Waardenburg综合征患者螺旋神经节细胞数量分布特征的分析

目的 本研究旨在研究Waardenburg综合征（Waardenburg Syndrome, WS）患者的耳蜗中螺旋神经节细胞（spiral ganglion neuron,SGN）的数量与非综合征性感音神经性聋（Nonsyndromic sensorineural hearing loss,NS）患者相比是否具有差异,以及耳蜗不同位置之间的数量分布差异。方法 本研究采用横断面研究,收集2000年至2020年间就诊于中国人民解放军总医院行人工耳蜗植入的WS患者,收集患者相关信息,包括植入年龄、植入侧别、植入电极型号以及人工耳蜗植入术中的电刺激复合动作电位（Electrical compound action potential, ECAP）测量数据以及其幅值增长曲线（amplitude growth function, AGF）。为控制植入年龄,植入电极类型等混杂因素带来的偏倚,制定对照组患者纳入标准,通过采用窗函数的计算方式,应用Matlab(R2016a)计算两组中不同刺激电极的slope值。依据刺激电极在耳蜗中的位置,将电极分为近蜗顶组,中间组以及近蜗底组,应用采用t检验比较两组...     

老年及老年前期人工耳蜗植入的临床初步研究

目的 探索人工耳蜗在双耳重度或极重度聋和全聋的老年患者中的临床应用安全性和效果.方法 2008年11月至2009年11月解放军总医院先后对8例50岁以上患者行人工耳蜗植入术,其中男5例,女3例;年龄52～76岁,中位数58岁.所有患者术前均为双侧极重度感音神经性听力损失,佩戴助听器无效或效果不佳.观察患者手术耐受及并发症情况.开机后3个月进行助听听阈评估和言语评估.结果 8例患者手术顺利,术中神经反应遥测均引出反应.术后康复顺利,无任何并发症.开机3个月后声场内言语频率平均助听听阈啭音(听力级)为35～50 dB,但言语测听结果个体差异较大.部分患者单音节、双音节、安静及噪声环境下的句子可实现较好识别率.结论 老年前期及老年患者可耐受全身麻醉状态下的人工耳蜗植入,只要术前准备充分则为安全的手术,但部分病例为中耳炎(胆脂瘤)或颞骨外伤等因素导致,需要特别注意中耳情况.老年重度以上听力损失患者人工耳蜗植入可明显改善言语识别能力.     

负载肝素酶复制缺陷型腺病毒的包装及鉴定

目的包装负载人肝素酶(hpa)全长cDNA的复制缺陷型腺病毒载体(Adhpa)。方法将肝素酶正义腺病毒穿梭质粒pDC315hpa与腺病毒包装质粒pBHGloxDeltaE1,3Cre共转染人胚肾293细胞(HEK293),包装Adhpa,并大量扩增,收集纯化。对纯化后的Adhpa进行滴度测定、感染性鉴定、电镜鉴定及双引物PCR鉴定。结果包装成功的腺病毒载体具有良好的感染性,纯化浓缩后的病毒滴度可达5×1010pfu/ml。电镜证实病毒浓缩液中存在病毒颗粒,并可见病毒在HEK293细胞中复制。PCR双引物鉴定Adhpa可扩增出Ad及hpa特异片段,而对照则不能扩增出hpa片段。结论成功包装了负盘。     

小鼠耳蜗胆碱乙酰化酶免疫反应的定位和分布

大量研究表明,在哺乳动物中,乙酰胆碱(ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅ,ＡＣｈ)是耳蜗传出神经系统的主要递质,但大部分研究只涉及内侧系统。在一些涉及外侧系统的研究中大部分也仅用乙酰胆碱酯酶(ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅｓｔｅｒａｓｅ,ＡＣｈＥ)观察耳蜗传出神经纤维的分布[1]。目前认为ＡＣｈＥ不是可靠的胆碱能神经标记物,而ＡＣｈ合成酶———胆碱乙酰化酶(ｃｈｏｌｉｎｅａｃｅｔｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ,ＣｈＡＴ)被认为是胆碱能神经最特异标记物[1,2]。本研究用免疫荧光法观察ＣｈＡＴ免疫反应在耳蜗中的分布,以确定ＡＣｈ是否为…     

胃癌粘膜基因不稳与染色体端粒长度改变的研究

目的 探讨端粒长度与微卫星不稳定（MSI）和APC/MCC及DCC基因杂合丢失（LOH）的关系。方法 采用Southern杂交检测端粒限制性片段长度;采用PCR为基础的方法对MSI、LOH和移码突变进行分析。结果 68例胃癌中,至少有1个位点发现MSI者17例（25%）。将MSI分为高频率MSI（≥2个位点）8例、低频率MSI（仅为1个位点）9例和MSI阴性51例3组。结果8例高频率MSI中检出TGF-βR Ⅱ移码突变6例,BAX移码突变3例,hMSH6移码突变2例,而低频率MSI和MSI阴性组示见有移码突变者。35例胃癌行TRF分析,其中端粒缩短20例（57.1%）,基本不变12例（34.3%）,延长3例（8.6%）。端粒长度与临床病理参数无关。DCC基因LOH与TRF缩短有关。APC和MCC基因亦有随TRF缩短而LOH率增高的倾向。TRF长度与MSI和移码突变无相关性。结论 胃癌发生涉及二条不同的分子途径。高频率MSI胃癌由于错配修复基因缺陷导致单核苷酸水平突变的积聚和高频率MSI表型,而低频率MSI和MSI阴性胃癌可能涉及LOH病理途径。端粒丢失可能参与了LOH病理途径,而与MSI途径无关。     

人端粒酶蛋白催化亚单位反义基因转染对胃癌细胞恶性表型的逆转作用

目的 探讨人端粒酶蛋白催化亚单位（hTRT）反义基因治疗对胃癌细胞恶性表型的逆转作用。方法 采用基因重组技术,构建hTRT正比、反义真核表达载体,采用脂质体法导入SGC－790细胞、反义真核表达载体,并导入SGC－790胃癌细胞株中,获得稳定表达正、反义基因的细胞系7901－S、7901－AS1和7901－AS2。7901－AS1和7901－AS2出现显著生长抑制现象,端粒酶活性明显下降,细胞凋亡增加,异型性减小,G0／G1期细胞增加,S和G2M期细胞减少,增殖指数减小,软琼脂中克隆形成,裸鼠体内成瘤消失。结论 hTRT反义基因治疗可以明显抑制SGC－7901细胞的增殖,部分逆转肿瘤细胞的恶性表型,其机制可能主要是通过诱导细胞分化而非诱导细胞凋亡途径实现的,提示hTRT基因可以作为肿瘤治疗的靶基因。     

消化道异物并穿孔的危险因素分析及治疗策略

目的 探讨消化道异物的临床和内镜下特点,分析异物引起穿孔的相关危险因素,总结异物引起消化道穿孔的治疗策略.方法 回顾性分析陆军军医大学第二附属医院2014年1月至2021年1月因消化道异物就诊患者的临床资料,总结其临床及内镜下特点.采用单因素和Logistic多因素分析引起异物穿孔的相关危险因素.结果 共有422例患者...     

腹水脱落细胞中肝素酶的表达对良恶性腹水鉴别诊断的价值

肝素酶是近年来发现的能够降解基底膜及细胞外基质的关键酶．具有促进肿瘤细胞向周围组织间隙侵袭的作用。我们前期研究表明，肝素酶在胃癌组织中高表达，能够促进胃癌的血管生成，浸润与转移，是胃癌患者预后不良的一个指标。在腹水脱落细胞中肝素酶是否表达，能否用于鉴别腹水的性质鲜见报道。我们采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测肝素酶在腹水脱落细胞中的表达，探讨肝素酶在良恶性腹水鉴别诊断中的意义。     

胃癌组织c-met蛋白表达的意义及其与微血管密度的关系

目的探讨c-met蛋白在胃癌组织中的表达与胃癌临床病理特征及其肿瘤微血管密度的关系。方法对47例手术切除的胃癌组织采用免疫组织化学法检测c-met蛋白的表达及其肿瘤微血管密度。结果胃癌组织中c-met蛋白表达阳性率为85．1％，c-met阳性率与胃癌肿瘤的直径、有无淋巴结转移、浸润深度、TNM分期、是否有淋巴管及静脉癌栓有关；c-met阳性组胃癌微血管密度高于对照组。结论c-met蛋白的表达促进了胃癌的生长、浸润及转移，并促进胃癌的血管生成，与胃癌预后不良及临床病理特征有重要关系。     

内毛细胞的分离和形态学特点

目的　探讨内毛细胞 (innerhaircells ,IHC)的分离技术和形态学特征。方法　从豚鼠耳蜗制备基底膜活体铺片 ,微分干涉倒置显微镜下用显微分离结合酶消化的方法单离IHC。高倍显微镜下 ,用两个钨丝电极沿IHC和第一排外毛细胞 (outerhaircells,OHC)之间的Corti隧道显微切割 ,游离的IHC团被吸引至玻璃微吸管内。结果　从每只豚鼠耳蜗可分离到 3 0～ 5 0个活性良好的单离IHC ,并存活 2h左右。典型的IHC胞体具有特征性 ,呈梨状或长颈的烧瓶形状 ,胞体中间可见大的圆形细胞核。胞体内包含较多细胞器 ,颗粒状 ,粗糙感。大部分可观察到静纤毛 ( 93 / 98)。静纤毛分布沿表皮板一侧 ,排列呈线状或“C”形。部分细胞可观察到明显狭窄的颈部 ( 61/ 98)。IHC的表皮板一般为倾斜状 ,凹面向上 ,较厚。另外 ,IHC的表皮板通常与细胞胞体长轴成锐角或钝角。豚鼠耳蜗IHC长度为 13～ 3 1μm ,平均 ( 2 2 45± 4 14) μm ( x±s,n =98,下同 ) ;直径为 7～ 15 μm ,平均 ( 11 95±1 5 9) μm。静纤毛长度为 2～ 7 5 μm ,平均 ( 5 2 1± 1 0 0 ) μm。 结论　本研究成功建立一种能够分离到大量的、生物活性好的IHC的技术 ;内、外毛细胞单离后在形态学上的鉴别要点是表皮板 ,尤其是表皮板与细胞胞体长轴的成角特征