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目的 使用慢病毒载体构建稳定过表达人内源性逆转录病毒H-长末端重复关联蛋白2(HHLA2)的胃癌细胞系,探讨细胞发生的生物学功能改变。方法 由目的基因以及Lipo2000转染试剂构建重组质粒,将该质粒转染293T细胞,浓缩其细胞上清液并测定浓度,再将浓缩液转染胃癌细胞株BGC-823和MGC80-3,利用流式细胞术分选并验证GFP+稳定过表达的细胞株。开展细胞功能实验(含迁移试验和增殖试验等)以分析过表达HHLA2胃癌细胞株的生物学功能。结果 酶切及测序结果示,重组慢病毒载体成功构建。流式分选及验证示,HHLA2过表达胃癌稳转株。过表达HHLA2可使胃癌细胞株MGC80-3和BGC-823加快增殖,其24 h、48 h、72 h吸光度值均较对照细胞株升高(P<0.05)。过表达HHLA2可增强胃癌细胞株BGC-823的迁移能力,其24 h、48 h迁移率均较对照细胞株升高(P<0.05);MGC80-3细胞迁移距离未明显变长(P>0.05)。结论 HHLA2过表达能够提高胃癌细胞的增殖和迁移能力。 相似文献
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84.
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目的探讨脂肪量和肥胖相关基因(FTO)在结肠癌组织的表达及其生物学功能。方法采用实时定量聚合酶链反应检测并分析FTO在结肠癌组织与癌旁组织中的表达特征及临床意义。利用RNA干扰(RNAi)技术构建FTO稳定下调表达的结肠癌细胞株SW620和Caco-2,通过细胞计数试剂盒(CCK-8)细胞增殖实验、划痕实验进一步研究FTO下调表达对结肠癌细胞株生物学行为的影响。结果结肠癌组织中FTO的mRNA表达水平显著高于癌旁正常组织(t=10.310,P<0.01);FTO mRNA在肠癌细胞中的表达水平显著高于正常肠上皮细胞株(HT-29为,t=18.730,P<0.01;HCT-116为,t=3.700,P<0.05;SW620为,t=4.060,P<0.05;LoVo为,t=5.580,P<0.01;SW48为,t=16.640,P<0.01;DLD-1为,t=7.260,P<0.01;Caco-2为,t=9.640,P<0.01),差异均有统计学意义。CCK-8增殖实验结果显示,LV-FTO-shRNA组中结肠癌细胞的增殖能力低于shNC组(SW620,24 h为,t=4.660,P<0.01,48 h为,t=3.760,P<0.01,72 h为,t=3.370,P<0.05;Caco-2,24 h为,t=3.680,P<0.05,48 h为,t=3.630,P<0.05,72 h为,t=4.180,P<0.01),差异均有统计学意义;划痕试验结果显示,划痕24 h后,LV-FTO-shRNA组的无细胞区域显著宽于LV-NC组(SW620为,t=34.070,P<0.01;Caco-2为,t=31.680,P<0.01),差异均有统计学意义。结论FTO在结肠癌组织及结肠癌细胞株中高表达,FTO的下调表达显著抑制结肠癌细胞的增殖和迁移能力,提示FTO异常表达是促进结肠癌进展的重要因素。 相似文献
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目的监测深圳口岸国际旅行人员中HIV感染者HIV-1亚型的流行状况。方法从69份HIV-1抗体阳性血浆中提取病毒总RNA,通过逆转录和巢式PCR技术扩增HIV—1 gag和p02基因,再对PCR产物进行核苷酸序列测定,并对所获得的序列进行分析来确定基因亚型。结果69份样品中共发现9种HIV-1亚型和重组亚型,其中CRF01-AE重组亚型28份,B亚型21份,CRF02_AG重组亚型4份,C亚型4份,G亚型3份,CRF07_BC重组亚型3份,CRF08_BC重组亚型3份,A1亚型2份,D亚型1份。这些不同亚型的感染者来自包括中国在内的19个不同国家。结论深圳国际旅行人员中HIV-1亚型和重组亚型种类复杂多样,监测国际旅行人员中HIV感染者基因型分布情况,对及时发现新型毒株,预防和控制艾滋病十分重要。 相似文献
87.
目的 探讨出入境人群HCV的基因分型,并分析HCV不同基因型与病毒载量、ALT活性水平的相互关系。方法 对72542名出入境人员进行HCV抗体检测,对抗-HCV阳性标本进行HCV基因分型。以荧光定量PCR测定HCVRNA载量,同时检测ALT活性。结果 共发现197份标本呈抗-HCV阳性,阳性率为0.27%,其中出境人员阳性率为0.24%。入境人员阳性率为0.31%。抗-HCV阳性标本经PCR检测基因分型后发现110份标本含有HCVRNA,共发现5种基因型,其中1b占40.0%、6a占30.0%、2a占14.5%、1a占8.2%、2b占7.3%。中国大陆人群与中国香港及其他国家人群的各基因型分布无明显差异。各基因型群间与HCVRNA载量差异具有统计学意义(P〈0.05),2a型人群HCVRNA载量明显高于其他各型人群(P〈0.05)。不同基因型人群间ALT水平差异无统计学意义。HCV RNA拷贝量与ALT活性无相关性。结论 HCV-1b为优势基因型。对HCV基因分型以厦PCR病毒载量和LAT活性检测。实行HCV实时监测具有重要的意义。 相似文献
88.
〔目的〕了解深圳口岸外籍人员中登革病毒(Dengue Virus,DV)感染状况,为我国口岸登革热防控措施提供依据。〔方法〕用酶联免疫吸附试验(ELISA)对2008年8—9月入境体检的外籍人员进行血清DV IgM、IgG抗体检测,ELISA可疑结果采用登革热IgG/IgM联合快速检测卡进行复检以最终判定结果。〔结果〕共对440名外籍人员进行了血清DVIgM、IgG抗体检测,IgM抗体阳性率为2.27%(10/440),IgG抗体阳性率为1.14%(5/440)。未检出IgM、IgG抗体均阳性者。东南亚地区人员的DV IgM、IgG抗体阳性率分别为7.59%(6/79)和3.80%(3/79);拉丁美洲人员的DV IgM和IgG抗体阳性率均为6.67%(1/15);北美地区人员的DV IgM抗体阳性率为0.99%(1/101)且未检出DV IgG抗体阳性者;欧洲地区人员的DVIgG抗体阳性率为1.59%(1/63)且未检出DVIgM抗体阳性者;非洲和大洋洲人员均未检测出DV抗体阳性者。〔结论〕与其他地区相比,东南亚和拉丁美洲入境人员携带DV的可能性较大。随着全球人口流动的日益频繁,应进一步加大对口岸传染病的防控力度。 相似文献
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目的:探讨肿瘤体外药物敏感实验ATP生物荧光法(ATP-TCA法)在筛选乳腺癌常用化疗药物中的应用。方法:采用ATP-TCA法,对4组不同乳腺癌常用化疗药物选择相同规格、不同厂家共8种品规药品,同时检测对30例乳腺癌标本的杀伤效果,以比较同种乳腺癌细胞对抗肿瘤药品的敏感性。结果:ATP-TCA肿瘤药敏检测技术在乳腺癌标本中的可评价率为90%(27/30),4种药物对乳腺癌细胞株的敏感性顺序为紫杉醇(PTX)>长春瑞滨(NVB)>阿霉素(ADM)>丝裂霉素(MMC);不同厂家生产的同一种化疗药物的敏感性基本上具有一致性,但是也有个别具有差异性。结论:ATP-TCA法可应用于临床作为乳腺癌化疗药物的筛选。 相似文献
90.
目的 评价高血压患者的心率变异性(HRV)减低与心血管事件的关系。方法 选择高血压患者50例,其中不伴左室肥厚(LVH)患者28例,伴LVH患者22例;选择健康者20例作为对照组。进行24h动态心电图监测,观察这50例高血压患者住院期间心血管事件发生情况,分析高血压不伴LVH者、伴LVH者、健康者以及高血压患者中心血管事件发生者与未发生者的24hHRV时域和频域指标。结果 高血压伴LVH组的各时域和频域指标均较对照组明显减低,亦较高血压不伴LVH组有降低趋势;高血压患者中心血管事件发生者的83.3%为LVH患者,且心血管事件发生者较不发生者的HRV显著减低。结论 高血压尤其是伴LVH的患者HRV减低,即自主神经对心脏的调节能力减弱,HRV可作为高血压患者心血管事件发生的无创性预测指标。 相似文献