolLU0126对TUNEL阳性细胞的相对灰度和凋亡细胞率均有一定的影响。结论在一定的剂量条件下,CdCl2影响腺垂体激素分泌水平,并导致发腺垂体细胞凋亡,MAPKs家族成员p38MAPK和ERK12激酶通路在凋亡发生过程中可能发挥一定的作用。     

JNK阻断剂CEP-11004对铝诱导的大鼠皮层神经元凋亡的保护作用

目的　为探讨铝诱导神经元凋亡的信号传递机制及铝的神经毒性机制 ,并为防治神经退行性疾病提供线索 ,研究应激活化蛋白激酶 (又称c junN末端激酶 ,SAPK/JNK)的阻断剂CEP 110 0 4 (KT8138)对氯化铝 (AlCl3)诱导大鼠皮层神经元凋亡的保护作用。方法　SD乳大鼠大脑皮层神经元培养 ,FDA荧光染色法检测神经元存活率 ,Hoechst332 5 8核荧光染色 ,琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡 ,SAPK/JNK分析试剂盒作激酶分析。结果　一定剂量的AlCl3(10～ 10 0 0 μmol·L- 1)可降低皮层神经元存活率 ,诱导大鼠皮层神经元凋亡 ,SAPK/JNK的磷酸化水平明显升高 (对照组的 4 .2倍 ,P <0 .0 1) ,SAPK/JNK被激活。但是 ,当CEP 110 0 4 (1～ 10 μmol·L- 1)预孵 6h后再加入 10 0 0 μmol·L- 1AlCl3染毒 6h ,SAPK/JNK的磷酸化水平呈剂量依赖性地降低 (分别是对照组的 2 .3,1.2和 0 .9倍 ,P <0 .0 5 ) ,CEP 110 0 4通过抑制细胞凋亡而促进皮层神经元的存活 ,对大鼠皮层神经元产生保护作用。结论　CEP 110 0 4可能通过抑制SAPK/JNK的活性 ,对AlCl3诱导的皮层神经元凋亡产生保护作用     

菊花活性成分Parthenolide对人鼻咽癌CNE2细胞线粒体功能和半胱天冬酶活性的影响

背景：鼻咽癌是我国南方重点防治的恶性肿瘤之一，探讨天然草本菊花活性成分在NPC化学预防的作用，对建立现代康复体系具有重要意义。目的：研究菊花活性成分倍半萜烯内酯(SLs)对人鼻咽癌细胞中线粒体功能和半胱天冬酶活化途径的影响。设计：完全随机对照分组设计。地点和对象：由中山大学公共卫生学院预防医学系完成，对象为低分化CNE2细胞株。干预：对parthenolide(PN)进行剂量-反应和时间效应作用观察，采用噻唑蓝(MTT)颜色反应检测细胞线粒体功能，底物荧光光谱法测定细胞内caspase-9和-3活性，蛋白免疫印迹法检测线粒体内细胞色素C释放和caspase-3酶原降解片段；并应用特异性抑制剂进行细胞内caspase途径阻断实验。主要观察指标：细胞线粒体功能、细胞内caspase-9和caspase-3活性、线粒体细胞色素C的释放和caspase-3酶原的降解。结果：PN(1—100μmol／L)作用12h和24h后，MTT颜色反应抑制率随剂量显著增高，呈明显剂量依赖性(Pearson‘s r=0．7322，0．7703，P&;lt;0．05)，IC50分别为252．94μmol／L和49．63μmol／L；但caspase-9和-3活性未见升高，未见细胞色素C释放和caspase-3酶原降解片段形成。PN与caspase抑制剂联合作用后，caspase-9和-3活性明显低于对照和单独PN作用(t=9．146，8．280,27．325，27．450，P&;lt;0．05)。结论：PN可明显诱导线粒体功能降低和丢失，与介导肿瘤细胞增殖抑制和毒性效应有关，但不影响CNE2细胞caspase途径的活化，此项研究为NPC的化学预防和康复提供依据。     

鼻咽癌细胞增殖因素的检测与预后的相关性

目的：探讨鼻咽癌细胞中细胞增殖因素cyclinD1、c-erbB-2、Ki-67、PCNA蛋白的表达及其与鼻咽癌预后的关系。方法：以免疫组化S－P法检测212例鼻咽癌组织cyclinD1、c-erbB-2,Ki-67和PCNA蛋白的表型。结果：cyclinD1蛋白表达阳性率81．25％,表达程度与临床分期、原发灶范围、鼻咽部复发呈正相关,与患者5年生存率呈负相关。c-erbB-2蛋白表达阳性率为95％,表达程度与临床分期、原发灶、颈部转移灶、局部复发及远处转移呈正相关,与5年生存率呈负相关。Ki-67蛋白表达阳性率为97％,表达程度与临床分期、原发灶、颈部转移灶呈正相关。PCNA蛋白表达阳性率为99％。在cyclinD1,c-erbB-2,Ki-67及PCNA4因素中除Ki-67与PCNA无明显相关性外,其他因素间均存在明显的相关性。多因素分析表明对鼻咽癌颈后有显著影响的因素是cyclinD1、c-erbB-2。结论：cyclinD1、c-erbB-2与鼻咽癌的预后有较好的相关性,对于cyclinD1、c-erbB-2高表达的患者,应采取综合治疗。     

氯化镉对脾淋巴细胞DNA链损伤和修复的体外实验研究

镉 (Ｃａｄｍｉｕｍ ,Ｃｄ)具有遗传毒性 ,1994年被国际癌症研究会 (ＩＡＲＣ)定为Ⅰ级致癌物 ,即人类致癌物。镉的致癌作用与其损伤ＤＮＡ和影响ＤＮＡ的修复有关[1] 。已知无机镉 (Ｃｄ Ｃｌ2 )可损害机体的免疫系统 ,可能是ＤＮＡ的损伤导致淋巴细胞功能下降。因此 ,应用脾淋巴细胞进行ＤＮＡ损伤和修复能力的检测 ,对探讨镉免疫毒性作用的分子生物学机制具有重要意义。一、材料和方法1.实验动物 :ＢＡＬＢ/Ｃ小鼠 ,体重 (2 0± 5 )ｇ ,二级动物 ,中山医科大学实验动物中心提供。2 .脾淋巴细胞ＤＮＡ链损伤 (ＳＳＢｓ)和修复检测 :(1)脾…