人神经营养素-3基因克隆及原核表达

目的通过基因工程的方法克隆人神经营养素-3成熟蛋白(hNT-3)的基因,并在大肠杆菌中进行表达,为研究hNT-3的生物学作用提供材料。方法以人胎脑cDNA为模板,采用PCR方法扩增hNT-3基因,并将其克隆在pGEM-T载体上,将经过序列分析确定的hNT-3基因插入原核表达载体pGEX-6p-1中,构建了重组表达载体pGEX-6p-1-NT-3,用SDS-PAGE法测定其在大肠杆菌中的表达。结果经序列测定分析,所克隆DNA片断与文献发表序列(GenBank,MW002527)同源性为99.7%,并获得了高效表达hNT-3蛋白的重组菌株。结论体外成功扩增hNT-3基因,并在原核细胞中高效表达。     

正品龙胆遗传多样性的RAPD及ISSR分析

目的用RAPD和ISSR方法分析了4种正品龙胆的亲缘关系及遗传多样性，为正品龙胆的品种鉴定及栽培育种提供了分子生物学依据。方法优化RAPD及ISSR的PCR反应体系，对产物琼脂糖凝胶电泳结果进行数据统计。结果从100个RAPD引物和32个ISSR引物中分别筛选出10个RAPD引物和4个ISSR引物。通过遗传距离系数UPGMA聚类法分析数据，构建类聚关系树系图。结论RAPD及ISSR的PCR反应体系可以获得理想的实验结果，适用于龙胆品种遗传多样性及亲缘关系的分析。     

衰变加速因子结构基因及调控

衰变加速因子DAF是补体激活调节剂(RCA)家族中重要成员之一,在体内的存在形式有3种:分泌型DAF、跨膜型DAF和GPI锚链型DAF。DAF的分子结构、基因结构、合成及基因表达调控等方面的进展近年颇为迅速。DAF分子的研究,使人们了解了在细胞表面控制补体活性的分子基础。DAF基因克隆表达及转基因动物研制成功,为DAF的研究和应用开辟了广阔的前景。     

核酸疫苗的研究进展(综述)

核酸疫苗又称ＤＮＡ疫苗或基因疫苗，是最近几年从基因治疗研究领域发展起来的一种全新疫苗，其组分为编码蛋白质抗原的双链环状重组表达质粒，它的出现被誉为第三次疫苗革命，通过肌肉注射等途径接种动物后，外源基因能在宿主细胞内表达相应抗原，通过抗原提呈细胞的加工、提呈、诱导免疫应答。 ｌ核酸疫苗的发现：Ｗｏｌｆｆ等（１９９０）将分别编码β－半乳糖苷酶、虫荧光素酶、氯霉素乙酰转移酶的 ＲＮＡ和 ＤＮＡ的表达载体注入小鼠骨骼肌后，这些基因都能在肌细胞内表达相应蛋白［１］。Ｗｉｌｌｉａｍｓ（１９９１）报道用基因枪将…     

几种促肝细胞因子(综述)

特异性的促肝细胞分裂增殖的因子,按其最初发现的部位而命名,主要有3种:血源性肝细胞生长因子[2]。肝源性肝细胞生长因子[2]。胞源性肝细胞生长因子[1]。肝脏是具有强大再生能力的重要器官[1]。当肝脏被部分切除或受到药物（如四氯化碳,D-氨基半乳糖胺等）毒害,以及各种肝脏疾病所造的肝脏损害时,促肝细胞再生细胞因子使剩余的或未受损害的肝细胞可以分裂增殖,使肝组织再生恢复到原来的体积。     

禽脑脊髓炎病毒VP3基因的克隆与序列测定

目的 对VP3进行克隆和测序，为禽脑脊髓炎病毒（AEV）的分子诊断以及更深一层次的分子和基因工程研究打下基础。方法利用RT-PCR技术，从AEVVR株感染的SPF鸡胚脑及内脏器官组织中提取病毒RNA并扩增出VP3目的基因，而后克隆到pMD18-T载体中，鉴定后进行序列测定。结果AEV VR株VP3基因全长735bp，共编码245个氨基酸，与AEV-1143标准毒株相应片段的核苷酸和氨基酸同源性分别为93％和97％；并将其与其他小RNA病毒进行了比较。结论本研究通过RT-PCR技术从体外成功扩增AEVVan-Roekel株VP3蛋白基因，并对其进行克隆、测序。     

高效液相色谱法及高效毛细管电泳法对黄芩苷的含量测定比较

目的:高效液相色谱法及高效毛细管电泳法测定黄芩中黄芩苷含量结果的分析比较。方法:高效液相色谱法采用 C_(18)柱,甲醇∶水∶磷酸(60∶40∶0.2)为流动相,检测波长280hm。高效毛细管电泳法采用缓冲液为40mmol/L硼砂缓冲液(pH8.5),75KPa·s 压力进样,17Kv 恒压电泳(25℃),检测波长280nm。结果:通过对两种方法间的系统适用性试验、线性范围、重复性、方法回收率试验的比较研究,证明两种方法测定结果基本一致。结论:两种方法均适合于黄芩含量的测定分析。     

正品龙胆遗传多样性的RAPD及ISSR分析

目的用RAPD和ISSR方法分析了4种正品龙胆的亲缘关系及遗传多样性，为正品龙胆的品种鉴定及栽培育种提供了分子生物学依据。方法优化RAPD及ISSR的PCR反应体系，对产物琼脂糖凝胶电泳结果进行数据统计。结果从100个RAPD引物和32个ISSR引物中分别筛选出10个RAPD引物和4个ISSR引物。通过遗传距离系数UPGMA聚类法分析数据，构建类聚关系树系图。结论RAPD及ISSR的PCR反应体系可以获得理想的实验结果，适用于龙胆品种遗传多样性及亲缘关系的分析。     

蛋白质修饰与自身免疫

细胞内蛋白质翻译后需经多种修饰 ,以维持蛋白质正常的结构和生理活动。蛋白质的修饰受到严格的调节 ,即使对异常修饰的蛋白质 ,细胞可通过各种蛋白酶加以降解 ,因此不会对人自身造成损伤。有些蛋白经异常的翻译后修饰作用 ,可出现新的抗原表位而形成新的自身抗原 ,引致人体针对这些抗原的异常免疫应答 ,出现各种自身免疫病。文章列举与蛋白修饰有关的常见自身免疫病 ,及每种抗原的修饰方式。并以EAE、SLE和CIA等典型的自身免疫病为例 ,阐述蛋白修饰与自身抗原形成的关系 ,还初步探讨蛋白修饰诱导自身免疫的可能机制。