内毒素活化和耐受的巨噬细胞差异表达基因分析

目的　分析内毒素活化的和内毒素耐受的巨噬细胞差异表达基因 ,以探讨内毒素耐受的分子机制。方法　分离小鼠腹腔巨噬细胞 ,活化组直接以 1mg/L脂多糖处理 2h ,耐受组先以脂多糖预处理 2 0h ,再以脂多糖处理 2h。利用含 1176个基因的小鼠cDNA表达芯片进行基因表达谱分析。结果　活化组与耐受组间的 3倍差异表达基因为 3 1个 ,其中耐受组有 8个基因的表达水平明显高于活化组 ,包括细胞表面抗原FcgammaRIIb、间隙连接蛋白 43、凋亡相关蛋白NIP3、iN OS、骨髓间充质细胞抗原 (BST) 1以及激活素和卵泡抑素等 ,有 2 3个基因的表达水平明显低于活化组 ,包括转录因子EPAS1、EGR2、IRF1,细胞周期素依赖性蛋白激酶 p2 1和p5 7,骨桥蛋白 ,尿激酶型纤溶酶原激活物及其受体 ,以及多种生长因子受体和细胞因子。结论　这些差异表达基因多数未曾报道与内毒素耐受相关 ,可能在内毒素的发生中具有重要作用 ,并成为内毒素耐受的新的标志分子 ,对其进行干预有可能模拟内毒素耐受的保护效应。     

应用淋巴细胞分离液纯化大鼠胰岛的实验研究

目的：建立一种简便、易行和高效的胰岛分离纯化方法,以减少对胰岛细胞的损伤,获得高质量的胰岛组织。方法：选用SD大鼠经胆总管原位灌注胶原酶液,分离消化胰腺组织,用淋巴细胞分离液(histopaque-1077)纯化胰岛细胞。结果：可收获大量的高纯度胰岛,纯度达95％以上,体外葡萄糖刺激实验表明胰岛对刺激反应良好,将胰岛移植于糖尿病小鼠体内可短期纠正其高血糖状态。结论：应用单一密度淋巴细胞分离液纯化大鼠胰岛的方法是一种操作简单、价格低廉、重复性好的大鼠胰岛纯化方法。     

基因治疗与胰岛素依赖型糖尿病

近年来许多研究致力于探索胰岛素依赖型糖尿病基因治疗的途径和可行性。首先可利用各种现代分子生物学技术改造胰岛Ｂ细胞系或建立人工Ｂ细胞，以获得能够分泌胰岛素并可对引起胰岛素分泌的生理刺激作出正确反应的各种细胞，然后再进行细胞移植。另外还可通过体内胰岛素基因转移直接在体内表达胰岛素     

在持续肝门阻断时保留肝动脉血液供应对肝细胞的保护作用

 目的 研究在持续肝门阻断时保留肝动脉血液供应的安全性及其对肝细胞的保护作用.方法 设立对照组(SO组)、完全肝门阻断组(OPT组)和保留肝动脉持续阻断门静脉组(OPV组),通过测量3组肝断面出血量、安全时限、对肝脏的缺血再灌注损伤程度、对肝细胞能量代谢的影响以及病理学改变来评价肝门阻断时保留肝动脉血供对肝细胞的保护程度.结果 OPT组和OPV组相比肝断面出血量无统计学差异,耐受肝门阻断的安全时限OPV组为110 min,比OPT组平均延长20 min,复流后1 h和复流24 h,OPT组和OPV组的ALT、AST和MDA值对比有明显统计学差异(P<0.01);Na+-K+ATP酶的活性复流后1 h,OPT组和OPV组对比有明显统计学差异(P<0.01);复流后24 h,对比无统计学差异(P>0.05),病理组织学OPV组肝细胞损伤程度明显较OPT组轻.结论 在持续肝门阻断时保留肝动脉血液供应可以减轻对肝细胞缺血再灌注损伤,延长由于阻断肝门血流而引起的肝细胞能量衰减时间,使大鼠能够耐受更长时间的持续阻断,且不会增加肝断面的失血量,是值得推广的肝门阻断方法.     

海藻酸盐—多聚赖氨酸—海藻酸盐微胶囊膜的强度和生物相容度测定

目的：了解我们所制作的海藻酸盐－多聚赖氨酸－海藻酸盐（APA）微囊的生物相容性、机械和化学强度。方法：用静电微囊发生器制作海藻酸盐－多聚赖氨酸－海藻酸盐的APA微胶珠及枸橼酸钠液化微珠芯的APA微胶囊。用振摇法比较微囊与微珠的机械强度。用不同酸碱度溶液测定微囊的化学强度。用微囊小鼠腹腔移植法观察APA微囊的生物相容度。结果：（1）机械振摇48h的破损率;微囊为5％;微珠为31％;（2）Ph7.4对APA微囊的化学损伤最小;（3）移植后1周、2周、4周、8周和10周从小鼠腹腔内取出的微囊95％－98％为完整、圆形、表面光滑、无明显的结缔组织包绕。结论：我们所制作的APA微囊具有较好的生物相容度、机械和化学强度。     

一种新的复合型野战创伤早期抗休克液的实验研究

目的 依据失血性休克发生的理论基础和长期的临床实践经验,配制一种新的"复合型战地抗休克液",并利用大鼠失血性休克模型进行评价.方法 建立大鼠失血性休克模型.以乳酸林格液和羟乙基淀粉的2∶1混合液(LH)作为对照组休克复苏液;以添加地塞米松和呋塞米的LH作为加药组休克复苏液;复苏4 h后取血和器官标本检测生化、肝功能指标和肺组织含水量,并观察组织病理学变化.结果 两组液体均可使失血性休克大鼠平均动脉压恢复到基础值.与对照组比较,加药组血生化指标均无明显差异,但大鼠复苏后肺组织湿/干重比值明显降低(4.56±0.14比4.88±0.29,P＜0.05),丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)水平显著下降[ALT:(73.02±41. 89)U/L比(193.85±104.49)U/L;AST:(199.06±108.70)U/L比(395.25±137.08)U/L,均P＜0.05],利尿作用明显[开始排尿时间:(76±20)min比(153±14)min;尿量:(9.6±5.2)ml比(1.5±2.2)ml,P＜0.01和P＜0.05],腹水量减少[(1.3±0.6)ml比(5.0±3.0)ml,P＜0.05].肝、肺和小肠组织病理学观察也显示加药组损伤轻于对照组.结论 本研究中设计的"复合型战地抗休克液"配方简单,用于大鼠失血性休克复苏可快速恢复并稳定血流动力学,同时可起到减轻组织水肿及肝、肺、小肠损伤的作用.

Abstract：

Objective To propose a resuscitation fluid with a new formula for resuscitation of shock in battlefield on the basis of pathogenesis of hemorrhagic shock and clinical experiences, and to evaluate its safety and effectiveness in a rat hemorrhagic shock model. Methods After hemorrhagic shock was (referred to as LH)was used for resuscitation in animals of control group; LH supplemented with dexamethasone and furosemide(referred to as LHDF)was used as resuscitation fluid for experimental group.After 4 hours of infusion, blood and major organs were obtained for serum biochemical tests, lung water content measurement and histopathological observation. Results The mean arterial pressure of rats of both control and experimental groups recovered rapidly after resuscitation. There was no significant difference in the parameters of serum biochemistry between control group and experimental group. The wet/dry weight ratio of lung tissue in experimental group was significantly lower than control group(4. 56±0. 14 vs. 4. 88±0. 29, P＜0. 05). The blood alanine aminotransferase(ALT)and aspartate aminotransferase(AST)levels in experimental group were also significantly lower than in control group[ALT:(73. 02±41.89)U/L vs.(193. 85 ± 104. 49)U/L; AST:(199.06 ± 108. 7)U/L vs.(395.25 ± 137.08)U/L, both P＜0. 05).Diuretic effect was obviously observed in experimental group than control group[time of start urination:(76±20)minutes vs.(153±14)minutes; urine volume:(9. 6±5. 2)ml vs.(1.5±2. 2)ml, P＜0. 01 and P＜0. 05], and the amount of ascitic fluid in experimental group was significantly lower than in control group [(1.3 ± 0. 6)ml vs.(5.0 ± 3.0)ml, P＜ 0. 05). Histopathological observation of the liver, lung and intestine also showed less pathological changes in experimental group than in control group. Conclusion The designed battlefield anti-shock fluid in this study has been shown to be effective in fluid resuscitation for hemorrhage shock in rats, with reduced tissue edema and less injury to the liver, lung and intestine.