黄芪多糖对高氧致新生大鼠支气管肺发育不良 mir?34a/sirt1轴的影响

目的探讨黄芪多糖(APS)对高氧诱导支气管肺发育不良(BPD)新生大鼠微小 RNA?34a(mir?34a)/沉默信息调节因子 1(sirt1)轴的影响。方法将 2018年 1月至 2019年 1月参加实验的 64只大鼠按照随机数字表法分为空白对照组(NC组)、 APS对照组(APS组)、高氧诱导 BPD模型组(BPD组)、 APS治疗 BPD组(BPD+APS组)每组 16只。 NC组、 APS组暴露在空气中; BPD组、 BPD+APS组大鼠暴露在氧浓度(70±5)%环境中。 24 h后 APS组和 BPD+APS组,腹腔注射 100 mg·kg-1·d-1 APS,NC组和 BPD组腹腔注射同体积生理盐水,每天 1次直至大鼠处死。建模 10、17 d,称量大鼠体质量变化;苏木素 ?伊红(HE)染色观察肺组织形态学变化;酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测肺组织中白介素 ?6(IL?6)、白介素 ?10(IL?10)、肿瘤坏死因子 ?α(TNF?α)、丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)活性变化;实时荧光定量 PCR(qRT?PCR)检测肺组织中 mir?34a水平变化;免疫组化、蛋白质印迹法(Western blot)检测肺组织中 sirt1水平变化。结果 NC组与 APS组建模 10、17 d体质量,肺组织形态, IL?6、 IL?10、TNF?α、MDA、mir?34a、sirt1水平, SOD活性均无明显变化(P＞0.05)。与 NC组、 APS组相比, BPD组建模 10、17 d体质量下降,肺组织结构不完整、肺泡数量减少、体积增大、结构简单化, IL?6、TNF?α、MDA、mir?34a表达升高［(211.32±47.68)比     

EZH2基因与卵巢癌细胞系A2780化疗敏感性的关系

目的:探讨RNA干扰沉默果蝇zeste基因增强子同源物2(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)基因与卵巢癌细胞A2780顺铂敏感性的关系.方法:获得稳定表达EZH2短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)的人卵巢癌细胞A2780-shEZH2,实时定量PCR(Rea...     

EZH2基因沉默逆转卵巢上皮性癌细胞顺铂耐药性的实验研究

EZH2基因是果蝇zeste基因增强子的人同源物,作为一种转录抑制因子参与基因沉默,在细胞生长调控中发挥着重要作用~([1]).研究发现,EZH2基因可以抑制相关癌基因的活性,在前列腺癌~([2])、乳腺癌~([3])和胰腺癌~([4])等多种恶性肿瘤组织中高表达,促进肿瘤生长、侵袭和转移.然而迄今为止,对EZH2基因参与卵巢上皮性癌(卵巢癌)化疗耐药及其机制的研究鲜见报道.     

抑制卵巢癌A2780/Taxol细胞hsa-miR-27a表达对紫杉醇敏感性影响的研究

目的:研究抑制卵巢癌A2780/Taxol细胞hsa-miR-27a表达对紫杉醇敏感性的影响。方法:用浓度递增法建立卵巢癌耐紫杉醇细胞系A2780/Taxol;Stem-loop real-time PCR技术检测A2780/Taxol及亲本细胞A2780中hsa-miR-27a表达水平;利用脂质体Lipofectamine2000将化学合成的miR-27a抑制物及阴性对照(Negative Control,NC)转染A2780/Taxol细胞;分别用Real-time PCR和蛋白印迹法技术检测MDR1mRNA和P-glyco-protein(P-gp)蛋白表达;MTT检测A2780/Taxol对紫杉醇敏感性的变化;流式细胞术检测细胞内P-gp荧光底物罗丹明123(Rh-123)的荧光强度。结果:(1)成功建立了卵巢癌耐紫杉醇细胞系A2780/Taxol;(2)miR-27a在A2780/Taxol细胞中高表达,与A2780细胞相比,表达增高2.2倍。(3)P-gp蛋白在A2780/Taxol细胞中高表达,在A2780细胞中未检测出其表达;(4)转染miR-27a抑制物后,A2780/Taxol细胞的MDR1mRNA和P-gp表达下降,与转染NC组相比,P-gp表达降低36%;对紫杉醇的敏感性增加,IC50为0.53μmol/L,与转染NC组IC506.8μmol/L相比,有明显差异;(5)流式细胞仪结果显示,细胞内Rh-123荧光强度在转染抑制物的A2780/Taxol细胞为5.10±0.35,与A2780/Taxol细胞的2.95±0.39和转染NC的A2780/Taxol细胞的3.30±0.45相比,差异均有统计学意义。结论:hsa-miR-27a在卵巢癌耐紫杉醇A2780/Taxol细胞中高表达,可能通过间接调节P-gp的表达和功能,参与耐药。抑制miR-27a表达后,可以增加A2780/Taxol细胞对紫杉醇的敏感性,部分逆转耐药。     

Egr1信号途径参与NDRG1表达调节的机制研究

目的:研究人宫颈癌细胞中早期生长反应基因1(Egr1)信号途径参与N-myc下游调节基因1(NDRG1)表达调节的机制。方法:以人宫颈癌细胞株SiHa为研究对象,利用siRNA干扰技术使Egr1基因沉默,用RT-PCR和W estern blot检测转染前后Egr1表达的变化。通过RT-PCR和W estern blot检测细胞在低氧条件下,以及转染siRNA-Egr1后在低氧或低氧模拟物(DFX)条件下,Egr1与NDRG1表达的变化。结果:siRNA能有效地抑制Egr1基因表达(P0.001)。低氧条件下,Egr1、NDRG1的蛋白水平均明显升高(P0.001)。转染siRNA-Egr1 48h后,细胞在低氧条件下作用1h,Egr1 mRNA表达显著下降(P0.05)。细胞转染siRNA-Egr1 48h后,在低氧及DFX条件下作用24h,结果显示DFX使NDRG1 mRNA的表达显著高于低氧条件(P0.05)。同时也显示siRNA-Egr1能够使NDRG1 mRNA水平明显减少(P0.05)。结论:体内环境因素如低氧、DFX等上调NDRG1基因的表达,通过Egr1信号途径参与NDRG1在宫颈癌细胞中表达的调节。     

不同产地滇龙胆中龙胆苦苷的含量测定

目的：测定滇龙胆巾龙胆苦苷的含量，提供其种质资源及药材质量评价、种植区划规划的依据。方法：用高效液相色谱方法测定不同产地滇龙胆中龙胆苦苷的含量，并根据测定结果进行品质评价。结果：不同产地46个滇龙胆样品中龙胆苦苷的含量在2．11％～8．24％之间，平均含量4．77％．结论：滇龙胆有效成分含量高，足我省品质优良的道地药材；滇龙胆种植规划应优先考虑昆明、红河、文山、楚雄、玉溪、临沧等地。     

头孢克洛联合射干利咽治疗急性化脓性扁桃体炎临床观察

目的：探讨治疗细菌感染性急性化脓性扁桃体炎的有效方法。方法：治疗组口服头孢克洛颗粒联合射干利咽口服液,对照组单服头孢克洛颗粒。结果：用药3天治疗组有效率为95.82%,对照组为82.98%。治疗组与对照组有效率比较差异有显著性（P〈0.05）。结论：头孢克洛联合射干利咽治疗急性化脓性扁桃体炎疗效好。     

夜交藤的化学成分研究

目的:研究夜交藤的化学成分.方法:用色谱方法分离得到13个化合物.根据理化性质及波谱测试鉴定结构.结果:13个化合物分别是:大黄酚(Ⅰ)、大黄素甲醚(Ⅱ)、大黄素(Ⅲ)、芦荟大黄素(Ⅳ)、大黄酸(Ⅴ)、大黄素甲醚8-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅵ)、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅶ)、2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅷ)、新丁香色原酮(Ⅸ)、芹菜素(Ⅹ)、胡萝卜苷(Ⅺ)、β-谷甾醇(Ⅻ)、硬脂酸(Ⅻ).结论:以上化合物中,Ⅰ、Ⅳ～Ⅵ、Ⅷ～Ⅺ、ⅩⅢ共9个化合物是首次从夜交藤中得到.     

妊娠期高血压疾病母体血清及胎盘组织中hCG的表达

目的:研究hCG表达水平与妊娠期高血压疾病之间的关联。方法:利用前瞻性对照的研究方法,研究了10例子痫前期(轻度6例、重度4例)、12例妊娠期高血压和22例正常妊娠。①利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测孕10～14、20～24、30～34周3个不同时间段3组对象母体血浆β-hCG值;②运用免疫组织化学染色的方法检测胎盘组织中hCG的表达,并通过计算机成像技术分析表达的强度;③荧光定量(QF)RT-PCR方法检测胎盘组织中β-hCG mRNA的表达,分析目的基因与β-actin拷贝数(荧光强度)比值。结果:①子痫前期患者孕10～14、20～24、30～34周母体血浆中β-hCG值与正常妊娠组比较,其值明显上升(P=0.000、0.01、0.048);而妊娠期高血压组与正常妊娠组比较虽有上升的趋势,但无统计学差异(P=0.787、0.937、0.838)。②胎盘合体滋养细胞表达强度按正常妊娠、妊娠期高血压、子痫前期依次递增,子痫前期较前正常妊娠明显增强(P=0.000),而妊娠期高血压与正常妊娠之间无明显差异(P=0.24)。③β-hCG mRNAQF-PCR表达强度按正常妊娠、妊娠期高血压、子痫前期依次增强,子痫前期较前正常妊娠明显表达增加(P=0.000),妊娠期高血压与正常妊娠之间无明显差异(P=0.214)。结论:子痫前期患者母体血清β-hCG值在妊娠较早阶段就有明显改变,并伴随整个孕期,胎盘中hCGmRNA、蛋白表达亦明显增加,证实hCG与子痫前期疾病之间有密切联系。