叶酸介导靶向高分子造影剂的制备及体外识别研究

目的 合成叶酸介导靶向的聚乳酸共聚物,以其为靶向膜材制备靶向造影剂,表征造影剂性质.方法 以自制的叶酸-脯氨酸-乳酸共聚物(Fa-PLLA-Hpr)为膜材,应用双乳化-冷冻干燥法制备叶酸介导靶向高分子造影剂(MB-Fa-PLLA).采用激光粒径测量仪检测微泡的粒径,通过光镜观察该靶向造影剂(靶向造影剂实验组)对人卵巢癌SKOV3细胞的体外寻靶情况,并与游离叶酸干预组及空白对照组(普通微泡)比较.结果 FT-IR表征了靶向膜材的结构.成功制备叶酸介导靶向聚乳酸共聚物MB-Fa-PLLA.MB-Fa-PLLA在光镜下大小分布均匀,形态圆整,65％的微粒直径分布为500～800 nm,呈单峰分布,其亲水性较普通高分子微泡更好.体外寻靶实验显示,MB-Fa-PLLA可以较多并牢固地聚集到SKOV3细胞表面,而普通微泡未见特异性结合.结论 MB-Fa-PLLA亲水性好,对高表达叶酸受体的SKOV3细胞具有较强特异性亲合力,其有望成为靶向显像叶酸高表达肿瘤的理想造影剂.     

3种抗癫痫新药对部分性癫痫患者的临床疗效及脑电的影响

目的探讨奥卡西平、拉莫三嗪及左乙拉西坦单药治疗新诊断的成人部分性癫痫患者的临床效果及其对脑电的影响。方法将新诊断的成人部分性癫痫患者133例按随机数字表法分为3组,分别给予奥卡西平(OXC组)、拉莫三嗪(LTG组)及左乙拉西坦(LEV组)单药治疗12个月,比较3组患者临床疗效及治疗前后脑电图的变化。结果治疗12个月后,3组间无发作率无明显差别(P>0.05),OXC组及LTG组总有效率高于LEV组(P<0.05)。3种药物对癫痫样放电(IEA)均有明显的抑制作用,3组间无统计学差异(P>0.05)。3组患者治疗前后脑电背景α节律均无明显变化(P>0.05);LTG组及LEV组治疗前后α、β、δ及θ频段相对功率均无明显变化(P>0.05),OXC组θ频段功率较治疗前明显增加(P<0.05),且OXC组治疗后θ频段功率与LEV组及LTG组比较有统计学差异(P<0.05)。结论奥卡西平、拉莫三嗪及左乙拉西坦单药治疗新诊断的成人部分性癫痫均有较好的效果,3种药物对IEA均有明显的抑制作用,拉莫三嗪及左乙拉西坦对脑电背景活动无明显影响,奥卡西平可使θ频段功率明显增加。     

脂质超声造影剂携半乳糖化多聚赖氨酸靶向结合HepG2细胞的实验研究

目的 探讨连接以半乳糖化多聚赖氨酸作为配体的脂质微泡超声造影剂的细胞靶向能力,为体内靶向显影及治疗肝癌寻求新方法.方法 用还原胺化法将多聚赖氨酸进行半乳糖化,人工合成小分子量的靶向配体,在室温下与自制脂质微泡发生化学结合制备成靶向脂质微泡,于荧光显微镜下观察体外靶向效果.结果 半乳糖与多聚赖氨酸在摩尔比为1:100,室温下反应24 h时,能进行高效连接;靶向脂质微泡粒径平均为2.05弘m,大小均一;激光共聚焦荧光显微镜见HepG2肝癌细胞能与靶向造影剂特异性结合.结论 连接有以半乳糖化多聚赖氨酸为靶向配体的脂质微泡在HepG2肝癌细胞的内吞作用下能与之有效结合.     

超声微泡-阳离子纳米脂质体复合体制备的实验研究

目的 RI示踪剂动态观察大鼠C6脑胶质瘤的生物学行为及抗肿瘤生成因子治疗的效果。方法 实验对照组:25μg/ml浓度USPIO 标记的C6脑胶质瘤(1×106)细胞采用立体定向方法接种6只大鼠右侧额叶。实验组Ⅰ:150μg反义VEGF核酸与C6脑胶质瘤细胞混合液,立体定向方法接种6只大鼠右侧额叶。实验组Ⅱ:C6脑胶质瘤(1×10⁶)细胞采用立体定向方法接种6只大鼠右侧额叶后3天,肿瘤内注射150μg反义VEGF核酸+脂质体。载体MRT2WI、T2^* 、R2^* ,GRE序列扫描分别于24h、3、7、14、21天进行,测定其信号强度,测定肿瘤大小。获取标本进行大体切片,普鲁士蓝染色光镜分析染色数量、深度与肿瘤生长的关系。测定VEGF表达强度。结果 25μg/ml浓度USPIO 标记大鼠C6胶质瘤细胞,信号强度与接种时间有关(t=5.16、2.35、4.41,P<0.05)。普鲁士蓝染色镜下观察,USPIO 标记大鼠C6胶质瘤细胞在MR成像中清楚显示病变的范围及信号强度,随着脑内肿瘤的不断生长,信号强度随之降低,低信号的铁颗粒逐渐减少、迁徙到肿瘤的边缘,逐渐消失。反义VEGF核酸在C6脑胶质瘤细胞接种前、后使用7、14天均有抑制脑胶质瘤生长的作用,2周后MRI表现、肿瘤生长速度及镜下分析差异无统计学意义(P<0.05)。结论 USPIO 可以成功地载体标记大鼠C6胶质瘤细胞,活体接种脑内完全可以达到MRI示踪的目的,随着肿瘤不断生长,铁颗粒信号逐渐减少而升高,USPIO早期对肿瘤定位具有重要意义。反义VEGF核酸对脑胶质瘤的生长有短时间调控作用,VEGF反义核酸可在分子水平上有效抑制VEGF表达。     

卵巢囊腺瘤的CT诊断

研究背景 胎儿超声心动图作为一种对胎儿及母体均无创伤的检查方法在临床逐渐得到推广应用。妊娠期母体合并症及胎儿畸形均可引起胎儿形态、发育及血流动力学改变。明确不同孕周正常胎儿的生长发育状态及血流动力学特点对发现胎儿期异常变化意义重大。目的 本研究通过对正常胎儿心脏径线及血流速度与孕周关系的研究,初步探讨应用二维超声心动图研究胎儿心脏发育趋势及其临床价值。方法 回顾性分析386例经二维超声心动图检查获得的胎儿心脏测量数据,统计分析心脏横径、左右房室横径、主动脉内径、肺动脉内径、主动脉及肺动脉流速、动脉导管舒张期和收缩期流速随孕周变化关系,分析正常胎儿心脏发育趋势,比较胎儿左右房室大小。结果 ①除胎心率与孕周无明显线性相关外,其他参数与孕周之间均呈线性正相关,随孕周增长而增大;心脏横径与孕周间的线性相关最明显,动脉导管舒张期流速受孕周影响最不明显;②右心房横径与左心房横径、右心室横径与左心室横径间差异有统计学意义,右心系统横径大于左心系统横径;③心脏横径/孕周比值均数为0.9562±0.1426,接近1.0。心脏横径/胸廓横径均数为0.4769±0.3023,接近0.5。结论 二维超声心动图可作为胎儿心脏发育评估的手段。随着胎儿超声心动技术的逐步开展应用,超声影像技术的不断发展,对胎儿心脏发育与血流动力学变化的研究将越来越深入,胎儿超声心动技术应用也将越来越广泛。     

载10-羟基喜树碱脂质超声微泡在小鼠体内的药代动力学研究

目的 制备载10-羟基喜树碱(HCPT)脂质超声微泡,检测其形态、粒径、电位,并探讨其在小鼠体内的药代动力学特征及在超声辐照下药物在小鼠肝脏的定位释放情况.方法 用机械振荡法制备载HCPT脂质超声微泡,在光学显微镜下观察其外观和分布情况,以马尔文激光粒径测量仪测量其粒径大小和Zeta电位;测定HCPT注射液、载HCPT脂质超声微泡(HLM)在不同时间点小鼠血浆中的药物浓度,数据用3P97药动学程序处理,得到各主要药代动力学参数;将实验小鼠分为HLM组、HLM辐照组、HCPT注射液组、HCPT注射液辐照组4组,分别注射HLM及HCPT注射液后,用一定声强的超声经体表定点辐照,用HPLC-荧光法测定小鼠肝脏中的HCPT含量.结果 光镜下观察载HCPT脂质超声微泡呈球形,粒径范围为(1.1±0.2)μm,平均粒径1.1 μm ,Zeta电位为-(3.9±0.8)mV;HLM及HCPT注射液的药-时曲线符合二室模型,HLM在多数取样时间点的血药浓度较HCPT注射液高,HLM在血浆中的消除半衰期(6.70 h)较HCPT注射液(1.12 h)明显提高,延长了药物在血浆中的滞留时间,同时提高了HCPT的生物利用度,其AUC(药-时曲线下面积)为HCPT注射液的5.5倍;HLM辐照组小鼠肝组织中的HCPT含量明显高于其余各组.结论 载HCPT脂质超声微泡粒径分布均一,可延长HCPT在体内的循环时间,在一定声强的超声定位辐照下能明显提高靶组织内的药物浓度.     

经腹腔腹腔镜单一体位肾输尿管全长切除术加膀胱袖套切除术治疗上尿路尿路上皮癌临床疗效分析

目的 分析经腹腔腹腔镜单一体位肾输尿管全长切除术加膀胱袖套切除术治疗上尿路尿路上皮癌的临床疗效。方法 回顾性分析2017年3月至2021年4月郑州大学第一附属医院泌尿外科收治的98例上尿路尿路上皮癌患者,其中A组48例给予经腹腔腹腔镜单一体位肾输尿管全长切除术加膀胱袖套切除术,B组50例先侧卧位行腹腔镜肾切除、输尿管部分游离后,改平卧位取下腹部切口开放性处理余下未游离的输尿管以及袖套状膀胱壁切除。2组患者术前均行输尿管镜检+活检以及术中膀胱灌注化疗。比较2组患者基本资料,术中出血量、手术时间、引流管引流量、引流管拔出时间、肠道功能恢复时间、住院时间、术后病理结果、术后3个月～2 a的肿瘤膀胱内复发率与远处转移率。结果 A组术中出血量、手术时间、引流管引流量、引流管拔出时间、肠道功能恢复时间、住院时间少于B组(t=10.403,P<0.001;t=11.521,P<0.001;t=26.850,P<0.001;t=12.000,P<0.001;t=9.049,P<0.001;t=8.590,P<0.001)。2组术后肿瘤分期、肿瘤分级构成比比较差异均无...     

超声激活血卟啉对肝癌细胞抗失巢凋亡的影响

目的 探讨超声激活声敏剂血卟啉对肝癌细胞株HepG2抗失巢凋亡的影响.方法 将HepG2细胞悬液随机分为4组:血卟啉组,培养液中加入血卟啉40μl孵育30 s;超声辐照组,以1.0 MHz、1.5 W/cm2超声辐照30 s;血卟啉与超声辐照组,同样方法予以血卟啉与超声联合处理;及空白对照组.各组处理后细胞一部分在软琼脂培养2周后观察其失巢生长能力,另一部分在铺有多聚羟乙基甲基丙烯酸树脂(polyhydroxy-ethylmethacrylate,poly-HEMA)的孔板中悬浮培养12 h后以Annexin V-FITC/PI双染法及24 h后以琼脂糖凝胶电泳检测其失巢凋亡情况.结果 血卟啉与超声辐照组HepG2细胞在软琼脂中不能形成集落,琼脂糖凝胶电泳显示出细胞凋亡特征性DNA ladder,其凋亡率为(14.89±2.82)%,与其余3组相比,差异均具有显著性.结论 血卟啉经超声激活后能抑制肝癌细胞株HepG2的抗失巢凋亡.     

TATp和CXCR4修饰的载V P3基因超声微泡制备及体外寻靶实验

目的：制备一种载VP3基因、反式激活转录激活肽（TATp）与基质细胞衍生因子‐1（SDF‐1）同时修饰的新型载基因高分子靶向超声造影剂,表征其性质。方法采用W／O／W双乳化法制备载基因超声微泡。并通过硫醚键将SDF‐1与TATp共价连接到聚乳酸／羟基乙酸共聚物（PLGA）微泡的表面,制备成靶向载基因超声微泡。Malvern测量仪测定其粒径、分布及表面电位,流式细胞仪及共聚焦显微镜检测TATp、SDF‐1在高分子微泡表面的连接状况,酶切反应实验鉴定其对DNA的保护性,光镜观察及流式细胞仪初步评估其体外寻靶能力,超声考察体外成像。结果靶向载基因超声微泡呈规则球形。粒径为（536．00±16．55）nm ,分布集中,表面电位为（－0．08±0．08）mV。平均载药量为0．62％,平均包封率为36．13％。对DNA保护作用持续60 min ,未见损坏。TATp、SDF‐1同时加载于PLGA微泡表面的连接率为69．84％。体外寻靶实验显示,靶向微泡较多地稳定簇聚在舌癌SCC‐15细胞膜上,连接率为91．44％。而非靶向微泡较少结合,连接率为12．96％。体外超声显像呈细小点状、均匀高回声。结论成功制备出TATp‐SDF‐1‐VP3‐PEG‐PLGA微泡,其能在体外高效靶向结合舌鳞癌SCC‐15细胞,且短时间穿过细胞膜。体外成像效果较好。     

针刀治疗肱骨外上髁炎的临床研究进展与展望

针刀疗法区别于传统手术治疗,也不同于针灸,而是有机整合了两者的特点。针刀疗法属于微创治疗技术,优点是对人体组织无不可逆损伤、创面不需缝合,且其操作简单、治疗过程时间短、感染发生率较低、疗效佳、花费少、患者接受度高,已逐渐成为目前临床治疗肱骨外上髁炎（网球肘）的重要方法之一。从肱骨外上髁炎的病因病机、针刀治疗肱骨外上髁炎的机制、针刀疗法在肱骨外上髁炎临床治疗中的应用、小结与展望4个方面进行综述。