粪便标本中 SFRP1和 WIF-1基因启动子甲基化在大肠癌早期筛查中的意义

目的：探讨联合检测粪便中分泌型卷曲蛋白1（SFRP1）和Wnt途径抑制因子-1（WIF-1）基因启动子甲基化作为大肠癌（ CRC）早期筛查指标的可行性。方法收集48例CRC患者、35例大肠腺瘤患者、32例大肠增生性息肉患者及30例健康人的粪便样本,采用甲基化特异性PCR技术分析样本中SFRP1和WIF-1基因启动子甲基化状态。结果 CRC患者粪便中SFRP1和WIF-1基因启动子甲基化率分别为68．8％和60．4％,腺瘤患者分别为57．1％和42．9％,增生性息肉患者分别为21．9％和18．8％;两者联合检测CRC和大肠腺瘤的敏感度分别为77．1％和65．7％,特异度为93．3％。2个基因甲基化水平在CRC和腺瘤患者的粪便样本中均显著高于增生性息肉和健康人群（P均＜0．05）。此外,SFRP1和WIF-1基因甲基化与临床病理特征无明显相关性。结论检测粪便中SFRP1和WIF-1基因启动子甲基化有望成为CRC早期筛查的一种非侵入性检测方法,在早期筛查和诊断中具有潜在的应用价值。     

Claudin-1和Claudin-2在大鼠急性结肠炎黏膜中的表达

目的 观察紧密连接蛋白Claudin-1和Claudin-2在急性结肠炎大鼠模型结肠黏膜中的表达.方法 对16只SD大鼠采用三硝基苯磺酸灌肠建立急性结肠炎模型,各取8只分别于1周和2周后观察结肠组织的病理学变化,另取5只正常大鼠作对照.应用量子点免疫标记技术检测两种蛋白在正常大鼠、结肠炎1、2周大鼠结肠黏膜中的表达及分布,测定蛋白表达的荧光强度.结果 与正常组比较,急性结肠炎1周时大鼠的Claudin-1和Claudin-2表达均明显增强(荧光强度分别为66.01±25.14比48.12±13.25,70.35±24.36比40.12±9.56,P均<0.01)且分布更广,2周时表达水平较1周时回落(P<0.05),其中Claudin-1下降较为明显,Claudin-2仍维持一个较高水平[分别为54.64±14.26和60.87±14.27,与正常组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)].Claudin-1和Claudin-2表达的变化与结肠炎病理学观察的结果 基本一致.结论 急性结肠炎导致肠黏膜的Claudin-1和Claudin-2表达增强,尤以Claudin-2增加明显,两者的变化与急性结肠炎的病理改变密切相关.

Abstract：

Objective To study the expression of Claudin-1 and Claudin-2 in colonic epithelium of trinitrobenzene sulfonic acid (TNBS)-induced acute colitis models in rats.Methods Sixteen TNBS-induced colitis models in rats were established, and pathologic changes of colonic epithelium were analyzed after one or two weeks respectively. Fluorescence of quantum dots-labelled Claudin-1 and Claudin-2 expression was detected in colonic epithelial cells of normal, one-week colitis, and two-week colitis rats. Fluorescence intensity and distribubition of fluorescence signals were recorded and analyzed.Results As compared with that in normal rats (n=5), both Claudin-1 and Claudin-2 expression was increased in one-week colitis rats (relative fluorescence intensity: 66.01±25.14 vs. 48.12±13.25, 70.35±24.36 vs 40.12±9.56, both P<0.01) with wider distribution in crypt. In two-week colitis rats, Claudin-1 and Claudin-2 expression levels were dropped, but Claudin-2 expression was decreased less than Claudin-1, and both remained at a higher level than normal rats (54.64±14.26 and 60.87±14.27, respectively, P<0.05 and P<0.01, respectively vs normal). The changes of expression of Claudin-1 and Claudin-2 were in accordance with the results of pathologic scoring for colitis.Conclusion Along with the pathologic changes in colonic epithelium, Claudin-1 and Claudin-2 expression levels are increased in acute colitis rats, and Claudin-2 expression seems more significant than Claudin-1 as an indicator for colitis.     

益生菌VSL#3对实验性结肠炎大鼠结肠黏膜Claudins蛋白表达的影响

目的 观察益生菌VSL#3对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的大鼠急性结肠炎的保护作用,以及对紧密连接蛋白Claudins（Claudin-1,-2,-3）在结肠黏膜上表达的影响。方法 24只健康雌性SD大鼠采用TNBS一次性灌肠法建立大鼠结肠炎模型,造模完成后第2天开始,8只大鼠每日给予2ml0.9％ NaC1溶液灌胃（TNBS组）,8只给予100 mg VSL#3（VSL#3组）,另8只给予200 mg 5-氨基水杨酸(5-ASA)灌胃（5-ASA组）。5只同级别未造模大鼠作为对照组每日给予0.9％ NaCl溶液灌胃,均持续1周并处死。处死时留取粪便标本并做细菌培养以检测肠道菌群的变化。通过观察腹泻、便血和体重情况计算疾病活动指数(DAI)。取结肠组织做HE染色,观察病理学改变;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肠组织髓过氧化物酶(MPO)的变化;量子点免疫荧光标记法检测Claudins在结肠黏膜的表达和分布。结果 与TNBS组比较,益生菌VSL#3和5-ASA治疗均能降低结肠炎大鼠明显升高的DAI和肠组织MPO水平,减轻结肠炎性反应评分。与对照组比较,结肠炎大鼠的肠道细菌计数发生改变,Claudin-1,-2,-3蛋白表达均明显增加（平均荧光强度分别为66.200±5.737、71.780±6.670、61:300土5.199,t值分别＝17.237、27.909和21.788;P值均＜0.01）;而与TNBS组和5-ASA组比较,VSL#3可调节肠道菌群平衡,增加Claudin-1,-3的表达（Claudin-1:75.550±8.717比66.200±5.737和67.080±5.401;t＝9.348,8.469;P值均＜0.05;Claudin-3:68.820±7.443比61.300土5.199和59.830±5.930;t＝7.519,8.988,P值均＜0.05),降低Claudin-2的表达(58.740±6.457比71.780±6.670和66.870±5.791;t＝13.033,P＜0.01;t＝8.123,P＜0.05)。结论 益生菌VSL#3可能通过改变Claudins蛋白的表达,增强肠黏膜屏障功能,从而发挥缓解急性结肠炎性反应的作用。     

不同阶段结直肠肿瘤分泌型卷曲相关蛋白基因甲基化及表达

目的探讨分泌型卷曲相关蛋白（sFRP）家族基因启动子CpG岛甲基化在结直肠肿瘤发生、发展和诊断中的作用。方法分别用甲基特异性PCR和逆转录PCR检测72例结直肠腺癌、33例腺瘤、18个变性隐窝灶（ACF）中sFRP基因甲基化及mRNA表达。结果正常大肠黏膜不存在sFRP基因甲基化。sFRP1、2、4、5甲基化率在腺癌中分别为93。1％、83。3％、36．1％和52．8％；在腺瘤中分别为87．9％、81．8％、24．2％和57．6％；ACF中分别为94．4％、77．8％、27．8％和55．6％。腺癌、腺瘤和ACF间sFRP基因甲基化率差异无统计学意义（P〉0．05），肿瘤组织甲基化率均高于正常黏膜及癌旁正常组织（P〈0．05）。正常黏膜表达sFRPl～5基因mRNA。与正常黏膜相比，腺癌中sFRP1、2、4、5分别在90．3％、70．8％、26．4％和61．1％的样本中表达下调（P〈0．05）；腺瘤中sFRP1、2、5分别在75．8％、45。5％和39。4％的样本中表达下调（P〈0．01）。腺癌中sFRP2、4、5表达下调较腺瘤更常见（P〈0．05）。sFRP3基因启动子不含CpG岛，仅极少数肿瘤标本（7／105）表达下调。肿瘤组织中sFRP基因表达下调与基因启动子高甲基化相关（P〈0．05）。结论sFRP基因家族在ACF中已出现高频率甲基化，是结直肠肿瘤发生常见的早期事件，可能导致sFRP基因表达下调。sFRP1、2、5甲基化可能成为早期发现结直肠肿瘤的生物学标记。     

地氯雷他定对慢性应激大鼠肠道肥大细胞的影响

目的：探讨地氯雷他定对慢性应激大鼠肠道肥大细胞的变化的影响。方法：将雄性SD大鼠30只随机分为对照组、慢性应激组、慢性应激＋地氯雷他定组,每组10只,采用长期中等强度应激造成慢性应激大鼠模型,观察各组大鼠的行为学变化及肠道敏感性的变化并用激光共聚焦显微镜观察各组大鼠肠道的肥大细胞的变化。结果：慢性应激组比对照组表现出明显的焦虑样行为、肠道运动增强、肠道敏感性增加、肠道肥大细胞数目增加（P〈0.05）;地氯雷他定干预组比慢性应激组的焦虑样行为、肠道运动和肠道敏感性均明显减轻,同时肠道肥大细胞数目减少（P〈0.05）。结论：慢性应激大鼠肠道敏感性增加;地氯雷他定能能通过控制肥大细胞的活动减轻慢性应激大鼠肠道高敏感。     

二氢青蒿素对结肠癌细胞系SW480增殖凋亡的影响

目的:研究二氢青蒿素(DHA)对结肠癌细胞系SW480的增殖、凋亡的作用,初步探讨其机制。方法:采用结肠癌细胞SW480为研究对象,观测不同浓度和作用时间的DHA对细胞作用,MTT噻唑蓝比色法检测对细胞的增殖抑制作用,普通光镜观察细胞形态的变化,分别PI单染及Annexin-V双染法流式细胞术分析细胞周期分布和早期凋亡率的变化,免疫细胞化学检测凋亡抑制蛋白Survivin及效应蛋白Caspase-3表达情况。结果:DHA对SW480细胞增殖有抑制作用且呈浓度和时间依赖性。普通光镜下观察SW480呈典型的凋亡形态学改变。流式细胞仪检测细胞阻滞于G0/G1期,随药物剂量增大G0/G1期比例而逐渐增高,S期比例降低,Annexin-V双染法示早期细胞凋亡率呈明显浓度依赖性升高。免疫细胞化学结果示DHA作用48 h后Survivin表达减弱,而Caspase-3表达增强,呈剂量依赖关系。结论:DHA能显著抑制结肠癌细胞生长,影响细胞周期,诱导细胞凋亡,可能与抑制Survivin蛋白表达,促使Caspase-3表达增强有关。     

强力霉素对人胃癌细胞体外增殖的影响

目的研究强力霉素对人胃癌细胞SGC-7901增殖的影响及其机制。方法用MTT法和免疫组织化学法分别检测SGC-7901细胞的增殖及基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)蛋白表达水平。结果强力霉素作用于SGC-7901的抑制效应呈浓度和时间依赖性,SGC-7901经强力霉素处理后MMP-2的表达,不同浓度间有显著性差异(P<0．01)。结论强力霉素对胃癌细胞SGC-7901有抑制增殖的作用,其机制可能与下调MMP-2蛋白表达有关。     

Dieulafoy病的临床诊疗进展

Dieulafoy病,又称黏膜下恒径动脉破裂出血,是引起上消化道出血的少见原因之一。近年来随着医疗技术的发展,该病检出率明显增高。国内外临床均有散在报道。本文就该病的命名、发病情况、发病部位、发病机制、临床特点及诊断治疗进展作一综述。1命名1884年Gallard[1]首次报道以突     

强力霉素对胃癌细胞SGC-7901基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶组织抑制因子-2表达的影响

背景：强力霉素对结肠癌细胞的分化和抑制作用已有报道，但其对胃癌细胞的作用尚未见报道。目的：观察强力霉素对人胃癌细胞SGC-7901的生长抑制作用及其对基质金属蛋白酶（MMP）-2和基质金属蛋白酶组织抑制因子（TIMP）-2表达的影响，探索胃癌治疗的新方法。方法：采用不同浓度的强力霉素作用于胃癌细胞SGC-7901，以噻唑蓝（MIT）法测定其细胞毒作用；逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法半定量测定MMP．2和TIMP-2mRNA的表达；免疫组化法观察MMP-2蛋白的表达。结果：强力霉素可抑制胃癌细胞SGC-7901的生长，具有浓度和时间依赖性（P〈0．01）。强力霉素可下调MMP-2mRNA和MMP-2蛋白的表达，上调TIMP-2mRNA的表达，具有浓度依赖性（P〈0．05）。结论：强力霉素能抑制胃癌细胞SGC-7901的生长，其作用机制可能与下调MMP-2表达、上调TIMP-2表达有关。