固定剂和固定时间对石蜡包埋组织RT-PCR检测病毒RNA的影响

目的 探讨固定剂及固定时间对石蜡包埋RNA病毒感染组织中RNA降解及标本病理形态学的影响。方法 取汉坦病毒76～118株接种的乳鼠感染组织，以沉淀脱水类固定剂100％甲醇、75％乙醇、100％，丙酮以及醛类固定剂4％的多聚甲醛磷酸缓冲液(PFA)、10％，福尔马林共5种固定剂，在室温下固定病毒感染组织6h、12h、24h和48h后，将各种方式固定后的病毒感染组织标本进行石蜡包埋，组织包埋块在室温下保存1年～1.5年，然后进行切片HE染色，镜下观察各种固定剂对组织病理形态学的影响。各种方式固定后石蜡包埋组织中以RT-PCR扩增出不同片段长度的病毒RNA及β-acfin RNA序列，以判断各种固定方式对病毒RNA和细胞总RNA降解的影响。每种固定方法对RNA的影响是通过获得产物最大长度或对长片段扩增的可重复性及假阴性结果的多少来反映。结果 病理切片结果显示，经10％福尔马林和4％PFA固定的石蜡切片，组织结构完整清晰，组织经其他三种沉淀脱水类固定剂固定后有不同程度收缩，但不影响组织病理形态学检测，其中甲醇固定的收缩程度最小。从固定后石蜡包埋组织中提取RNA进行RT-PCR扩增时，扩增的效果受固定剂类型和固定时间的影响，同时也受扩增的基因片段长度的影响。在可达到固定作用的前提下，同一固定剂固定时间越短，RT-PCR扩增结果越稳定；采用相同的固定时间从甲醇、乙醇及丙酮等沉淀类固定剂固定后石蜡包埋的病毒组织中扩增出病毒RNA的阳性结果比醛类剂高，可重复性好。尤其在进行长片段扩增时，在沉淀类固定剂固定的标本中出现假阴性现象比醛类固定剂固定的标本少。各种沉淀固定剂之间无明显区别。结论 从固定后石蜡包埋组织标本中用RT-PCR检测病毒RNA进行回顾性研究是可行的，但受固定剂类型及固定持续时间的影响。临床在对存档的石蜡包埋组织作回顾性研究，解释其PCR阴性结果时，有必要考虑其组织标本固定对RNA分子的影响这一因素。     

非霍奇金淋巴瘤血清90K/Mac-2BP水平的测定及临床意义

背景与目的：90K／Mac-2BP是-种分泌性糖蛋白，有研究报道在-些肿瘤血清90K／Mac-2BP水平升高与肿瘤预后有关。本研究分析90K／Mac-2BP作为非霍奇金淋巴瘤（non-Hodgkin’s lymphoma，NHL）肿瘤标志物的临床价值。方法：采用酶联免疫吸附（ELISA）的方法测定30例正常人、160例（30例缓解、30例复发以及100例初治）NHL患者血清90K／Mac-2BP水平，分析90K／Mac-2BP在NHL患者不同疾病时期（初治治疗前、缓解、复发治疗前）血清水平的差异，以及初治治疗前NHL患者血清90K／Mac-2BP水平和临床病理特征之间的关系：结果：初治组治疗前、复发组治疗前血清90K／Mac-2BP的水平高于正常组和缓解组，差异具有显著性（P〈0．05），初治组治疗前和复发组治疗前血清90K水平无显著性差异（P〉0．05），正常组和缓解组血清90K／Mac-2BP差异也无显著性（P〉0．05）；初治治疗前NHL患者血清90K／Mac-2BP水平与年龄、性别、病理分型、体力状态、临床分期、IPI、LDH、骨髓侵犯以及有无巨大包块均无相关性（P〉0．05）。结论：血清90K／Mac，2BP水平住NHL不同疾病时期有差异，能否成为NHL的一个肿瘤标记物还需进-步研究。     

羟基喜树碱纳米微球的制备及体内外释药特性

目的:制备载羟基喜树碱(HCPT)的聚乙二醇-聚谷氨酸苄酯(PEG-PBLG)纳米微球并研究其体外释药特性和体内药代动力学。方法:采用超透析法制备HCPT/PEG-PBLG纳米微球,扫描电镜观察纳米微球的形态,紫外分光光度法观察其体外的释药特性,高效液相色谱法(HPLC)检测并比较HCPT和HCPT/PEG-PBLG纳米微球在兔体内的药代动力学行为。结果:HCPT/PEG-PBLG纳米微球呈核-壳型结构,中间载药库大小约200nm,周围亲水区域厚度约30nm,其载药量和包封率分别为7.5%和56.8%,体内外释药均呈突释-缓释模型。HCPT和HCPT/PEG-PBLG纳米微球的主要药代动力学参数为:t1/2β分别为4.5和10.1h,Cmax分别为2627.8和1513.5μg·L-1,Vd分别为7.3和20.0L,AUC分别为2459.0和2175.9μg·h·L-1。结论:羟基喜树碱纳米微球具有缓释、长循环并增加对组织的亲和性。     

5氟尿嘧啶持续静脉滴注与小剂量顺铂联用治疗晚期胃癌53例

[目的]观察持续静脉滴注5氟尿嘧啶 (5 Fu)与小剂量顺铂 (DDP)联合应用治疗晚期胃癌的近期疗效及毒性。[方法]治疗组53例患者接受5 Fu350mg/m2·d ,持续滴注28～30天 ,DDP5mg/m2·d ,每周应用5天 ,连续应用4周的联合化疗方案化疗2个周期 ,对照组53例采用FAM/FMP(5 Fu+MMC +ADM/DDP)方案 ,治疗两个周期 ,常规剂量给药。[结果]治疗组完全缓解 (CR)0例 ,部分缓解 (PR)32例 ,近期总有效率 (CR +PR)60.37 % ,对照组CR0例 ,PR21例 ,总有效率39.62% ,两组差异具有显著性 ,常见毒副反应如骨髓抑制及恶心、呕吐的发生率对照组明显高于治疗组。[结论]FP方案治疗晚期胃癌 ,近期疗效肯定 ,毒副反应低     

氟脲嘧啶药物敏感性与基因多态性研究进展

基因表达谱的显著差异是指导肿瘤个体化治疗的基础,已有多种抗肿瘤药物通过检测相关分子及其基因多态性来预测患者对相应药物的敏感性和毒性.氟脲嘧啶(5-FU)是最常用的化疗药物,与其它药物组成了多种有效的化疗方案.胸苷酸合成酶(TS)、二氢吡啶酶(DPD)、乳清酸磷酸核糖基转移酶(OPRT)等分别作为5-FU合成代谢和分解代谢的关键酶,在5-FU的作用途径中起着重要的作用,其基因的多态性与5-FU的疗效和毒性密切相关.     

红斑性肢痛症流行与埃尔尼诺现象的独特效应

近年来出现的显著性的埃尔尼诺现象(Elnino)及其长期气候与天气变化对人类社会造成的影响已引起气象学家的广泛关注。1987年我国大部分地区受到埃尔尼诺现象的影响,湖北省出现倒春寒,2至3月发生罕见的红斑性肢痛症(Erythromelalgia)流行。本文着重探讨影响流行的因素,并对该病发生与埃尔尼诺现象的关系进行研究。     

半成品细菌总数测定初探

在“浇碟法”的基础上,采用“营养琼脂培养基”作半成品的细菌总数测定,可缩短测定周期,及时提供参考数据。“营养琼脂培养基”是上海市医学化验所按“肉汤琼脂”配方生产的生化试剂,有较大的实用价值。配制方便、洁净澄明,观察细菌较清晰。在同样环境(同一培养箱内),同等条件(37℃),半成品的细菌生长较TTC培养基快得多。一般在16hr可观察计数,并提供参考数据;24hr则将菌检计数发出报     

关于无黄疸型传染性肝炎诊断中几个问题的探讨

本病由于病毒尚未分离成功,缺乏免疫学的诊断方法,因此对本病各型各期的病理生理机制、诊断、治疗及预防等均存在问题,尤其无黄疸型传染性肝炎发病率高,临床表现多不典型,诊断不易,因之综合性的诊断显得十分必要。1959年全国传染病学学术会议制定了本病的诊断标准,通过实践证明如能正确加以运     

鼻部大汗腺腺瘤一例

患者男,64岁,发现鼻尖右侧肿物7年.查体:鼻尖右侧近肤色光滑类圆形肿物,质中,直径约1.5～2.0 cm,无触痛,无渗出.患者7年前发现鼻尖右侧肿物,绿豆大小,无疼痛及渗液,当地医院给予手术治疗,术后病理为"皮脂腺瘤".半年后在同一部位又长出类似肿物,且逐渐增大,无疼痛及发痒,无破溃及渗出.2008年1月在我院用高功率CO:     

缝隙连接蛋白Connexin与内耳发育的关系

缝隙连接细胞间通讯（gap junction intercellar communication，GJIC）是细胞间进行直接信息物质交换的通道，它在组织的生长发育、维持细胞间的协调稳定方面起着重要的作用。内耳组织中的细胞缝隙连接系统被认为是听觉功能正常发育和维持的重要结构之一，形成这种连接的离子通道的膜蛋白称为Connexin（Cx）。已发现在内耳表达的连接蛋白有Cx26、Cx29、Cx30、Cx31、Cx32、Cx43和Cx45。不同的连接蛋白在内耳发育过程中有不同的分布及表达特征，本文将有关这一方面的研究进展进行综述。