气相色谱-质谱法测定血样中三甲基氯化锡

目的建立气相色谱-质谱法测定血样中三甲基氯化锡(TMT)的方法。方法血样先用乙腈萃取,然后用四乙基硼酸钠衍生化,衍生产物经毛细管色谱柱分离,气相色谱-质谱法测定。结果血样中TMT水平在0.025 9~2.590 0μg呈线性关系,相关系数为0.999 8,最低检出质量浓度为0.009 mg/L(以取1.0 ml血样计算)。相对标准偏差为2.2%~5.0%,回收率为75.7%~77.8%,样品在4℃中至少可保存14 d。结论该方法灵敏度高,结果可靠,操作简便,可用于血样中TMT检测。     

75例广东籍汉族人蛋白磷酸酶2A-B56γ亚基基因5'-侧翼区多态性分析

目的 探讨蛋白磷酸酶2A(pp2A)-B56γ亚基基因(PPP2R5C)启动子区的多态性和人群分布.方法 随机选取广东汉族健康人群的全基因组DNA,聚合酶链反应(PCR)获得PPP2R5C基因5'-侧翼区的目的 片段产物直接再测序,序列比对并确证遗传变异位点,采用HaploView软件进行等位基因型人群分布的分析、并与国际单体型图谱计划(Hap-Map)数据进行比较.结果 成功测序75例健康人(150条染色体)PPP2R5C基因-1933nt+241nt的目的 片段,发现该人群中存在5个遗传变异位点且各等位基因型在年龄组和性别之间分布差异无统计学意义(P>0.05),最小等位基因频率(MAF)分别为-1447C>T(0.67%)、-1430G>A(19.33%)、-1274T>C(19.33%)、-563G>C(19.33%)和-526T>C(0.67%);与HapMap的中国北京人群和其他国外人群MAF和分布数据略为不同,但差异无统计学意义(P>0.05).结论 筛查出和首次报道PPP2R5C基因5'-侧翼区在中国南方广东汉族健康人群中的多态性位点及其等位基因型的分布.     

中国南方粤语方言地区汉族人群GSTM1、GSTT1基因多态性

背景与目的:了解谷胱甘肽-S-转移酶M1、T1(GSTM1、GSTT1)基因多态性在中国南方粤语方言地区健康人群中的分布规律,初步探讨其与人群某些疾病家族史之间的关系。材料与方法:根据研究目的在广东省新兴县和广东省广州市两个地区选择符合条件的健康人群606人作为研究对象。应用聚合酶链式反应-2%琼脂糖凝胶电泳的方法检测调查对象GSTM1、GSTT1基因型。结果:在调查人群中,GSTM1基因纯合缺失基因型GSTM1(-/-)的出现频率为56.8%(n=597);GSTT1基因纯合缺失基因型GSTT1(-/-)的出现频率为42.1%(n=579);两基因联合缺失的频率为22.8%(n=570)。结论:GSTM1与GSTT1基因之间在人群中分布相互独立,无连锁现象,GSTM1基因在两个不同地区来源人群中的分布有显著差异。GSTT1在人群中不同基因型的分布与研究人群中冠心病疾病家族史的发生之间显著关联,有冠心病家族史人群GSTT1缺失基因型的表达显著增加。     

镉对免疫系统毒性的肾上腺素能受体信号传导机理

应用普通动物建立心得安、酚妥拉明及两者联合作用的动物模型,观察不同剂量镉对大鼠免疫系统的影响及与肾上腺素能受体信号传导的关系。结果表明：镉主要蓄积于肝、肾、肾上腺,并引起血浆肾上腺素水平改变,使淋巴细胞ｃＡＭＰ 降低以及Ｔ 淋巴细胞增殖功能和巨噬细胞吞噬功能受抑制;用心得安阻断β－ 受体后,仅巨噬细胞吞噬率受影响;用酚妥拉明阻断α－ 受体后,ＮＥ、Ｅ、Ｔ 细胞和巨噬细胞均受影响;α－ 受体、β－ 受体同时阻断后,仅中、高镉组ＣＤ＋４ ／ＣＤ＋８ 降低。提示镉免疫毒性的β－ 受体－ ｃＡＭＰ机理确实存在     

紫外光谱法测定超氧化物歧化酶活力的实验条件初探

超氧化物歧化酶（简称ＳＯＤ）广泛存在于生物体内,是机体清除超氧阴离子自由基的一种重要酶,在维持机体的氧化－抗氧化平衡中起重要作用。研究表明,ＳＯＤ活力的高低与机体衰老、肿瘤、炎症等疾病有关,在医药工业上也有广泛的应用前景,而且在评价外源性环境因素和有毒有害物对机体的生物学效应和毒性损伤有着重要意义,因而受到广泛关注［１］。目前ＳＯＤ活力测定方法很多,各有优缺点［２、３］,本研究探讨建立邻苯三酚自氧化－紫外光谱扫描法用于测定不同生物样本的组织和细胞ＳＯＤ活力的条件,为应用于卫生防疫工作中毒理学评价…     

广东人群PP2A—B亚基基因5’-侧翼区多态性连锁不平衡和单体型分析

目的探讨蛋白磷酸酶2A（PP2A）的调节B／PR558亚基基因5’-侧翼区多态性的连锁不平衡和人群单体型分布特征。方法选取经体检排除急慢性疾病的50例广东汉族健康人群为调查对象,以人胱舵D基因5’-侧翼区中-1684A〉G（rslll46169）、-1196C〉T（rs9419202）、-462G〉A（rs7074421）和-1610A〉T为4个纳入的多态性位点,采用HaploView软件分析遗传特征、连锁不平衡（LD）和单体型分布,进行人群分布的x2检验。结果50例广东汉族人群中各多态性位点基因型频率均符合Hardy—Weinberg平衡（P〉0．05）;杂合度（π）分别为-1684A〉G（0．020）、-1610A〉T（0．132）、-1196C〉T（0．059）和-462G〉A（0．059）,且均不存在变异纯合型,其中在-1196C〉T和-462G〉A位点明显低于HapMap人群（P〈0．05）;-1196C〉T和-462G〉A位点之间呈完全LD,但其他位点间未见LD关系;构建了该人群的3种单体型（HI～H3）,频率分布主要是野生单体型（H1,89．0％）,其余2种变异单体型分别为H2（7．0％）和H3（3．0％）;筛选出的3个标签SNP为-1684A〉G、-1610A〉T和-462G〉A。结论确定并报道中国南方广东汉族人群PPP2R2D基因5’-侧翼区中相对保守的标签SNP和单体型分布,为进行该基因启动子区的功能分析提供依据。     

癌基因高表达人上皮细胞转化模型的构建及应用

目的 构建癌基因高表达人支气管上皮细胞模型并应用于致癌物诱导细胞恶性转化活性的检测.方法 在永生化人支气管上皮细胞株16HBE中依次导入人端粒酶催化亚基(hTERT)、癌基因H-RasV12或c-Myc或空白载体,构建细胞株16HBETR、16HBETM和16HBETV.检测所构建细胞株的生物学特性如细胞形态、细胞生长、染色体畸变等指标.用已知致癌物硫酸镍(NiSO4)和二氢二醇环氧苯并(a)芘(BPDE)多次染毒,利用软琼脂试验及荷瘤试验检测化学物诱导细胞转化的活性.结果 经过端粒酶活性测定以及蛋白印迹验证上述转基因16HBE细胞株均构建成功.癌基因H-Ras和c-Myc的表达分别使细胞的增殖加速30.3%和10.4%,但是细胞染色体的畸变率没有发生改变.癌基因高表达细胞株只在软琼脂中形成少数背景克隆,但不能在裸鼠皮下形成肿瘤.BPDE诱导16HBETR、16HBETM细胞发生恶性转化的间期分别为5周、11周,比对照组细胞16HBETV的20周分别提前了15周和9周;而硫酸镍诱导16HBETR、16HBETM细胞转化的间期分别为11周、14周.比对照组细胞的32周分别提前了21周和18周.结论 癌基因高表达的细胞转化模型可大大缩短试验间期,有望应用于环境致癌物的筛查及化学致癌机制的研究.     

端粒酶在人胚肾上皮细胞转化中的作用

目的:利用原代人胚肾上皮细胞转化模型阐明端粒酶在细胞癌变过程中的作用。方法:用逆转录病毒介导的基因导入法,使人端粒酶催化亚基(humantelomerasecatalyticsubunit,hTERT)、HRas癌基因、猿猴病毒40(simianvirus40,SV40)编码的早期抗原在原代人胚肾上皮细胞中稳定地表达,观察细胞的生长特性、染色体畸变率以及细胞转化特征。结果:端粒酶的激活虽然能延长细胞的寿命,但不能使细胞永生化。如果细胞同时表达端粒酶和SV40编码的大T抗原(largeTantigen,LT),细胞就能获得永生化。在此永生化细胞株中导入HRas癌基因以及SV40编码的小T抗原(smallTantigen,ST),细胞发生恶性转化,表现为在软琼脂上形成克隆并在裸鼠皮下形成肿瘤。与原代细胞相比,永生化细胞株的染色体畸变率无改变,而恶性转化细胞的畸变率明显增加。此外在转化细胞和几种肿瘤细胞中表达阻抑人端粒酶的特异性siRNA,能显著地抑制肿瘤细胞的生长、诱导细胞凋亡并减少软琼脂上形成的克隆数目。结论:细胞永生化是癌变过程的必要阶段,端粒酶的激活不仅是细胞永生化的重要环节,而且在维持肿瘤细胞生长中起重要的作用。     

广州市瓶装饮用水卫生质量调查

为了解广州市瓶装饮用水卫生状况及存在问题，探索解决存在的问题的方法。从企业和市场上随机抽取44份桶装饮用水及24份小瓶装饮用水， GB17324－1998及GB／T8538－1995规定的检验方法进行检验，检验指标包括细菌总数、亚硝酸盐和PH值。细菌总数合格率市售桶装水为61．9％，小瓶装水为87．5％，企业桶装水为86．4％，前者与后两者相比较均存在显著性差异，所有水样的亚硝酸盐含量总超标率为11．8％。纯净水的PH值总不合格率为8．0％，广州市瓶装饮用水仍存在较大的卫生质量问题，尤其是市售桶装水的细菌总数超标问题严重。     

苏邦煤矿人群30年肿瘤死亡调查分析

苏邦煤矿人群３０年肿瘤死亡调查分析林育纯林忠宁郭维新为了解我省中小型煤矿职业人群肿瘤的危害情况，对苏邦煤矿人群３２年的肿瘤死亡进行回顾性队列调查。１对象与方法以该矿１９５９年１月１日至１９９０年１２月３１日在册正式男性职工为观察队列；肿瘤死亡病例为观...