SLE患者外周血T、B淋巴细胞TLR9蛋白表达及与临床指标的关系

Objective To study the expressions of Toll-like receptor 9 protein (TLR9) in peripheral B and T lymphocytes in newly diagnosed, untreated patients with systemic lupus erythematosus (SLE) and their relationship with clinical parameters. Methods Blood samples were obtained from 35 newly diag-nosed, untreated patients with SLE and 16 healthy human controls. B, T lymphocytes and TLR9 protein were labeled with fluorescent antibodies, and the expressions of TLR9 protein were detected by flow cytometry in peripheral B and T lymphocytes. The relationship between TLR9 expression and clinical parameters was assessed. Results The proportions of B and T lymphocytes expressing TLR9 in newly diagnosed, untreated patients were (53.94±17.95)% and (49.33 ± 23.30)%, respectively, compared to (29.40 ± 10.54)% and (29.18 ± 14.78)%, respectively, in healthy controls (t = 6.11,3.73, respectively, both P < 0.01). Additionally,the proportion of B lymphocytes expressing TLR9 correlated negatively with SLE disease activity index (SLEDAI)(r = -0.39, P < 0.05), but positively with the level of serum IgA antibody (r = 0.74, P < 0.01).Condnsions The expression of TLR9 is elevated in peripheral T and B lymphocytes from patients with newly diagnosed, untreated SLE, and the proportion of TLR9-expressing B lymphocytes negatively correlates with SLEDAI, but positively correlates with the serum level of IgA antibody.     

SLE患者外周血T、B淋巴细胞TLR9蛋白表达及与临床指标的关系

Objective To study the expressions of Toll-like receptor 9 protein (TLR9) in peripheral B and T lymphocytes in newly diagnosed, untreated patients with systemic lupus erythematosus (SLE) and their relationship with clinical parameters. Methods Blood samples were obtained from 35 newly diag-nosed, untreated patients with SLE and 16 healthy human controls. B, T lymphocytes and TLR9 protein were labeled with fluorescent antibodies, and the expressions of TLR9 protein were detected by flow cytometry in peripheral B and T lymphocytes. The relationship between TLR9 expression and clinical parameters was assessed. Results The proportions of B and T lymphocytes expressing TLR9 in newly diagnosed, untreated patients were (53.94±17.95)% and (49.33 ± 23.30)%, respectively, compared to (29.40 ± 10.54)% and (29.18 ± 14.78)%, respectively, in healthy controls (t = 6.11,3.73, respectively, both P < 0.01). Additionally,the proportion of B lymphocytes expressing TLR9 correlated negatively with SLE disease activity index (SLEDAI)(r = -0.39, P < 0.05), but positively with the level of serum IgA antibody (r = 0.74, P < 0.01).Condnsions The expression of TLR9 is elevated in peripheral T and B lymphocytes from patients with newly diagnosed, untreated SLE, and the proportion of TLR9-expressing B lymphocytes negatively correlates with SLEDAI, but positively correlates with the serum level of IgA antibody.     

呼吸机流量时间曲线判断气管插管后导管位置

目的比较以呼吸机流量时间曲线和传统方法判断保留自主呼吸的患者气管插管后导管位置的快捷性和准确性。方法选择82例保留自主呼吸的急诊气管插管成年患者,随机分为流量时间曲线组和传统方法组,各41例,分别以呼吸机流量时间曲线和传统方法判断气管插管后导管位置,比较两种方法的判断时间和判断准确率。结果判断时间:流量时间曲线组3.24±1.28 s,传统方法组12.81±9.21 s,P<0.0001。准确率:流量时间曲线组100%,传统方法组97.56%,P=0.314。结论对于保留自主呼吸的气管插管患者,以呼吸机流量时间曲线判断气管插管后导管位置的快捷性优于传统方法,同时具有高度的准确性。     

聚合物-脂质纳米粒用于增强酪氨酸血症I型治疗性碱基编辑器质粒的肝靶向递送研究（英文）

酪氨酸血症I型是一种罕见的常染色体隐性遗传病,目前尚无有效的治疗方法。近年来,以碱基编辑器为代表的基因编辑技术已被报道用于酪氨酸血症I型的治疗。然而,由于生理屏障的存在,碱基编辑器递送困难。在本研究中,我们构建了一种靶向去唾液酸糖蛋白受体的聚合物-脂质纳米递送系统,用于改善酪氨酸血症I型治疗性核酸药物的递送效率。我们首先合成了一种生物可降解性丙烯酸酯-氨基醇共聚物用于递送碱基编辑器质粒,其转染效率显著优于市售转染试剂Hieff Trans^TM。随后,共聚物纳米粒与DOPE-PEG-Gal NAc自组装形成聚合物-脂质纳米粒,用于增强纳米粒的肝脏递送效率。在体外转染实验中,包载Fah-p CMV-ABE6.3-EGFP碱基编辑器质粒的聚合物-脂质纳米粒表现出了良好的肝细胞选择性,其转染效率是游离质粒的70倍以上。研究表明,携带肝靶向配体的聚合物-脂质纳米递送系统能够有效增强治疗性碱基编辑器质粒的肝靶向递送效率并为酪氨酸血症I型的基因治疗提供了一种潜在的递送载体。     

c(RGD)2与Angiopep-2共修饰的脂质体的制备、131I标记与生物分布特征

目的 为制备具有穿透血脑屏障和血脑肿瘤屏障能力及靶向脑胶质瘤的脂质体载体,合成以靶向肿瘤新生血管的c(RGD)₂肽与脑靶向肽Angiopep-2共修饰的脂质体,用¹³¹I标记并研究其生物分布特征。方法 将c(RGD)₂与Angiopep-2分别与DSPE-PEG2000偶联,用氢化大豆磷脂、胆固醇、DSPE-PEG2000-Angiopep-2和DSPE-PEG2000-c(RGD)₂按摩尔比为60∶34∶3∶3制备脂质体,采用氯胺T法进行¹³¹I标记,测定¹³¹I标记的c(RGD)₂与Angiopep-2共修饰的脂质体在小鼠体内的生物分布。结果 所合成的DSPE-PEG2000-Angiopep-2与DSPE-PEG2000-c(RGD)₂经质谱测定的分子量与理论值相符;c(RGD)₂与Angiopep-2共修饰的脂质体的平均粒径为143.2±13.8nm,多分散系数(PDI)为0.214...     

血小板特异性自身抗体和淋巴细胞亚群检测在免疫性血小板减少症中的临床价值

目的检测血小板特异性自身抗体和外周血淋巴细胞亚群在免疫性血小板减少症(ITP)患者中的水平,并探讨两者之间的联系以及自身抗体与ITP病情间的关系,评价其在ITP中的临床价值。方法应用改良的单克隆抗体俘获血小板抗原(MAIPA)法检测40例ITP患者血小板膜糖蛋白(GPⅡbⅢa、GPIbα)特异性自身抗体;利用流式细胞术(FCM)检测ITP患者外周血淋巴细胞亚群(CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD19+、CD19+CD5+)水平。结果 ITP组抗GPⅡbⅢa抗体阳性30例,抗GPIbα抗体阳性26例,其中25%患者仅为单一抗GPⅡbⅢa抗体阳性,15%患者仅为单一抗GPIbα抗体阳性,50%患者为双抗体阳性,10%患者为双抗体阴性。非免疫性血小板减少组与对照组均为阴性。单抗体阳性组采血时血小板计数平均值明显低于双抗体阴性组(P<0.05);双抗体阳性组血小板计数平均值亦明显低于单抗体阳性组和双抗体阴性组(P<0.05)。ITP组与正常对照组相比较,CD3+T淋巴细胞、CD3+CD4+T淋巴细胞百分率以及CD3+CD4+/CD3+CD8+比例减低,CD3+CD8+T淋巴细胞、CD19+B淋巴细胞、CD19+CD5+B淋巴细胞百分率均明显高于对照组(P<0.05)。双抗体阳性组CD19+B淋巴细胞、CD19+CD5+B淋巴细胞百分率明显高于单抗体阳性组(P<0.05)。结论血小板特异性自身抗体检测对鉴别ITP和非免疫性血小板减少症有一定价值,自身抗体与ITP的病情有一定关系;血小板特异性自身抗体和T、B淋巴细胞可能共同参与了ITP的发病过程,并在其中起重要作用。     

脐血和合并乙型肝炎病毒感染肝癌患者来源CIK细胞的增殖及杀伤活性

目的：观察脐血和乙型肝炎病毒感染肝癌患者外周血诱导的CIK细胞的体外增殖能力及杀伤活性的特点。方法： 分别采集解放军第105医院妇产科住院的健康产妇剖宫产胎儿的脐带血5份（A组）、感染科住院的合并乙型肝炎病毒感染的原发性肝癌患者自体外周血15份（B组）、无乙型肝炎病毒感染的原发性肝癌患者自体外周血5份（C组）,采用Ficoll两步分离法分离出单个核细胞,细胞因子诱导培养成细胞因子诱导的杀伤(ClK)细胞,流式细胞仪检测CIK细胞的免疫表型CD3＼CD8＼CD16＼CD56,MIT法测定其对白血病K562细胞的杀伤活性。结果：体外培养15 d时, C组CIK细胞体外增殖倍数与A组相似\[（577.24±202.4）vs（600.93±249.1）倍, P >0.05\],该两组均显著高于B组\[（385.16±117.3）倍, P <0.05\];A组CIK细胞杀伤活性显著高于B组和C组\[（77.3±5.1）% vs （44.1±3.4）%、（54.5±3.7）%, P <0.01\]。结论： 脐血来源的CIK细胞体外增殖快、杀伤活性强;合并有乙型肝炎病毒感染的肝癌患者CIK细胞体外增殖能力和杀伤能力明显降低,不宜接受自体CIK细胞移植。     

miR-146b-5p靶向E3泛素蛋白连接酶促进高糖诱导的小鼠腹膜间皮细胞上皮间质转化

目的 探讨miR-146b-5p与E3泛素蛋白连接酶(ZNRF3)对高糖诱导的小鼠腹膜间皮细胞上皮间质转化(EMT)进程的影响及作用机制。方法 正常培养的小鼠为对照组,采用4.25%葡萄糖透析液和0.1 mg/kg的脂多糖诱导腹膜纤维化小鼠模型,收集小鼠腹膜组织,Masson染色观察腹膜组织胶原纤维变化,免疫组化法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和I型胶原(COL I)表达。Western blot检测腹膜组织上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、α-SMA和COL I表达。qRT-PCR检测腹膜组织中miR-146b-5p和ZNRF3表达。双荧光素酶报告基因检测验证miR-146b-5p和ZNRF3靶向关系。分离对照组小鼠腹膜间皮细胞,高糖诱导构建小鼠腹膜间皮细胞纤维化模型,将细胞分为对照组、模型组、mimic-NC组、miR-146b-5p-mimic组和miR-146b-5p-inhibitor组。Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力。Western blot检测EMT相关蛋白表达。结果 与对照组小鼠比较,模型组小鼠腹膜组织增厚,胶原纤维增多,α-SMA和COL I表...     

铝对大鼠神经干细胞向神经元细胞分化的影响

目的探讨铝对大鼠神经干细胞向神经元样细胞分化的影响。方法取孕12～12.5dSD大鼠胚胎的大脑皮层细胞体外培养,建立神经干细胞模型。用Nestin免疫细胞化学法鉴定神经干细胞,在细胞对数增长期加入不同浓度的AlCl3(400、200、100μmol/L),接触24h后,用DMEM(含1?7)培养基培养7d,免疫细胞化学染色比较各组MAP2阳性细胞率。用生物图像处理系统(包括NikonE800u显微镜,Spot2冷彩色数码摄像系统,MetaMorph图像分析软件)分析神经元树突分枝的数量和MAP2阳性细胞光密度(OD)值。结果与对照组相比,100μmol/LAlCl3组神经干细胞分化为MAP2阳性细胞率(%)、神经元树突分枝和MAP2阳性细胞光密度值均没有明显差异(P=0.082,P=0.117,P=0.086),但200μmol/L和400μmol/LAlCl3组与对照组相比均有明显降低(P<0.01),并且有良好的剂量-反应关系。结论AlCl3不仅能够抑制大脑神经干细胞向神经元样细胞分化,还减少了神经元分枝和延缓了其成熟。这可能在铝导致的神经发育毒性作用中起重要的作用。     

机械通气治疗急性中毒致呼吸衰竭32例

急性中毒导致呼吸衰竭在临床上很常见 ,最有效的办法是机械通气 (MV)治疗。我科 2 0 0 0年 1月— 2 0 0 1年 12月抢救此类患者 32例 ,报告如下。1　病例与方法1.1　病例 :32例患者中男 2 0例 ,女 12例 ;年龄 12～ 35岁 ;中毒药物 :有机磷农药中毒 2 0例 ,镇静安眠药中毒 8例 ,毒鼠强中毒 4例。1.2　治疗方法 :常规洗胃、导泻、灌肠、大量补液利尿、使用特殊解毒剂治疗 ,纠正酸碱和电解质紊乱。对出现呼吸困难、紫绀的危重患者 ,给予面罩给氧 ,动脉血氧分压 (Pa O2 ) <6 0 mm Hg(1m m Hg=0 .133k Pa) ,动脉血二氧化碳分压(Pa CO2 ) >6 0 …