微重力反应器在细胞培养中的应用

目的:微重力培养技术是一种新兴的培养技术,可用于组织工程、细胞培养等多个领域。介绍微重力反应器模拟微重力环境用于细胞培养。资料来源:应用计算机检索PubMed1995-01/2002-06的文章,检索词为“microgravity,simulatedmicrogravity,bioreactor,tissueengineering,cellculture,Rotatingcellculturesystem”,限定文章语言种类为English。资料选择:纳入标准:①模拟微重力下细胞培养的研究。②微重力组织工程学的研究。③随机对照实验研究。④微重力环境的创建。排除标准:①较陈旧的文献。②重复研究。资料提炼:共收集到288篇与脊髓损伤修复相关的文献,其中19篇符合纳入标准,排除的269篇文章系同一类重复性研究。资料综合:①模拟微重力培养有其独特的特点和实用性:避免湍流形成的过大剪切力;培养液通过旋转逐渐混合;零顶空间;贴壁依赖性细胞可在载体上生长;提供充分氧合作用。②微重力环境下细胞的生长:细胞易于聚集,产生更高的细胞密度。③微重力反应器可以建立动物细胞的三维培养体系,达到满足器官替代物,或体外研究的要求。④通过微重力反应器所构建的三维组织结构中可产生血管样管状结构,用于产生组织工程学的血管管道。⑤需要解决的问题:微重力反应器所构建的三维结构一旦离开微重力环境,其功能能否长期保持,或移植整合到宿主组织后仍保持不变,尚需进一步研究。结论:模拟微重力培养是一种全新的组织培养技术,其核心技术是建立动物细胞的三维培养体系,可以为多种细胞和组织块的生长和代谢提供良好的培养环境,可以进行高密度的组织培养,并保持所培养细胞的组织分化特异性。     

白藜芦醇北大核心CSCD

白藜芦醇（resveratro1）是含有芪类结构的非黄酮类多酚化合物,广泛存在于葡萄、松树、虎杖以及花生等天然植物及果实中,是植物受到生物或非生物胁迫（如真菌感染、紫外照射等）时产生的一种植物抗毒素。     

代谢综合征患者甘油三酯水平与血清多不饱和脂肪酸的相关性

目的 研究代谢综合征（MS）患者血脂与血清多不饱和脂肪酸（PUFA）的相关性.方法 选取2011年6月至2012年6月绍兴市人民医院住院控制血糖的74例代谢综合征患者,以同期门诊体检的62例为正常对照,采用酶法测定血脂,高效气相色谱法测定血清磷脂脂肪酸谱组分,并计算血清PUFA百分含量.结果 MS组甘油三醋（TG）水平明显高于对照组[（2.0±0.8） mmol/L比（1.3±0.5）mmol/L,P=0.000].MS组n-3 PUFA百分含量（9.8％±2.2％比11.1％±2.4％,P =0.002）、n-6 PUFA百分含量（35.4％±6.7％比39.5％±7.8％,P=0.009）、总PUFA百分含量均明显低于对照组（45.2％±8.9％比50.6％±10.1％,P=0.000）.相关性分析显示TG浓度水平与n-3 PUFA、总PUFA百分含量呈负相关（r=-0.42,P=0.008;r=-0.23,P=0.013）.结论 MS患者n-3 PUFA、n-6 PUFA、PUFA明显低于健康对照,其血清TG水平与血清PUFA呈负相关.     

α-Klotho在肾性甲状旁腺功能亢进患者甲状旁腺组织中表达的研究

目的 探讨甲状旁腺α-Klotho蛋白在肾性甲状旁腺功能亢进发生、发展中的作用。方法 入选14例因尿毒症伴甲状旁腺功能亢进而在中日友好医院行甲状旁腺切除术的患者,并收集增生的甲状旁腺50枚;5例甲状腺癌患者因甲状腺手术而连带切除的甲状旁腺5枚作为对照组。用免疫组织化学染色法检测甲状旁腺α-Klotho蛋白的表达水平。结果 与正常甲状旁腺相比,增生的甲状旁腺α-Klotho蛋白表达显著减少(30.3% VS 9.9%),且随着甲状旁腺病理程度的进展而进一步下降(弥漫性增生12.2%,结节性增生10.1%,腺瘤样增生8.2%)。结论 尿毒症患者增生的甲状旁腺α-Klotho蛋白表达明显减少,可能在肾性继发性甲状旁腺功能亢进的发生、发展过程中起重要作用。     

微小切口联合泡沫硬化剂注射与传统手术方法治疗大隐静脉曲张的对比研究

目的 探讨微小切口联合泡沫硬化剂注射治疗大隐静脉曲张的安全性、可行性及优越性.方法 回顾分析97例（109条肢体）大隐静脉曲张患者的临床资料,其中34条肢体实施了微小切口联合泡沫硬化剂注射治疗（治疗组,n=34）,75条肢体采用传统的大隐静脉高位结扎剥脱术治疗（对照组,n=75）,比较2组患者的手术时间、出血量、切口数量、切口长度、住院时间、并发症、术后复发率.结果 治疗组的手术时间、住院时间短于对照组[（35.3±6.5）min、（4.0±0.8）d vs （85.4±7.9）min、（7.0±1.2）d];治疗组的出血量、切口数量少于对照组[（20.8±3.2）mL、2.3±0.3 vs （67.9±15）mL、6.8±2.4];治疗组的切口总长度短于对照组[（1.8±0.4）cm vs （13.2±3.7）cm].治疗组术后2周及术后2个月的慢性静脉功能不全生活质量调查表评分均优于对照组[（78.8±9.4）分、（90.1±8.5）分 vs （66.8±10.6）分、（74.0±11.6）分].结论 微小切口联合泡沫硬化剂注射能一次性治疗大隐静脉曲张,既能完全剥除曲张的大隐静脉主干,又能对曲张的静脉属支进行彻底性的治疗,并能充分体现微创外科的优点;既能治疗疾病,又能达到更小的创伤,并能保持体表美观等特点.     

抑制视网膜色素上皮细胞发生上皮-间充质转化的研究进展

视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium,RPE)的上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)是增殖性玻璃体视网膜疾病(proliferative vitreoretinopathy,PVR)的主要发病机制,也是治疗脉络膜新生血管(choroidal neovascularization, CNV)时,造成抗血管内皮生长因子(anti-vascular endothelial growth factor, anti-VEGF)疗效降低的重要因素。除此之外,随着细胞替代治疗作为年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration,ARMD)的新型治疗方式而兴起,人类胚胎干细胞(hESC-RPE)、体细胞诱导多能干细胞(iPSC-RPE)定向诱导分化的RPE细胞以及来自于流产胎儿的胎儿视网膜色素上皮细胞(fetal RPE,fRPE)逐渐受到了研究者们的关注。为了发挥最好的治疗效果,保证治疗用细胞的稳定增殖及高效分化是极其重要的。但是在传代扩增的过程中,由于上皮间充质转化的存在,导致这些细胞出现增殖困难以及再分化能力下降,从而影响治疗效果并阻碍了治疗人群的普及,使细胞替代治疗难以推广。所以,鉴于上皮间充质转化在视网膜疾病的发生和治疗中都造成了重要影响,抑制视网膜色素上皮细胞发生上皮间充质转化就显得尤为重要,为此,我们将阻止上皮间充质转化研究的最新进展综述如下。     

载体腹腔内肝细胞移植

目的肝细胞移植可替代部分肝细胞功能及介导基因治疗。腹腔肝细胞移植操作简便,损伤小,但除脾脏、门静脉外,其他部位移植肝细胞不易存活。作者介绍一种用聚羟基乙酸－胶原载体腹腔内移植同种异体肝细胞的方法。方法将聚羟基乙酸纤维制成直径１ｃｍ的棉絮状,浸入提纯的鼠尾胶原２４小时;用胶原酶灌注收获ＳＤ大鼠单肝细胞,以８×１０／ｍｌ细胞浓度植入胶原铺底的Ｃｏｓｔａｒ　５０ｍｌ斜口瓶与聚羟基乙酸－胶原载体培养９６小时,构建聚羟基乙酸－胶原载体粘附肝细胞。移植入４０％肝切除Ｗｉｓｔａｒ大鼠的大网膜内。分别于术后２周、４周、２月处死大鼠,取移植部位病检。移植２月肝细胞用异硫氢肥分离细胞总ＲＮＡ,人工合成白蛋白,Ｐ４５０ｂ寡核苷酸探针行Ｎｏｒｔｈｅｍ杂交。结果肝细胞移植后２周至２月均在网膜移植部位发现肝细胞团,４周时已呈索状排列,肝细胞团周边可见细胞核大的新生细胞,并有分裂相。ＰＡＳ染色这些肝细胞内有糖原颗粒。这些移植入的肝细胞均有白蛋白,Ｐ４５０ｂ的ｍＲＮＡ表达。结论利用聚羟基乙酸－胶原载体粘附的肝细胞腹腔内移植易于存活并保持其特异基因表达,参与机体糖、蛋白代谢和生物转化功能。     

球体培养人、猪肝细胞：一种理想的体外生物人工肝模式

体外培养的肝细胞有多种临床用途〔１〕。其中将肝细胞置入特殊的生物反应器,构建生物人工肝（ｂｉｏａｒｔｉｆｉｃｉａｌｌｉｖｅｒ,ＢＡＬ）支持系统有重要的临床价值。有研究报道,细胞聚集成多细胞的球体（ｓｐｈｅｒｉｏｄ）更类似于体内条件;并且可在有限的容积内高密度地培养肝细胞〔２〕。因此,我们实验构建人、猪肝细胞球体,并比较肝细胞普通培养与球体培养蛋白分泌功能的变化。１．材料和方法：试剂：Ｄｕｂｅｃｃｏ′ｓ磷酸盐缓冲液;Ｈａｎｋ′ｓ平衡盐;ＩＴＳ（胰岛素,运铁蛋白和硒,ｉｎｓｕｌｉｎ,ｔｒａｎｓｆｅｒ…     

肝细胞的低温储存

肝细胞移植和应用体外培养肝细胞生物人工肝支持在大量的动物实验和一些有限的临床实验中获得良好的效果,成为有前途的肝病治疗途径。但基于肝细胞的这些治疗方法在进入临床前仍然有许多问题需要解决。其中之一为肝细胞的低温贮存。若有一实用可靠的低温储存技术,建立一个肝细胞库,危重患者随时都能得到大量高活率、有功能的肝细胞;肝细胞移植和生物人工肝技术就能普遍推广。目前较好的肝细胞低温储存液仍为肝器官保护液ＵＷ液,价值昂贵、较长期储存肝细胞的效果也不理想。我们研制一种建立于肝细胞培养基基础上的新型肝细胞低温保存液…     

蒲参益智胶囊治疗脑卒中后遗症的临床及机理研究

目的：探讨中药蒲参益智胶囊对脑卒中后遗症的作用及机理。方法：临床采用随机对照的方法，观察蒲参益智胶囊对脑卒中后遗症肢体活动功能，语言功能及思维记忆功能等的影响。实验研究采用灌有法，观察不同剂量对小鼠血清LPO，SOD含量，小鼠脑组织SOD和MDA含量，胸腺和脾脏指数，耐缺氧时间，脑缺氧神经症状，脑缺氧梗死灶及免疫功能等的影响。结果：临床观察组患者的各项功能有明显改善，与对照组比较差异显著（P＜0．05）。实验结果表明，不同剂量灌胃组小鼠的各项观察指标均有显著改善（P＜0．05）。结论：蒲参益智胶囊可明显改善脑卒中患者肢体活动，语言功能和记忆力等，其机理在于改善脑缺血，促进新生毛细血管增生，提高耐缺氧能力和增强免疫能力等。