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目的:构建含人P21^WAF1/CIP1基因启动子的表达载体pGL3-P21p。方法:以全血总RNA为模板,经RT-PCR扩增P21^WAF1/CIP1基因启动子,并将其克隆到T-easy载体,测序分析,然后经酶切再克隆到pGL3-basic,构成重组真核表达载体pGL3-P21p。将pGL3-P21p转染到乳腺癌细胞株MCF7中,并检测细胞中荧光素酶的活性。结果:经测序、酶切等检测证实重组真核表达载体pGL3-P21p构建成功,荧光素酶活性检测显示P21^WAF1/CIP1基因启动子对荧光酶基因表达起到了正调控作用。结论:P21^WAF1/CIP1启动子荧光素酶真核表达载体的成功构建为进一步研究P21^WAF1/CIP1基因启动子的表达调控奠定了基础。 相似文献
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膀胱癌中Skp2与P27表达的临床意义 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨细胞周期蛋白Skp2与P27在膀胱癌组织中的表达与膀胱移行细胞癌生物学行为的关系。方法对73例膀胱移行细胞癌进行组织学分级及分期,另取22例正常膀胱组织作为对照,采用免疫组织化学方法S-P法检测各例组织中Skp2与P27蛋白表达水平,并分析其表达情况与临床病理特征的关系。结果P27和Skp2蛋白阳性表达率分别为38.4%(28/73),50.7%(37/73),P27和Skp2蛋白表达与肿瘤组织学分级、病理分期显著相关。P27与Skp2表达呈负相关(r=-0.201.P〈0.05)。结论P27和Skp2是诊断膀胱移行细胞癌、评估恶性程度有价值的指标。 相似文献
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