胰岛素纳米粒子缓释制剂的实验研究

目的研究胰岛素纳米级粒子缓释制剂的体内生物作用,以期在临床上实现胰岛素注射剂的更长效稳定释放给药治疗糖尿病.方法以聚乳酸-聚乙醇酸共聚物(PLGA)作为基质材料,采用超声乳化/溶剂挥发法制备PLGA包囊胰岛素的纳米级微粒(NP),借助扫描电镜观察微粒形态,通过激光光散射实验测定纳米微粒的粒径分布;利用高效液相色谱(HPLC)测定纳米微粒制剂的载药率;并做纳米胰岛素制剂在糖尿病动物模型体内的药效学研究.结果经电镜观察PLGA-胰岛素NP为表面光滑的球形微粒,粒径分布平均值是112.4nm,呈正态分布;PLGA-胰岛素NP载药率为7.4%;体内研究表明,所制备的纳米制剂生物活性没有改变;皮下注射途径给药纳米胰岛素可以在至少72小时内长效控释,有效降低血糖并保持在正常范围.此外纳米制剂的量-效关系明显,未见任何不良反应.结论PLGA纳米粒子可以作为胰岛素的有效载体,达到更长效稳定控制释放的目的,发挥药物更佳的降糖作用.     

IL-10、ALDH_2的单核苷酸多态性与原发性肝细胞癌遗传易感性的研究

目的探讨白细胞介素-10(IL-10)和乙醛脱氢酶2(ALDH2)的10个单核苷酸多态性(SNP)与天津地区汉族人原发性肝细胞癌(HCC)易感性的相关性。方法研究用从外周血血凝块及肝组织中提取的基因组DNA、肝组织提取总RNA的逆转录产物作为扩增模板,应用聚合酶链式反应、寡核苷酸基因芯片杂交的方法对115例天津地区汉族人IL-10启动子区3个多态位点(-1082A／G、-829T／C、-592A／C)等位基因和基因型频率进行分析,慢性乙型肝炎、肝硬化、健康对照各30例,HCC25例。HCC组和健康对照组同时进行了ALDH26个多态位点(rs1064933、rs671、rs11066025、rs7397491、rs2158028、rs2106696:前2个位于外显子区域,后4个位于内含子区域)的分析。另外,对于肝癌组还分析了两种基因包括ALDH2 rs1062136 A／T在内的10个多态位点的基因型在肿瘤组织及正常肝组织(手术切缘)中是否存在差异。应用卡方检验比较各组问的等位基因和基因型频率,分析等位基因及基因型与HCC及肝病的相关性。     

半定量RT-PCR检测9个基因在肝癌中的差异表达

目的对AFP、COL1A2、UBD、FOXM1b、GPC3、SPINT2等6个高表达基因和DLC-1、WWOX、IGFBP3等3个低表达基因在肝癌和癌旁不同距离组织中的表达进行研究,以确定从癌组织逐渐向正常组织的过渡过程中,这些基因的表达是否存在趋势性变化,以及这些基因的表达与临床病理特征之间是否存在联系。方法收集肝癌手术标本并保存于-80℃;从肝癌及其对应的癌周组织中提取mRNA,然后应用RT-PCR技术对9个基因进行扩增,PCR产物行凝胶电泳;最后用电泳条带灰度分析软件对9个基因的表达情况进行半定量分析。     

聚酸酐-吡柔比星长效植入剂在动物模型体内的抑瘤活性

背景:实验证明聚酸酐-吡柔比星植入剂可长时间保持体内血药浓度相对恒定。目的:观察聚酸酐-吡柔比星植入剂在膀胱肿瘤大鼠体内的抑瘤作用。方法:通过N-正丁基-N-(4-羟基-丁基)亚硝胺喂饲构建SD大鼠膀胱癌模型,随机分为实验组与对照组,分别将聚酸酐-吡柔比星植入剂和相同剂量吡柔比星植入模型动物体内膀胱黏膜下,用高效液相色谱仪检测动物体内吡柔比星血药浓度及肿瘤大小变化。结果与结论:实验组吡柔比星在释放过程中无突释效应,基本满足长效局部植入剂应用于膀胱癌治疗的基本要求,可持续释放80d以上;对照组吡柔比星浓度开始明显升高,5d后迅速降低,不能维持有效治疗浓度1.0-3.0mg/L。植入后30d,实验组肿瘤体积较植入前明显缩小,抑瘤率高于对照组(P<0.05),且实验组动物平均存活期长于对照组(P<0.05)。     

全反式维甲酸-聚酸酐长效缓释剂研制及可行性分析

目的：以可生物降解高分子材料聚酸酐(Polyanhydrides,PAD) 作载体,包埋全反式维甲酸（ATRA）,研制长效缓释微球ATRA-PAD肿瘤治疗剂。建立高效液相色谱法(HPLC)测定体系,以检测缓释治疗剂中ATRA含量,探讨体内外ATRA经时缓释变化规律。方法：采用乳剂一扩散溶剂挥发法制备维甲酸长效缓释微球ATRA-PAD肿瘤治疗剂,扫描电镜检测微球外观及微球粒径,HPLC检测微球载药量、包封率及体内外释药量。结果：所制治疗剂微球光滑圆整,大小均一,平均粒径：(154．42?6.76) nm,载药率：(16.52?1.45)％,包封率：(87.84?.79)％;体外释放实验证明该微球治疗剂可持续释放ATRA约50天,将其肌肉注射到大耳白兔体内,可稳定缓释ATRA近约45天。结论：ATRA-PAD治疗剂制备工艺合理,载药量及包封率均较高,体内外释药释药平稳并且具有明显的长效缓释作用。     

肝细胞癌多基因甲基化异常及其临床意义

目的 探讨肝细胞癌中多基因甲基化异常的发生率,研究肝细胞癌中多基因甲基化异常的临床意义.方法 收集60例肝细胞癌及相应的癌旁组织、16例肝炎后肝硬化组织、5例慢性肝炎和5例正常肝组织,筛选消化道肿瘤中APC、RASSF1A、p16、GSTP1、MGMT、DAPK、SOCS-1和RIZ18个甲基化异常频率高的肿瘤抑制基因,应用甲基化特异件聚合酶链反应(MSP)检测8个肿瘤抑制基因在所有标本中的甲基化状态.比较不同基因甲基化与非甲基化肝细胞癌患者的临床病理特征和生存情况.结果 肝细胞癌组织中,RASSF1A、APC、GSTP1、p16、RIZ1和MGMT基因的甲基化率分别为95.0%、90.0%、73.3%、65.0%、61.6%和60.0%,均高于相应的癌旁组织(均P＜0.05);癌旁组织中,MGMT、GSTP1和RIZ1基因的甲基化率分别为41.6%、40.0%和25.0%,均高于肝硬化组织(均P＜0.05).p16基因甲基化的肝细胞癌患者的平均年龄大于非甲基化者;巨块性肝细胞癌中,MGMT基因甲基化者的比例高于非甲基化者;MGMT基基甲基化者的无瘤生存期短于非甲基化者.结论 不同基因在肝细胞癌、癌旁和肝硬化组织中的甲皋化率差异显示了肝细胞癌发生中渐进的表观遗传学改变;GSTP1、RIZ1和MGMT基因的甲基化异常具有肿瘤风险评估和早期诊断价值,而MGMT基因的甲基化异常同时具有预后评估价值.     

肝癌冷冻术围手术期并发症分析

肝癌冷冻治疗是一项新技术，在治疗肝癌中已取得了一定的作用。我院自１９９５年３月至２００１年３月应用英国LCS－２０００型冷冻治癌机治疗肝癌患者５３例，现将围手术期出现的并发症报告如下。１材料与方法１．１临床资料５３例患者，男４６例，女７例；年龄３５～７２岁，中位年龄５３．５岁。原发性肝癌４７例，继发性肝癌６例。其中乙肝表面抗原（HBsAg）阳性３４例，甲胎球蛋白（AFP）阳性３５例。单纯冷冻治疗１４例，肝癌切除结合冷冻治疗３９例。１．２治疗方法在静脉复合麻醉下行右侧或双肋缘下斜切口，术中B超检查肝内癌灶…     

冷冻技术在原发性肝癌治疗中的应用

手术切除是目前治疗原发性肝癌最有效的方法 ,然而切除率仅为 2 5 % ,姑息性切除即使与放疗及全身化疗配合 ,疗效仍较差〔1〕。液氮冷冻治疗已成为治疗原发性肝癌的方法之一 ,尤其为不能切除的肝癌提供了一种新的治疗途径〔2〕。甚至有学者认为冷冻治疗可以达到与手术切除类似或相近的效果〔3〕。我院于 1998年 4月至 2 0 0 0年 4月应用冷冻技术治疗原发性肝癌 6 0例 ,报告如下。资料与方法1.一般资料 :本组 6 0例 ,男 4 1例 ,女 19例 ,年龄 38～ 74岁 ,平均 5 2岁。全部病例术前常规检查肝功能、ＡＦＰ、肝炎标志物 ;经肝脏Ｂ超、ＣＴ、Ｄ…     

人脐带间充质干细胞体外长期培养及向肝样细胞的分化

目的：观察人脐带间充质干细胞体外长期培养的生物学特性,探讨其向肝样细胞分化的可能性。 方法：脐带来源于天津市第三中心医院住院的健康足月产妇,采用酶消化法分离培养人脐带间充质干细胞,待细胞生长至80%~90%融合时传代。取传至第9代细胞接种于12孔板内,调整细胞浓度为5×1010 L-1,加入含肝细胞生长因子、成纤维生长因子4、抑瘤素的DMEM培养基,诱导28 d。MTT法测定细胞生长活性,流式细胞仪检测细胞周期,免疫细胞化学及流式细胞仪鉴定细胞表型;免疫细胞化学染色鉴定诱导后肝细胞特异表面标志物的表达,以及糖原染色结果。 结果：从人脐带中分离得到的间充质干细胞贴壁生长,形态类似于成纤维细胞,80%以上处于G0/G1期,具有良好的生长活性,可在体外稳定传代20次以上;CD29,CD90,CD105,Vimentin呈阳性表达,基本不表达造血细胞标志CD34和内皮细胞标志CD31。随诱导时间的延长,圆形细胞逐渐增多,形态似肝细胞;诱导1周时细胞开始表达肝细胞表面标志物甲胎蛋白、细胞胶蛋白18、细胞胶蛋白19;诱导3周时开始表达成熟肝细胞标志白蛋白;诱导4周时白蛋白表达增强,且诱导细胞糖原染色呈阳性。 结论：从人脐带中可成功分离出间充质干细胞,实现体外长期培养,并可诱导分化为肝样细胞。     

对病人选医生中几个问题的看法

我院自 1998年起实行“病人选医生”赢得了广大患者的满意、政府各有关部门的满意以及我们医院广大医务人员的满意[1 2 ] 。然而最近一段时间 ,我们不断从媒体看到对此的一些不同看法。现根据我们两年多来的实践和体会 ,浅谈几点看法 ,供同道们探讨、商榷。一、病人选医生的实质是分配和用人机制的变革 ,是人们思想观念的转变 ,而不是做表面文章病人选医生是一个实践性非常强的工作 ,要认真考虑其实质问题以及操作时的规则和各个环节上的处理问题 ,而不能仅仅当作一种形式。二、病人选医生有别于点名专家手术和门诊首先 ,病人点名专家手术、…