拉米夫定治疗期间患者体内HBV-DNA聚合酶基因变异的分析

目的：了解接受拉米夫定(Lamivudine)治疗的慢性乙型肝炎患者体内HBV-P基因的变异特点及规律，提高抗HBV的治疗效果。方法：①选择50例服用拉米夫定(100mg／d)的慢性乙型肝炎患者，采集13例服药48周时HBV-DNA检测阳性患者的外周血，提取HBV—DNA，用聚合酶链反应(PCR)技术扩增后直接测序，分析HBV-P基因的酪氨酸-蛋氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸(YMDD)基序变异情况，同时用基因芯片方法进行验证。②用逆向追踪方法对上述13例HBV-DNA阳性患者服药前和服药36周时血清标本中扩增的HBV-P基因片段进行测序及HBV-DNA定量的检测。同时对50例患者服药前、服药12、24、36和48周时的丙氨酸氨基转移酶(ALT)进行检测，观察对比发生YMDD变异者及非变异者、ALT的变化情况。结果：①拉米夫定治疗48周结束时，13例HBV-DNA检测阳性的患者中有5例外周血中HBV-P基因发生YMDD变异，其中2例为YVDD变异，伴L528M变异；3例为YIDD变异。②所有YMDD变异均发生于用药36周以后，变异率为10％，基因芯片检测结果与测序完全符合。③除了YMDD外，还发现了若干其他的变异位点，如1例伴有N482E、N487K、V521L、T532S和S561T突变；1例伴有T466N、N469I、Y472N、G475R、D479N和DM82N突变；1例伴发Q473K突变；3例伴发M477L突变。④13例HBV—DNA阳性的患者中共有8例在服药48周时HBV-DNA定量较服药前增高，其中5例为YMDD变异者。50例慢性乙肝患者中有5例48周时的ALT水平高于服药前，其中4例发生了YMDD变异。结论：拉米夫定可以诱导HBV-P基因的YMDD变异，变异者较非变异者临床疗效差，发生P基因区的YMDD变异是耐药的主要原因之一。     

反基因操作技术及其在负链RNA病毒中的应用

反基因操作技术实现了在DNA水平上对RNA病毒基因组的人工操作,在深入阐明病毒基因组结构与功能、发展新型病毒载体、研制筛选基因工程疫苗及基因治疗等方面显示出良好的应用前景。本文对反基因操作技术及其在负链RNA病毒中的应用进行了综述。     

军人自我相关信息注意分类加工的脑电研究

目的 为从判断分类角度进一步丰富自我相关信息(self-related information,SRI)注意认知加工的理论,为包含大量SRI军事心理选拔自我评估技术的应用研究提供理论依据.方法 本研究招募被试35人,采用经典Odd-ball范式,以不同自我相关度的城市名为主要实验材料,采用时域分析与频域分析的方法分析脑...     

2004～2010年高唐县性病门诊就诊者资料分析

[目的]了解高唐县性病门诊就诊者性病感染情况,为制定防治对策提供科学依据。[方法]对2004～2010年高唐县性病门诊就诊者进行血清学监测,同时进行匿名问卷调查。[结果]2004～2010年共检测性病门诊就诊者635人,检出性病病人606例,性病检出率为95.43%,感染的主要病种为非淋菌性尿道炎、滴虫病、生殖器疱疹、其他性病和尖锐湿疣,检出率分别为38.58%、18.58%、15.91%、12.44%、7.24%。男性性病检出率为92.20%,女性为96.36%(P<0.05);在婚者检出率为97.82,非在婚者为91.03(P<0.01)。[结论]高唐县性病的发病病例总体上呈现增长趋势。     

老年肾综合征出血热的临床分析

0引言肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)是一种自然疫源性急性传染病,病情凶险,变化迅速,特别是老年HFRS,患者死亡率高(16.4%～38.1%)[1].现将唐都医院感染病科近3a以来收治的出血热患者报告如下.     

5-氮杂-2′-脱氧胞苷逆转RASSF1A基因甲基化对人乳腺癌MCF-7细胞的影响

目的：探讨启动子甲基化对乳腺癌MCF-7细胞RASSF1A基因的作用及5-氮杂-2′-脱氧胞苷（5-Aza-CdR）干预对启动子甲基化的影响,为临床治疗乳腺癌奠定理论基础.方法：用1,3,5,7,9μmol/L不同浓度的5-Aza-CdR处理MCF-7乳腺癌细胞株,通过MTT检测5-Aza-CdR对MCF-7乳腺癌细胞株存活率的影响;建立5μmol/L,10μmol/L的浓度梯度流式细胞仪检测5-Aza-CdR对MCF-7乳腺癌细胞株生长周期及凋亡率的影响,MSP（甲基化PCR）检测5-Aza-CdR处理前后RASFF1A抑癌基因的甲基化状态,RT-PCR检测处理前后抑癌基因RASSF1A mRNA表达情况.结果：5-Aza-CdR抑制体外培养的人乳腺癌MCF-7细胞,诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡和细胞周期停滞在G0/G1期,呈浓度依赖性.经5-Aza-CdR处理人乳腺癌MCF-7细胞后,MSP检测RASSF1A基因发生了甲基化,RT-PCR检测RASSF1A mRNA恢复了表达.结论：RASSF1A基因启动子甲基化是导致其失活的主要原因,5-Aza-CdR可以逆转乳腺癌细胞株MCF-7细胞RASSF1A基因启动子甲基化状态,使其重新表达．     

HACCP在学校集体食堂卫生管理中的应用

目的通过HACCP在学校集体食堂管理中的应用,为学校集体食堂的卫生管理提供科学依据。方法选择兴宁市一中和田家炳中学的学生食堂作为研究对象,按照《HACCP系统及其应用导则》,通过现场调查,对学生集体用餐加工的整个过程进行危害分析。结果学生集体用餐加工的8个关键控制点为：食品采购、冷库存放、粗加工、烹调加热、熟食销售,熟食容器餐具清洗消毒、从业人员的健康监督、出品至食用的时间间隔;并制定了干预措施,通过实施这些措施使食品卫生达到较高水平,极大地减少食物中毒的发生。结论提示HACCP原理可在学校集体食堂的卫生管理中发挥有效作用。     

2006年莱芜市感染性腹泻病人就诊及报告情况调查

[目的]探讨莱芜市感染性腹泻就诊规律和报告情况，为腹泻病防治资源分配和疫情监测管理提供科学依据。[方法]依据感染性腹泻诊断标准确定病例定义，随机抽取市、县、乡镇和村级医疗机构进行调查，用SPSS 13．0进行统计分析。[结果]共调查感染性腹泻病例885例，就诊病例主要为婴幼儿和青壮年；157例感染性腹泻的细菌学培养检出率为31．3％，肠杆菌科检出最多，占81．4％；不同级别医疗机构感染性腹泻病人就诊比例差异有统计学意义（P〈0．01）；用CMR法估算痢疾漏报率为30．9％，其他感染性腹泻漏报率高达66．1％。[结论]大多数门诊医生报病意识淡薄或对感染性腹泻报告的相关规程不了解，是感染性腹泻病例大量漏报的主要原因，应加强对医疗机构的技术指导、监督检查和技术培训。在腹泻病防治、监测工作中，村卫生室和乡镇级卫生院等基层医疗机构的作用不容忽视。     

汉滩病毒西安分离株84FLi M片段的克隆

目的:克隆汉滩病毒84FLi株M片段的cDNA. 方法:提取病毒总RNA,反转录为cDNA模板,用高保真的Taq酶扩增出G1和G2两个糖蛋白编码的基因片段:84M2.0(1～2058)和84M1.6(1964～3616). 将这两个片段分别与T载体-pMD18-T连接,转化感受态大肠杆菌后获得两个分别为G1和G2编码的克隆pMD84M2.0和pMD84M1.6. 再利用酶切连接的方法获得M片段全序列的cDNA克隆. 结果:获得两个分别为G1和G2糖蛋白序列编码的克隆,进而酶切组装为含有M片段全序列的cDNA克隆. 结论:获得了84FLi株M片段全序列的cDNA克隆.