脊柱移行椎X线定位方法及诊断技巧

目的:探索脊柱移行椎的定位方法及诊断技巧,以便诊断时表述的统一。方法:对移行椎患者进行全脊柱透视或摄片,观察移行椎来源,并复习脊柱解剖特点及颅侧移行与尾侧移行特点及文献资料,规范统一表述的标准及诊断技巧。结果:脊柱各段椎节总数为33个,第一颈椎没有椎体和棘突,呈环形。第二颈椎的椎体向上伸出齿状突,棘突较大。第7颈椎棘突特别大。腰1椎骨横突最短,腰3横突粗大最长,腰4横突上翘且短而窄,侧位最突。腰5横突最宽。以此为标志,观察脊柱各段椎体的数目,判断脊椎各段上化与下化的问题的定位及诊断技巧。结论:根据脊柱的解剖特点,颅侧移行与尾侧移行的特点,依此规范脊柱上化与下化的问题及颅侧移行与尾侧移行的诊断问题,统一平片的诊断表述及诊断技巧,方法简单,准确可靠。     

急性心肌梗死溶栓再通后心力衰竭的危险因素

目的：探讨急性心肌梗死溶栓再通后住院期间发生心力衰竭的危险因素。方法选取我院住院的急性ST 段抬高型心肌梗死(STEMI)溶栓再通后的患者130例,根据住院期间是否发生心力衰竭,分为心力衰竭组31例和非心力衰竭组99例。比较两组患者一般临床特征、危险因素、血压、白细胞计数(WBC)、肌钙蛋白(cTnI)、生化指标、心肌梗死面积(MIA)、左心室射血分数(LVEF)、B 型脑钠肽(BNP)等相关指标,分析 STEMI 患者溶栓再通后住院期间发生心力衰竭的因素。结果2组间年龄、糖尿病史、发病到血管再通时间、收缩压、前壁心肌梗死及广泛前壁心肌梗死比例、MIA、血糖、cTnI、WBC、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、LVEF、BNP 比较,差异具有统计学意义(P <0.05)。发病到血管再通时间延长(OR =4.402,95% CI =1.565~12.382)、收缩压升高(OR =1.095,95% CI =1.019~1.175)、高血糖(OR =2.132,95% CI =1.127~4.033)、高 cTnI(OR =1.352,95% CI =1.031~1.773)、GGT 升高(OR =1.182,95% CI =1.204~1.365)、高 MIA(OR =1.656,95% CI =1.162~2.360)是 STEMI 溶栓再通患者住院期间发生心力衰竭的危险因素。结论发病到血管再通时间延长、收缩压升高、高血糖、高 cTnI、GGT 升高及高MIA 是 STEMI 溶栓再通患者住院期间发生心力衰竭的危险因素。     

非小细胞肺癌肿瘤微环境中IFN-γ、TGF-β1、IDO表达变化及其相关性

目的:探讨不同分期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)肿瘤微环境中IFN-y、TGF-β1和吲哚胺-2,3-双加氧酶(indoleamine-2,3-dioxygenase,IDO)表达的变化及IFN-γ、TGF-β1表达与IDO表达的相关性.方法:选取2013年1月至2015年6月间昆明医科大学第一附属医院胸外科手术切除或纤维支气管镜取得的107例NSCLC患者肿瘤组织(实验组)和19例肺部外伤患者的正常肺组织(对照组)进入研究,实验组按2010年AJCC第七版肺癌分期标准分为4组:1组,I期患者28例;2组,Ⅱ期患者26例;3组,Ⅲ期患者28例;4组,Ⅳ期患者25例.ELISA法检测组织中IFN-y 、TGF-β1、IDO蛋白浓度;免疫组化染色检测组织中IDO表达水平;分析IFN-γ、TGF-β1浓度与IDO浓度的相关性,分析肺癌组织中IDO、IFN-γ和TGF-β1表达间的相关性.结果:与对照组相比,Ⅰ期NSCLC组织中IFN-γ的浓度显著升高(P＜0.05),而Ⅲ、Ⅳ期组织中IFN-γ浓度显著降低(P＜0.05),并且Ⅳ期浓度显著低于Ⅲ期(P ＜0.05);IDO浓度变化与TGF-β1相似,在Ⅰ期NSCLC肿瘤组织中的浓度与正常肺组织无显著差异(P＞0.05),但在Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期肿瘤组织中浓度显著高于正常肺组织(P＜0.05),且随分期升高而升高.Pearson相关分析显示,正常组织、Ⅰ期NSCLC肿瘤组织中IDO的浓度与IFN-γ浓度呈正相关(r=0.969,P＜O.01;r =0.853,P＜O.01),与TGF-β1无相关性.但Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期肿瘤组织中IDO的浓度与TGF-β1浓度呈正相关(r=0.678,P＜0.01;r =0.810,P＜0.01;r =0.630,P=O.01),与IFN-γ无相关性.结论:早期NSCLC患者免疫微环境中IFN-y增高,但随着疾病进展,患者免疫力降低,IFN-γ表达减少,IDO、TGF-β1表达增加,早期IDO表达可能与IFN-γ有关,而晚期则可能与TGF-β1有关.     

人乳腺癌细胞特异性多肽跨膜转导机制初步研究

目的:初步探讨人乳腺癌细胞MDA-MB-231特异性多肽PI的跨膜转导机制。方法:合成PI肽链,并在其N端进行FITC标记;探讨FITC-PI的跨膜转导与MHC-Ⅰ表达的关系,利用MHC-Ⅰ抗体阻断MDA-MB-231细胞和Calu-1细胞表面MHC-Ⅰ抗原,聚合酶链反应-序列特异性引物法进行基因分析;探讨FITC-PI的跨膜转导是否与小窝蛋白介导的内吞有关,抑制剂制霉菌素与MDA-MB-231细胞共培养,荧光显微镜观察以及流式细胞仪检测细胞内FITC-PI分布情况;探讨FITC-PI跨膜转导是否与2株细胞表面相同的膜蛋白有关系,膜蛋白提取试剂盒分别提取2株细胞膜蛋白,双向电泳对其进行差异性分析。结果:MHC-Ⅰ抗体阻断后,2株细胞内仍可见FITC-PI分布,基因位点分析显示2株细胞HLA-A、B位点等位基因不同;加入制霉菌素后,镜下观察及流式细胞仪检测均显示FITC-PI分布减少;双向电泳初步分析2株细胞膜蛋白图谱共有11个相同的蛋白点。结论:PI的跨膜转导机制不单一,其一,部分由小窝蛋白介导的内吞机制,其二,可能与2株细胞表面相同的膜蛋白有关系,此研究为将来继续探讨其跨膜转导机制奠定了实验基础和理论依据。     

天然药物IHA-01筛选敏感肿瘤细胞株及其对结肠癌细胞增殖的影响

目的筛选出对天然药物IHA-01的敏感肿瘤细胞,并对其抗瘤机制进行初步研究。方法体外培养12种人肿瘤细胞株,经3.125、6.25、12.5、25和50μg/ml 5个浓度IHA-01作用48 h后光镜下观察细胞株形态变化,采用CCK-8法计算IC50值（半数抑制浓度）,确认敏感细胞株及最佳作用浓度。流式细胞仪检测IHA-01最佳作用浓度下敏感细胞株细胞凋亡情况及端粒酶活性。结果 5个浓度IHA-01均能抑制12种癌细胞增殖,确定结肠癌HCT-8细胞为敏感细胞（IC50值最低）,最佳作用浓度为1.29μg/ml;鼻咽癌CNE-2细胞为不敏感细胞（IC50值最高）。1.29μg/ml的IHA-01作用后HCT-8细胞凋亡率明显高于、端粒酶活性明显低于CNE-2细胞（P均〈0.01）。结论 IHA-01对HCT-8细胞有较强的抑制作用;其机制可能为诱导肿瘤细胞凋亡及抑制细胞端粒酶活性。     

检验科全程质量控制的措施

在医学检验中为了使检验结果更好地符合患者的实际情况,从医师开出检验申请单起,到实验室发出报告止,实验室和医院各有关科室配合(包括临床、药剂、后勤、行政),为控制好可能出现的各种误差和差错,采取各种行政和技术上的措施、     

γ-谷氨酰转移酶与急性ST段抬高心肌梗死溶栓再通后心力衰竭的探讨

目的探讨不同血浆γ-谷氨酰转移酶(GGT)水平与急性ST段抬高心肌梗死(STEMI)溶栓再通后住院期间心力衰竭的关系。方法回顾性分析急性STEMI溶栓再通患者196例,根据入院次日不同GGT水平分为A组78例(<正常值中位数)、B组79例(正常值中位数至正常值高限)及C组39例(>正常值高限),采用单因素方差分析、Pearson相关性分析、多重线性回归及logistic回归分析GGT与STEMI溶栓再通后心力衰竭的关系。结果与A组比较,B组和C组糖尿病、空腹血糖、TG、C反应蛋白、B型钠尿肽、左心室舒张末内径、LVEF、梗死前心绞痛及心力衰竭比例明显升高,B组和C组LVEF明显降低,C组收缩压、肌钙蛋白I、白细胞计数明显升高(P<0.05);与B组比较,C组糖尿病、空腹血糖、肌钙蛋白I及心力衰竭比例数明显升高(P<0.05);GGT与左心室舒张末内径呈正相关(r=0.42,P<0.05);GGT与LVEF呈负相关(r=-0.54,P<0.01);GGT与B型钠尿肽及LVEF独立相关,GGT是STEMI溶栓再通后心力衰竭发生的危险因素(P<0.01)。结论 GGT是STEMI血管再通后住院期间发生心力衰竭的独立危险因素,随着GGT的升高,心力衰竭的发生率明显升高。     

乳腺癌特异性多肽介导的HSV-TK/GCV系统的构建及其靶向杀伤效应

目的:研究乳腺癌MDA-MB-231细胞特异性转导多肽PI介导的HSV-TK/GCV抗瘤系统对乳腺癌MDA-MB-231细胞的体外靶向杀伤作用。方法:以PCR从质粒pORF-HSV-TK中扩增目的基因PI-TK,克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,构建pET-28a(+)-PI-TK载体,转化宿主菌,经IPTG诱导表达PI-TK融合蛋白,利用His-Tag对其进行纯化,SDS-PAGE和Western blotting鉴定PI-TK融合蛋白。将不同质量浓度的PI-TK融合蛋白与MDA-MB-231细胞共培养,联合更昔洛韦(ganci-clovier,GCV)作用后,倒置显微镜下观察细胞的形态变化,CCK-8法检测MDA-MB-231细胞的增殖。结果:成功构建了重组原核表达载体pET-28a(+)-PI-TK,获得纯化的PI-TK融合蛋白,SDS-PAGE及Western blotting鉴定PI-TK融合蛋白表达正确。单独PI-TK融合蛋白不影响MDA-MB-231细胞的形态和增殖,但PI-TK融合蛋白联合GCV能剂量依赖性靶向抑制MDA-MB-231细胞的增殖,200μg/ml PI-TK+10 mg/LGCV作用的抑制率达(68.9±7.57)%;PI-TK联合GCV抑制MDA-MB-231细胞的IC50值为152.64μg/ml。上述各作用对MDA-MB-435细胞均无影响(P<0.05)。结论:乳腺癌特异性转导多肽PI介导的HSV-TK/GCV抗瘤系统可靶向杀伤MDA-MB-231细胞。     

轮状病毒NSP4胞质区在杆状病毒系统的表达及其黏膜佐剂效应评价

目的：应用Bac-to-Bac杆状病毒系统表达轮状病毒（RV）非结构蛋白NSP4的胞质区（CF）片段（47～175 aa）,并初步检测其黏膜免疫佐剂效应。方法：将RV NSP4-CF基因片段定向克隆至转座载体pFastBac1,转化DH10Bac并筛选重组杆粒Bac-NSP4-CF。脂质体介导Bac-NSP4-CF转染sf9细胞,收获细胞并传代培养。测定病毒滴度,Western blot检测目的蛋白表达情况。纯化后的重组NSP4-CF与卵清蛋白（OVA）滴鼻共免疫小鼠,并检测其黏膜免疫佐剂效应。结果：在杆状病毒系统中成功获取了NSP4-CF重组蛋白,Western blot检测可见约16 kD的特异性条带;重组NSP4-CF与OVA共免疫小鼠后,小鼠血清OVA特异性IgG、IgA抗体水平与肠道SIgA水平较OVA单独免疫组均有升高（P<0.05）;ELISPOT检测结果表明NSP4-CF佐剂组（5μg）分泌IFN-γ的脾细胞平均数均高于OVA组（P<0.05）。结论：经昆虫细胞表达系统可获得RV NSP4胞质区（47～175 aa）重组蛋白,该蛋白与模式抗原经黏膜途径免疫小...