抑制端粒酶活性能增加胃癌细胞对顺铂的敏感性

肿瘤细胞存在多药耐药现象和化疗药物的毒副作用是影响肿瘤化疗效果的主要原因。新近研究表明 ,表达于绝大多数肿瘤细胞而不表达于正常体细胞的端粒酶与化疗敏感性有关[1,2 ] 。在我们既往研究工作的基础上 ,我们观察了反义人端粒酶ＲＮＡ(ｈＴＲ)转染的ＳＧＣ 790 1胃癌细胞在端粒酶活性受抑制后对常用化疗药物顺铂敏感性的变化 ,探索胃癌联合化疗的新途径。一、材料与方法1 细胞培养 :人胃癌细胞系ＳＧＣ 790 1和反义人端粒酶ＲＮＡ转染的ＳＧＣ 790 1细胞 (790 1 ａｈＴＲ) [3] 均培养于含 10 %灭活的小牛血清、10 0 μｇ/ｍｌ链霉素、10…     

伴有前庭症状的突发性聋患者的临床分析

目的 分析伴有前庭症状的突发性聋患者的临床诊治情况.方法 对解放军总医院耳鼻咽喉科2002年1月～2007年5月期间住院治疗的47名(48耳)伴有前庭症状的突聋患者的临床资料进行综合回顾分析.结果 47例患者中,女25人(26耳),年龄15～64岁,平均45.7岁;男22人(22耳),年龄14～57岁,平均42.3岁;单耳发病46人(97.9%),双耳同时发病1人(2.1%),其中左耳23耳(47.9%),右耳25耳(52.1%);中重度聋6耳(12.5%),重度聋22耳(45.8%),极度聋20耳(41.7%);听力曲线低频下降型5耳(10.4%),平坦型10耳(占20.8%),高频F降型33耳(68.8%);经过一个疗程治疗后,治愈3耳(6.3%),显效5耳(10.4%),有效11耳(22.9%),无效29耳(60.4%).结论 伴有前庭症状的突聋患者听力损失严重,常规治疗效果不佳,预后差,其治疗方法 需进一步探索.     

HCCR-2干扰对HepG2肝癌细胞生物学行为的影响

人子宫颈癌基因HCCR是韩国科学家Ko等Ⅲ发现的一种与人类多种肿瘤有关的癌基因。HCCR可分为HCCR－1、HCCR－2两种亚型。HCCR－1基因由9个外显子构成，编码360个氨基酸，其蛋白相对分子质量为42000。HCCR－2比HCCR－1少1个外显子，其蛋白由304个氨基酸组成，相对分子质量为36000。研究发现，HCCR－2较HCCR－1具有更强的致癌能力。     

治疗用脐血干细胞的制备及初步临床应用

目的制备满足临床干细胞治疗需要的脐带血干细胞制剂,观察脐血干细胞局部移植治疗肝硬化失代偿和股骨头坏死的初步临床疗效。方法建立标准化操作规程(SOP),进行脐带血的采集、分离和检测,制备脐带血干细胞制剂进行局部移植。选择进行局部移植干细胞制剂治疗的相关疾病患者共11例,其中肝硬化9例、股骨头缺血坏死2例;年龄30—65岁,平均51岁,男9例,女2例。结果制备的脐带血干细胞制剂有核细胞计数达(3.8±1.73)×109个,均达到治疗剂量,其中CD34+细胞比率为(1.93±0.54)%,CD105+细胞比率为(97.9±4.0)%。肝硬化失代偿期患者治疗后白蛋白水平逐步升高,1个月后与治疗前相比有明显升高(P<0.05)。肝硬化和股骨头缺血坏死患者经治疗后临床症状均有好转。结论脐带血干细胞移植可为临床多种疾病的有效治疗提供一种新手段。     

不同类型载体携带Math1-EGFP基因对293T细胞转染效率及细胞毒性的研究

目的比较腺病毒、脂质体、纳米材料三种不同类型的载体携带目的基因对293T细胞的转染效率及细胞毒性的大小,筛选理想的基因载体。方法用重组腺病毒、Lipofectamine^TM 2000、Entranster^TM—D纳米材料为转染载体,携带含有增强型绿色荧光蛋白（EGFP）报告基因的Math1-EGFP基因及真核表达质粒pRK5-Math1—EGFP,按照转染试剂盒说明优化其转染条件,分别转染293T细胞。24小时后在共聚焦显微镜下观察转染结果并计数阳性细胞率,采用RT—PCR法检测转染细胞中Math1基因mRNA的表达,用MTT法检测不同转染条件下,不同转染载体对293T细胞的细胞毒性。结果经优化转染条件,重组腺病毒载体转导的细胞中荧光蛋白表达几乎为95％以上,Lipofectamine^TM 2000、Entranste^TM-D纳米材料载体转染的细胞中荧光蛋白表达也分别达到70％和80％以上,而Entranste^rTM-D纳米材料载体在最高转染效率的剂量下仍然保持80％以上的细胞生存率。RT-PCR进一步证实,三种载体转染细胞均有Math1基因mRNA的表达。结论Entranster^TM—D纳米载体作为一种新型纳米聚合物转染试剂,能成功携带内耳基因治疗关键基因Math1基因转染293T细胞,并表现了低毒、高效性能。     

听觉损伤后毛细胞再生与聋病基因治疗策略

听觉损伤可引起耳蜗毛细胞和听觉神经元的不可逆性损伤,从而导致永久性的感音神经性耳聋。虽然内耳所独具的结构是基因治疗非常独特和重要的靶器官,但能否实现损伤后毛细胞的再生是其前提条件。国内外研究者们做了大量的探索并取得重要突破,从非哺乳动物到哺乳动物毛细胞再生,从前庭毛细胞到耳蜗毛细胞再生,从未成熟期到成年期毛细胞再生,从离体培养毛细胞再生到在体毛细胞再生,整整经历了近半个世纪。但是毛细胞的再生并不等同于听力完全恢复。针对内耳基因治疗时间窗问题,我们根据听觉损伤后不同的病理状态,提出听觉损伤后毛细胞再生和基因治疗的基本策略：（1）毛细胞纤毛损伤阶段,是基因治疗的最好时机,通过完全修复或纤毛再生达到功能的完全或部分恢复;（2）内耳毛细胞虽有损伤但没有坏死,支持细胞和神经纤维基本正常,所以有恢复形态和功能的机会,这个阶段导入Math1基因应该有效,是基因治疗的最关键时机;（3）毛细胞严重损伤但支持细胞尚存,是毛细胞再生的抢救阶段,而且还可以争取在Corti器细胞构架没有塌陷之前进行干细胞导入,所以这个阶段内细胞移植可能有效地实现听力恢复;（4）Corti器完全失去构架,仅仅残留上皮层或瘢痕化,基因导入完全无效,即使干细胞导入也会面临困难,如何重塑Corti器构架是巨大挑战。为了实现耳聋基因治疗临床应用的可能性。我们还探索了最有效简便的外源基因内耳导入方式以及高效安全可靠的基因载体比如纳米载体的研发。毛细胞再生研究已经取得突破性进展,但还面临诸多挑战。通过不懈的努力,聋病基因治疗的最终临床应用一定会实现。     

pRb/E2Fs途径在胚胎及内耳发育中的作用

pRb/E2Fs途径是细胞周期的重要调控途径,通过调节各个靶基因的转录来实现.本文对E2F转录因子及上游调节者pRb家族在细胞周期调控、胚胎及内耳发育中的作用及应用前景进行综述.     

骨髓间充质干细胞治疗感音神经性聋的基础研究进展

多种因素引起的内耳毛细胞及与之相连螺旋神经元的受损死亡,产生感音神经性聋。在目前有关治疗的研究中,能否通过细胞移植方法在所需部位定向产生内耳细胞,成为近年来研究热点。本文从骨髓问充质干细胞的生物学特性及在内耳感音神经性聋治疗中的基础研究方面做一综述。     

鼻中隔偏曲矫正术后不同处理方法对患者舒适度的影响

目的比较鼻中隔偏曲矫正术后鼻腔填塞和缝合两种处理方法对患者舒适度的影响。方法 31例鼻中隔偏曲矫正术后患者接受调查,男18例,女13例,平均年龄（31.6±11.2）岁。根据鼻腔处理方式将研究对象分为两组,填塞组20例,缝合组11例。采用疼痛视觉模拟量表（visual analogue scale,VAS）评分进行疼痛评估。使用一条长约10 cm的游标尺,刻度面标有0~10的刻度,请患者标出自己疼痛的级别感受。分值越高,主观疼痛感觉越强烈。总共进行了9个方面的VAS评分。结果缝合组在鼻部疼痛（t=2.152,P=0.040）、头痛（t=4.944,P〈0.001）、疼痛所致流泪（t=4.944,P=0.002）、吞咽困难（t=3.359,P=0.003）、鼻闷胀感（t=3.359,P=0.023）、睡眠时的疼痛感（t=3.225,P=0.004）、生活舒适度（t=3.332,P=0.002）等7个方面的VAS平均得分低于填塞组,出血（t=-0.372,P=0.714）和通气（t=1.522,P=0.144）两个方面的VAS评分在两组间没有统计学意义上的差别。总体VAS评分缝合组显著低于填塞组（P〈0.001）。结论鼻中隔缝合可为患者提供更高的术后舒适度。     

端粒酶活性调控研究进展

端粒（telomere）是存在于染色体末端的一种特殊结构,人和其它脊椎动物的端粒DNA均为（5’-TTAGGG-3’）n,大小5～20kb。每次细胞有丝分裂后,端粒都会缩短,缩短到一定程度后细胞就不可避免的发生衰老死亡。