体外培养细胞原位包埋电镜样品的制作方法

目的:探讨一种快速简单的单层细胞原位包埋及电镜样品的制作方法,避免离心法等对细胞造成伤害以致影响电镜下细胞结构的观察?方法:将细胞培养在盖玻片上并进行原位包埋,通过置入液氮冷却的方式迅速彻底分离树脂与玻片上的细胞层?结果:此方法所得细胞的超微结构清晰,损伤明显减少?结论:体外培养细胞原位包埋电镜样品的制作方法快速简单,对细胞伤害少,完全可以满足科研和临床病理诊断的需要?     

HSPgp96和LPS激活小鼠腹腔巨噬细胞的比较研究

目的:比较HSPgp96与LPS对巨噬细胞免疫功能的激活作用。方法:培养小鼠腹腔巨噬细胞,分组用PBS、HSPgp96和LPS诱导后,在不同时间用酶法测定NO生成量。按效靶比10:1加入H22肝癌细胞,24h后靶细胞进行单细胞凝胶电泳,染色观察。在不同时间用激光扫描共聚焦显微镜观测巨噬细胞MHC-Ⅱ和CD86的表达。结果:LPS和HSPgp96促进巨噬细胞NO生成的作用相当,并随作用时间延长而增加。巨噬细胞攻击后的靶细胞呈现DNA损伤后的彗星现象。LPS和HSPgp96均促进巨噬细胞MHC-Ⅱ和CD86的表达,但HSPgp96诱导组表达更快更强。结论:与LPS相比,HSPgp96活化小鼠腹腔巨噬细胞细胞毒活性的作用相当,而诱导抗原提呈功能的作用更强。     

不同剂量布托啡诺硬膜外注射对大鼠血清髓鞘碱性蛋白与脊髓形态学的影响

目的 观察硬膜外注射不同剂量的酒石酸布托啡诺(布托啡诺)对大鼠血清髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)和脊髓形态学的影响.方法 雄性SD大鼠,体重180 g～210 g,于L1-2处行硬膜外置入PE-530导管,3d后,取无运动障碍的大鼠32只,随机数字表法分为4组(每组8例):生理盐水组(...     

持续湿化法在机械通气患者气道护理中应用的系统评价

建立人工气道后支气管内黏液黏稠度增加，纤毛清除作用降低，气管内容易形成干痂，痰块不易排出。这不仅会使呼吸道的抗感染能力明显下降，还可使肺表面活性物质遭到破坏而导致肺顺应性下降，影响呼吸功能。因此，有效的气道湿化极其重要，这也是人工气道患者日常护理中最常遇到的工作。目前临床上最常用的气道湿化方式有持续湿化法和间断湿化法2种，但此两者临床效果的优劣尚无定论。     

黄芪皂苷对培养的小鼠腹腔巨噬细胞的激活作用

目的：观察黄芪皂苷(AS)对巨噬细胞的免疫激活作用,探讨其调节机体免疫功能的机制。方法：在体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞中加入不同浓度的AS后，观察其对巨噬细胞一氧化氮(NO)合成及对肿瘤细胞杀伤活性的影响；透射电子显微镜观察巨噬细胞的超微结构改变；应用激光扫描共聚焦显微术，结合荧光探针Fluo-3/AM、观察AS引起巨噬细胞内Ca²⁺的变化。结果：50-800 mg/L AS 作用细胞24 h后，NO分泌量增加，杀瘤活性加强，且呈量－效依赖关系。400 mg/L AS作用细胞24 h后，透射电子显微镜观察可见细胞表面突起增多、增粗、增长；滑面内质网、溶酶体增多；50-800 mg/L AS 作用细胞4 h后，细胞内Ca²⁺的浓度升高，并与药物浓度呈正相关。结论：AS 可通过使巨噬细胞NO分泌水平增加、细胞毒作用增强从而增强巨噬细胞的免疫调节功能，其调节机制可能与其引起细胞内Ca2+ 的浓度升高有关。     

gp96-肽复合物体外诱导CTL反应及其抗肿瘤效应研究

目的研究小鼠肝癌腹水瘤H22细胞来源的gp96-肽复合物体外诱导小鼠脾淋巴细胞特异性细胞毒T细胞的产生及其抗肿瘤效应.方法利用蛋白提取纯化技术、Western-blot法、细胞培养技术、流式细胞术、CCK-8法、RT-PCR法等研究gp96-肽复合物体外诱导扩增CTL及其抗肿瘤效应.结果流式细胞仪检测表明,经gp96-肽复合物诱导后的CD8 T细胞比例达到近70%,远远高于对照组的35%、26%.该活化的CTL细胞在效靶比为50:1时的肿瘤杀伤率达72%与对照组相比具有统计学意义;将活化的CTL细胞回输小鼠体内能产生对该肿瘤细胞良好的过继性免疫保护,延长荷瘤小鼠的生存时间;RT-PCR法检测该活化的脾细胞较正常脾淋巴细胞高表达IFN-γ mRNA.结论肿瘤来源的热休克蛋白gp96-肽复合物能诱导小鼠脾淋巴细胞的CTL反应,并增强脾细胞 IFN-γ mRNA的表达,该CTL具有特异性抗H22肿瘤细胞的免疫保护作用.     

茶水发酵法制备细菌纤维素及其相关性能研究

目的制备纳米细菌纤维素膜,并对其形貌及相关性能进行检测。方法用红茶菌做菌种通过茶水发酵法制备纳米细菌纤维素,利用扫描电镜对其进行形貌结构观察,并对其吸水性、拉伸强度和断裂伸长率等性能进行的检测。结果新鲜制备的细菌纤维素膜为无色半透明胶冻状膜,表面光滑;膜呈疏松的网状结构;其吸水率达到90.5%,而其干膜的再次吸水率仅为70%左右;其拉伸强度及断裂伸长率分别为21.05 MPa及1.8%。结论本研究表明该方法制备的细菌纤维素具有良好的吸水性及机械性能,有广泛的应用前景。     

组织工程化纳米细菌纤维素管体内生物相容性研究

通过肌肉植入试验,初步探讨组织工程化纳米细菌纤维素管的体内生物相容性.利用茶水发酵法培养红茶菌,制备纳米细菌纤维素并使之成管,扫描电镜观察其表面结构.将消毒后的纤维素管植入大鼠大腿肌肉内贴近坐骨神经处,分别于第1、2、6周各随机抽取6只大鼠灌流固定、取材,做大体观察、组织学观察及血液学检查.扫描电镜观察显示,细菌纤维素管壁由细菌纤维素条相互交织,形成不规则的、疏松的网状或絮状多孔结构.材料植入后第1周,可见材料周围有较厚的结缔组织包裹,与周围组织粘连较明显,光镜下有较多的中性粒细胞和少量的单核细胞、淋巴细胞浸润,同时周围肌肉组织炎症细胞浸润明显,以中性粒细胞为主;植入后第2周结缔组织包裹明显缩小,管壁周围的炎性反应明显减轻,以中性粒细胞、淋巴细胞为主,周围肌肉组织的炎性反应亦明显减轻,同时偶可见嗜酸性粒细胞和巨噬细胞;植入后第6周,材料与周围组织分界清楚,仍然有结缔组织包裹,炎细胞数量明显减少,以淋巴细胞为主,周围肌肉组织未见明显炎症细胞浸润,同时材料开始轻度降解.血常规和血生化指标检测显示,各时间点与正常大鼠数据间的差异无统计学意义.组织工程化纳米细菌纤维素管在短期观察中,具有良好的体内生物相容性.