芍药苷治疗内脏敏感性肠易激综合征的研究

目的:研究芍药苷对内脏敏感性肠易激综合征(IBS)的治疗作用.方法:经肠道连续6天给予冰醋酸或芥末油,分别建立冰醋酸或芥末油大鼠内脏高敏感性IBS模型,灌胃曲美布丁或芍药苷高、中、低剂量药液,每天1次连续3天,观察各组大鼠肠道内扩张引起腹部抬起和背部拱起的容量阈值,记录大鼠结肠电频率、峰电位、峰峰值和面积.结果:曲美布丁及芍药苷中剂量给药后大鼠肠敏感性显著改善,明显降低两种模型大鼠腹部抬起和背部拱起阈值,降低结肠电频率、峰电位、峰峰值及峰面积.结论:芍药苷可通过降低肠道敏感性,改善结肠电生理活动来治疗内脏高敏感性IBS模型大鼠.     

B超在健康体检中对无症状胆囊结石的诊断及随访价值

目的 探讨B超在健康体检中对无症状胆囊结石的诊断及随访价值.方法 采用GE Lo-giq9超声诊断仪对1080例体检者进行检查,分析各年龄组检出率情况,结石类型发布,并对所有患者进行随访.结果 老年组的无症状性胆囊结石发病率高于青年组和中年组,中年组高于青年组(P<0.01),且年龄与发病率具有相关性(r=0.291,P<0.01).Ⅰ型14例,占检出总例数的28.57%,Ⅱ型15例,占检出总例数的30.61%,Ⅲ型11例,占检出总例数22.49%,Ⅳ型9例,占检出总例数的18.37%.随访过程出现临床表现者6例,占检出总例数的12.24%.随访中需要手术治疗者,Ⅱ型占总例数4.08%(2/49),Ⅲ型8.16%(4/49);Ⅳ型占14.29%(7/49).结论 腹部B超检查是发现无症状胆囊结石的首选办法,对于无症状胆囊结石患者,应定期随访,随访重点为Ⅲ型及Ⅳ型患者.早处理有助于减少并发症发生概率,由此提高患者的生活质量.     

替莫唑胺及甲泼尼龙对人胶质瘤细胞放射治疗敏感性的影响

目的探讨替莫唑胺(TMZ)和甲泼尼龙(MP)对人胶质瘤细胞系U251放射治疗敏感性的影响,以期为临床优化治疗方案提供依据。方法经体外传代培养的U251细胞根据治疗方案的不同,分为对照组、放射治疗(R)组、放射治疗+替莫唑胺(R+TMZ)组、放射治疗+甲泼尼龙(R+MP)组、放射治疗+替莫唑胺+甲泼尼龙(R+TMZ+MP)组,分别予以放射治疗(2 Gv/24 h)、替莫唑胺、甲泼尼龙及三者联合治疗。采用磺酰罗丹明B(SRB)比色法、流式细胞术和Western blotting法分析U251细胞增殖率和凋亡率,观察凋亡相关蛋白Bax和Bc1-2表达变化。结果放射线照射联合甲泼尼龙治疗后,U251细胞存活率明显升高(均P=0.000);但经体外培养24和48 h后,三者联合治疗组(R+TMZ+MP组)U251细胞增殖率显著高于放射治疗联合替莫唑胺组(P=0.000)。除对照组外,不同抗肿瘤治疗组U251细胞凋亡率均呈现升高趋势(P=0.000),但放射治疗联合甲泼尼龙组细胞凋亡率显著低于其他各组(均P=0.000)。经放射线照射联合替莫唑胺和三者联合治疗后,U251细胞Bax蛋白表达水平升高(P=0.000),而放射线照射联合甲泼尼龙和三者联合治疗,Bcl-2蛋白表达水平升高;其中以放射治疗联合替莫唑胺组Bax/Bcl-2比值最高(P=0.000),放射治疗联合甲泼尼龙组最低(P=0.000)。结论甲泼尼龙可以诱导人胶质瘤细胞产生放射抵抗,而替莫唑胺对甲泼尼龙诱导的放射抵抗具有增敏作用。提示:胶质母细胞瘤患者在应用甲泼尼龙减轻放射治疗不良反应过程中所诱导的放射治疗抵抗可通过同时应用替莫唑胺而抵消。     

Ⅱ型神经纤维瘤病分子遗传分析指导临床个体化诊疗的研究

目的 建立临床适用的Ⅱ型神经纤维瘤病(NF2)的分子遗传分析方法,对NF2患者及其后代进行分子遗传诊断,以指导NF2家族的遗传咨询及个体化病情监测、随访及临床干预.方法 以天津医科大学总医院神经外科自2009年1月至2010年1月收治的10例NF2患者为研究对象,收集患者的肿瘤组织标本,原代培养并鉴定术中获取的许旺细胞瘤组织.抽提原代培养的肿瘤性许旺细胞及患者血液的基因组DNA(2例NF2患者已有后代且同意接受基因测序,同时对其后代的血液进行基因组DNA提取),对2例NF2患者亲子二代血液及患者的肿瘤性许旺细胞基因组DNA进行NF2基因测序.制定不同的临床干预及随访计划,结合亲子二代分子遗传检测结果,对NF2家族制定后代的长期随访计划.结果 初步建立NF2许旺细胞瘤组织标本与基因组DNA库.基因测序结果显示肿瘤性许旺细胞与患者血液提取的NF2基因突变位点相同.第一组母女存在完全相同的基因突变位点,第二组母子基因突变位点不完全一致,二组检测到的突变位点均位于靠近外显子的调控区.结论 NF2许旺细胞瘤组织标本及基因组DNA库可以为该病分子遗传研究提供组织及基因组DNA资源.分子遗传分析可以指导临床工作,提前预计后代罹患风险,为高风险人群制定个体化的随访计划.个体化的临床干预可以提高患者的生活质量,延长生存期.

Abstract：

Objective To establish a molecular genetic analysis method applicable clinically for genetic diagnosis of patients with neurofibromatosis type Ⅱ (NF2) and their offsprings, and further guide the genetic counseling of NF2 family, condition monitoring, follow-up as well as clinical intervention of the patients. Methods Ten patients with NF2, admitted to our hospital from January 2009 to January 2010, were chosen;tumorigenic Schwann cells in Schwannoma were isolated and purified for primary culture. Genomic DNA was extracted from tumorigenic Schwann cells and from the blood of 2 patients and their offsprings who agreed to accept gene sequencing;the NF2 gene was sequenced (El-15 and El7 exons and adjacent introns). According to the implication of NF2 gene sequencing, genetic counseling was given to the NF2 family, and the potential NF2 patients in offsprings were followed up in a long-term. Results Schwannoma tissue and genomic DNA bank were established initially. Totallysame NF2 gene mutations were detected in genomic DNA extracted both from tumorigenic Schwann cells and blood cells in the same patient. By comparing the genotypes between the patients and the offsprings,consistent NF2 gene mutations were found between a female patient and her daughter aged 3, but not completely consistent gene mutations between another female patient and her son aged 15. All of the mutations in NF2 gene were located in the control region near the exons. Based on the patient's clinical manifestations and symptoms, reasonable plans for clinical interventions and follow-up were developed.Conclusion Schwannoma tissue and genomic DNA bank could supply the bio-resource for genetic molecular testing and treatment studies. Molecular genetic analysis would apply in clinical practice guidance, NF2 risk prediction, and follow-up plan for high-risk NF2 individuals. Early diagnosis and treatment, condition monitoring and long term follow-up and personalized clinical intervention are needed to improve the quality of life and prolong the survival.     

Ⅱ型神经纤维瘤病肿瘤性许旺细胞提取与纯化的体外研究

目的建立简便易行的Ⅱ型神经纤维瘤病肿瘤性许旺细胞体外提取并纯化方法,以获取能够满足实验需求的Ⅱ型神经纤维瘤病肿瘤性许旺细胞,提高原代培养成功率。方法采集6例Ⅱ型神经纤维瘤病患者肿瘤组织标本作为实验材料,Ⅰ型胶原酶消化培养法提取肿瘤性许旺细胞,低浓度酶快速消化法、差数贴壁法和克隆筛选技术纯化肿瘤性许旺细胞。倒置相差显微镜观察细胞形态变化,免疫细胞化学染色检测纯化细胞S-100蛋白表达水平,结合细胞形态鉴定经体外培养并纯化的细胞为肿瘤性许旺细胞。结果自3例肿瘤组织标本培养液中成功获得肿瘤性许旺细胞。肿瘤细胞原代培养至第3天,可见大量双极梭形或三角形细胞,以低浓度酶快速消化法和差数贴壁法纯化细胞;培养至第3代,倒置相差显微镜观察可见4～5个克隆细胞,免疫细胞化学染色S-100蛋白表达阳性,肿瘤性许旺细胞纯度>95%,活力良好,可以稳定传代培养。结论应用体外原代培养方法结合低浓度酶快速消化法、差数贴壁法和克隆筛选技术能够有效剔除纤维母细胞,获得纯度高、活力良好的肿瘤性许旺细胞,可用于Ⅱ型神经纤维瘤病发病机制及治疗研究。     

ATP敏感性钾通道(KATP)开放剂对脑缺血/再灌注大鼠谷氨酸受体1a和谷氨酸转运体1的影响

目的 研究ATP敏感性钾通道(KATP)开放剂克罗卡林对大鼠脑缺血/再灌注后脑梗死体积、代谢型谷氨酸受体1α(mGluRlα)和谷氨酸转运体1(GLT-1或者EAAT-2)的影响.方法 雄性Wistar大鼠按序号随机分为假手术组(A组)、缺血/再灌注脑缺血对照组(middle cerebral artery occlusion MCAOB,B组)、MCAO+ATP敏感性钾通道(KATP)开放剂克罗卡林组(C组).应用线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞再灌注(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,大鼠脑缺血/再灌注24 h后,Bederson法评价动物的神经行为功能,氯化三苯基四氮唑(TTC)染色观察脑梗死体积,免疫组化测定谷氨酸受体1α(mGluR1α)和GLT-1.结果 脑缺血/再灌注24 h后,动物均表现神经行为功能障碍,大鼠神经行为功能评分C组(2.23±0.11)较B组(2.61±0.19)明显改善,差异有统计学意义(P＜0.05);缺血侧出现脑梗塞病灶,脑梗死体积C组(138.3±29.9)较B组(182.5±34.5)显著减小,差异具有统计学意义(P＜0.05);B组mGluR1α吸光度(0.293±0.009)与A组mGluR1α吸光度(0.183±0.008)相比,吸光度明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05)、B组GLT-吸光度(0.147±0.009)与A组GLT-吸光度(0.255±0.009)相比,吸光度明显减少,差异有统计学意义(P＜0.05);C组mGluR1α吸光度(0.227±0.009)与B组mGluR1α吸光度(0.293±0.009)相比,其吸光度明显减小,差异有统计学意义(P＜0.05)、C组GLT-1吸光度(0.212±0.008)与B组GLT-1吸光度(0.147±0.009)相比明显增大,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 预防性应用克罗卡林可能通过减少mGluR1α表达,增强GLT-1表达,减少谷氨酸堆积,减小脑梗死体积,从而减轻脑组织缺血/再灌注损伤.     

1401例农村新生儿听力状况调查研究

目的通过对辖区农村新生儿进行听力筛查,了解听力状况,发现听力障碍的高危因素,提出有效的干预对策。方法用丹麦产耳声发射仪,于出生48小时后进行听力筛查,对初筛未通过者于出生42天内应用耳声发射仪和MB11型听觉脑干诱发电位仪分别进行测试,如复筛仍未通过者于婴儿3个月内到指定的听力诊断机构进行确诊,分析高危因素。结果对2008～2009年度在我院出生的1401例农村新生儿听力初筛,1102例通过,通过率为78．66％,未通过率为21．34％,其中单耳未通过率为9．92％,双耳未通过率为11．35％;复筛266例,复筛率88．96％,复筛通过率97．74％,6例确诊为听力障碍,本辖区农村新生儿听力障碍发病率为4．28‰。结论开展新生儿听力筛查有利于早期发现听力损害,早诊断,早治疗,是一种简便、可行、安全、有效的方法,具有较高的推广应用价值。     

356名医学专科学校学生口腔健康调查与分析

目的 了解某医学专科学校2015级大二学生口腔卫生知识知晓率,口腔保健行为的实施率,口腔保健的态度以及口腔健康状况。探讨口腔卫生知识态度行为与学生口腔健康之间的关联。 方法 参照WHO的《口腔健康调查基本方法》,2016年9月在学校内系统抽样抽取356名学生进行口腔健康检查和问卷调查。结合问卷和口腔健康检查数据进行分析。应用EpiData 3.1软件进行录入,并进行逻辑纠错,采用SPSS 22.0统计软件进行统计分析。通过χ2检验分析比较不同组间学生口腔卫生知识、态度、行为发生情况的差异,建立二元Logistic回归模型,调整关键人口统计学变量,分析口腔知识态度行为和龋病牙龈炎发生的关联。 结果 356名学生问卷显示父亲文化程度不同,口腔健康知识知晓率差异有统计学意义(P<0.05)。口腔检查结果:患龋率为32.0%,牙龈炎的检出率为29.5%。不同专业和不同生源地学生牙龈炎的检出率之间差异有统计学意义。通过Spearman相关分析和Logistic回归分析发现,在问卷调查的53项中,知晓龋病是危害人类的三大疾病之一和知晓不能预防牙周疾病的方法对龋病的患病率有影响,未使用漱口水和未做龈上洁治是牙龈炎的危险因素。 结论 该医学专科学校学生的口腔健康知识掌握存在不均衡性,龋病患病率较高,需开设口腔教育课程,加强口腔卫生指导,促进口腔健康。      

七氟烷对心肌缺血再灌注损伤模型大鼠心肌的保护作用及其机制

目的 探讨七氟烷对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)模型大鼠心肌的保护作用及其机制.方法 健康雄性SD大鼠45只,随机分为A、B、C、D、E组,每组9只大鼠.A组大鼠在心肌MIRI模型制备过程中,分离出左冠状动脉前降支(LAD)后,在其下方穿线但不结扎,观察160 min;B组在建立大鼠MIRI模型后,结扎LAD 40 min,随后松开结扎线再灌注120 min;C组大鼠在B组操作的基础上,再灌注开始时吸入体积分数0.024的七氟烷15 min,然后停止吸入七氟烷继续再灌注105 min;D组于MIRI模型制备前1 h先腹腔注射HIF2α阻滞剂PT238510 mg/kg,其后操作同C组;E组于大鼠LAD结扎前15 min经颈内静脉注射AREG蛋白50μg,其余操作同D组.比较各组大鼠缺血前、缺血15 min、再灌注2 h末的心率和血压的变化,并比较各组大鼠心梗质量占左心室质量的比值、Bax/Bcl-2比值的变化.结果 时间、分组、时间与分组交互作用对大鼠平均动脉压有明显影响(F时间=101.41,F组间=10.23,F交互=6.93,P<0.05);除A组外,其余各组大鼠不同时间点平均动脉压比较差异有显著性(F=16.07～34.08,P<0.05).再灌注2 h末,与B组相比,C、E组平均动脉压明显上升(F=13.62,P<0.05),而D组与B组比较差异无显著性(P>0.05).C、D组与B组以及D组与E组大鼠心梗质量占左心室质量比值比较差异有显著性(t=14.24～20.01,P<0.05).A～E组大鼠心肌组织Bax/Bcl-2比值比较差异有显著性(F=27.92,P<0.05).A、C组与B组以及C、E组与D组大鼠心肌组织Bax/Bcl-2比值比较差异有显著性(t=5.04～6.79,P<0.05).结论 七氟烷后处理对大鼠心肌具有保护作用,且该保护作用可以通过HIF2α-AREG通路来实现.     

急性播散性脑脊髓膜炎致医疗纠纷

相某,女,30岁。2005年4月,因腿麻、双下肢麻木无力等症状,多次到某附属医院门诊就诊,医院均未给予确诊;2005年4月29日,相某入住某医院,诊断为急性播散性脑脊髓炎。患方认为医院在诊疗过程中存在延误诊断及错失治疗最佳时机等医疗过失,以致造成相某严重的健康损害,遂诉至法院要求赔偿。为明确某附属医院在对相某的诊疗过程中是否存在医疗过错,是否因过错导致损害后果以及过错对损害后果的参与程度等事项,法院委托本所进行法医学鉴定。