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131.
背景:磷脂酶A2能被Ca^2+激活,而被激活的磷脂酶A2又能使Ca^2+内流或细胞内Ca^2+释放,形成恶性循环,使神经细胞游离Ca^2+浓度持续增加,导致神经细胞严重损伤。目的:探讨尼莫地平对磷脂酶A2激活致急性缺血性脑损伤中的保护作用。设计:完全随机对照实验。单位:重庆医科大学儿童医院ICU。材料:实验于2001—01/2003—10在重庆医科大学儿科研究所完成,选择30只雄性Wistar大鼠,随机分为假手术组、缺血组、尼莫地平干预组,每组10只。方法:假手术组:大鼠仪在麻醉状态下分离右侧颈总动脉,不予阻断血流。缺血组:腑缺血前30min,每只大鼠腹腔注射2mL生理盐水。尼莫地平干预组:脑缺血前30min,每只大鼠腹腔注射0.2g/L的尼莫地平2mg/kg。3组大鼠自缺血开始至处死的时间均为120min。大鼠在麻醉状态下断头处死,取脑组织检测磷脂酶A2活性、脑细胞游离Ca^2+浓度、脑组织水含量及检测脑组织中Ⅱ类A型分泌型磷脂酶A2和Ⅳ类胞浆型磷脂酶A2mRNA表达的改变。主要观察指标:①各组大鼠脑组织磷脂酶A2活性。②各组大鼠脑细胞游离Ca^2+浓度。⑧各组大鼠腑含水量。④各组大鼠脑组织中Ⅱ类A型分泌型磷脂酶A2和胞浆型磷脂酶A2表达情况。结果:30只大鼠均进入结果分析。①各组大鼠脑组织磷脂酶A2活性:缺血组、尼莫地平干预组均高于假手术组[(57.8&;#177;7.2),(42.5&;#177;6.1),(17.1&;#177;5.3)%,P〈0.05-0.01],尼莫地平干预组低于缺血组(P〈0.05)。②各组大鼠脑细胞游离Ca^2+浓度:缺血组、尼莫地平干预组均高于假手术组[(775.8&;#177;105.5),(497.2&;#177;45.9),(103.8&;#177;10.3)μmol/L,P〈0.05~0.01],尼莫地平干预组低于缺血组(P〈0.01)。⑧各组大鼠脑含水量:缺血组、尼莫地平干预组均高于假手术组[(82.9&;#177;0.5),(80.0&;#177;1.1),(72.1&;#177;0.01)%,P〈0.05-0.01],尼莫地平干预组低于缺血组(P〈0.05)。④假手术组脑组织中无明显Ⅱ类A型分泌型磷脂酶A2mRNA表达,胞浆型磷脂酶A2mRNA表达水半很低。缺血后120min后脑组织中出现Ⅱ类A型分泌型磷脂酶A2mRNA表达,胞浆型磷脂酶A2mRNA表达水平明显增强。尼莫地平干预组与缺血组比较,Ⅱ类A型分泌型磷脂酶A2mRNA表达水平无明显降低,胞浆璎磷脂酶A2mRNA表达水平有所降低。结论:尼莫地平可降低缺血后脑细胞游离Ca^2+浓度,脑组织中磷脂酶A2的活性和脑含水量,但不能明显抑制脑缺血后Ⅱ类A型分泌型磷脂酶A2mRNA及胞浆型磷脂酶A2mRNA的表达。 相似文献
132.
目的 构建大鼠Bcl-2/E1B-19K-interacting protein 3(BNIP3)干扰质粒,研究其对BNIP3蛋白表达水平的影响.方法 利用Invitrogen公司在线软件设计大鼠BNIP3(NM053420)干扰片段,合成互补的单链寡核苷酸,蒋退火后形成的双链克隆人pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR表达载体,连接产物转化感受态细胞,增菌,质粒小量提取并测序.将构建的干扰质粒与大鼠BNIP3表达质粒共转染到HEK293细胞中,采用实时荧光定量PCR和Westem blotting检测对目的 基因的干扰情况.结果 构建的2个干扰质粒经测序证实序列正确,与BNIP3表达质粒共转染后显著抑制外源性BNIP3的mRNA和蛋白表达.结论 成功构建了大鼠BNIP3干扰质粒,为进一步研究BNIP3的功能打下了基础. 相似文献
133.
目的 :探讨脂蛋白脂酶 (LPL)基因S44 7X多态性是否与 2型糖尿病发病率降低相关 ,及其对患者血脂代谢的影响。方法 :采用聚合酶链反应 -限制性片断长度多态性方法 ,对 10 2例 2型糖尿病患者 (病例组 )及 113名非患者 (对照组 )S44 7X位点进行分析。结果 :病例组X等位基因和S/X基因型频率均低于对照组 ,其差异非常接近显著性水平 (P =0 .0 65和P =0 .0 5 7)。我国汉族人群S44 7X多态性位点等位基因频率与欧美白种人相似。结论 :LPL基因S44 7X突变能引起有益的血脂改变 ,很可能与 2型糖尿病发病率降低相关 ,该多态性位点分布未见明显的种族差异。 相似文献
134.
目的研究EGFRvⅢ的siRNA对U87-EGFRvⅢ胶质瘤细胞中EGFRvⅢ的表达及其对细胞增殖和凋亡的影响。 方法化学方法合成特异针对EGFRvⅢ的siRNA,转染U87-EGFRvⅢ细胞后,利用半定量RT-PCR法检测细胞中EGFRvⅢ的mRNA表达,采用蛋白印迹法和免疫荧光法检测细胞中EGFRvⅢ的蛋白表达水平,MTT法检测siRNA对胶质瘤细胞增殖的作用,Annexin V-FITC/PI法检测siRNA对细胞凋亡的作用。结果RT-PCR、蛋白印迹法和免疫荧光法均可显示EGFRvⅢ siRNA可使EGFRvⅢ的基因和蛋白表达显著下降,48 h内可使蛋白含量下降(757±31)%;MTT法和Annexin V-FITC/PI检测结果显示siRNA可抑制U87-EGFRvⅢ细胞的增殖并促进其凋亡。 结论EGFRvⅢ siRNA可特异地抑制EGFRvⅢ在胶质瘤细胞中的表达,抑制细胞增殖、促进细胞凋亡。 相似文献
135.
目的:分析Leber遗传性视神经病(LHON)中线粒体DNA(mtDNA)11778位点突变与外显率。方法:应用PCR-SSCP和DNA测序方法,对3个中国汉族LHON家系的31例母系成员进行mtDNA 11778位点突变检测,其中男14例,女17例;31例中15例为患者。40例正常人作为对照。结果与结论:3个家系31例样本中全部存在mtDNA 11778位G→A突变,说明LHON患者均存在mtDNA 11778位点突变。平均外显率48.4%,男性外显率(11/15)高于女性(4/16)。男性外显率有逐代降低,患者发病年龄随传代数增加呈现遗传早发现象。 相似文献
136.
目的:对5个中国良性家族性婴儿惊厥(benign familial infantile convulsion,BFIC)家系进行基因定位研究.方法:选择D18S460、D18S474等短串联重复序列(STR)作为DNA标记,应用聚合酶链反应(PCR),变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)和银染技术,采用LINKAGE软件包中的MLINK程序进行连锁分析.结果:在常染色体显性(AD)模式下,在标记位点D18S460和D18S474,5个家系在重组率为0.000,外显率从90%到50%时,获得两点对数优势计分(log odds score,LOD)值总和均为-∞;在标记位点D18S474处,5个家系在重组率为0.400,外显率为70%时,获得最大两点LOD值总和仅为0.002.结论:位点D18S460和D18S474与BFIC疾病基因不存在连锁关系. 相似文献
137.
目的 测试农药5%吡虫啉乳油的经口、经皮急性毒性和对眼、皮肤的刺激性以及皮肤时其的过敏性,为样品5%吡虫啉乳油的安全使用提供毒理学依据.方法 按照<农药登记毒理学试验方法>(GB15670-1995)[2]进行操作.结果 5%吡虫啉乳油对雌、雄大鼠急性经口LD50均大于5000mg/kg·BW;对雌、雄大鼠急性经皮L D50均大于2000mg/kg·BW;对实验免急性眼刺激试验中,给药后不洗眼眼刺激积分指数(I.A.O.I)为5,眼刺激平均指数(M.I.O.I)4d后小于5,给药后洗眼I.A.O.I为4.5.M.I.O.I 4d后小于5;对豚鼠急性皮肤刺激积分为0;对豚鼠致敏试验致敏率为0%.结论 该受试物急性经口、急性经皮均属低毒性,急性眼刺激试验给药后不洗眼和洗眼均呈轻度至中度刺激性,急性皮肤刺激试验呈无刺激性,致敏试验属Ⅰ级弱致敏物. 相似文献
138.
目的测试农药5%吡虫啉乳油的经口、经皮急性毒性和对眼、皮肤的刺激性以及皮肤对其的过敏性,为样品5%吡虫啉乳油的安全使用提供毒理学依据。方法按照《农药登记毒理学试验方法》(GB15670-1995)进行操作。结果5%吡虫啉乳油对雌、雄大鼠急性经口LD50均大于5000mg/kg·BW;对雌、雄大鼠急性经皮LD50均大于2000mg/kg·BW;对实验兔急性眼刺激试验中,给药后不洗眼眼刺激积分指数(I.A.O.I)为5,眼刺激平均指数(M.I.O.I)4d后小于5,给药后洗眼I.A.O.I为4.5,M.I.O.I4d后小于5;对豚鼠急性皮肤刺激积分为0;对豚鼠致敏试验致敏率为0%。结论该受试物急性经口、急性经皮均属低毒性,急性眼刺激试验给药后不洗眼和洗眼均呈轻度至中度刺激性,急性皮肤刺激试验呈无刺激性,致敏试验属I级弱致敏物。 相似文献
139.