西妥昔单抗联合顺铂对鼻咽癌荷瘤裸鼠移植瘤生长作用的影响

目的：探讨靶向表皮生长因子受体（EGFR）特异性单抗西妥昔单抗单药及与顺铂联合应用对鼻咽癌荷瘤裸鼠移植瘤生长的影响及其可能的作用机制。方法：将鼻咽癌细胞HONE1制成细胞悬液后接种于裸鼠皮下,待成瘤后将裸鼠随机分入4个处理组：生理盐水组、西妥昔单抗组、顺铂组及两药联合组。定期测量每只裸鼠肿瘤最大径和最小径,计算肿瘤体积。用药结束后,处死裸鼠,取出肿瘤组织,称重,计算抑瘤率。用免疫组化方法检测肿瘤组织中磷酸化蛋白激酶B（p-AKT）和人磷酸化细胞外信号调节激酶（p-ERK）表达。结果：与生理盐水组相比,西妥昔单抗单药组肿瘤体积变化及治疗后平均瘤重差异均无统计学意义,顺铂单药组及两药联合组均有抑瘤效应,以两药联合组抑瘤效果尤为显著。免疫组化显示肿瘤组织AKT和ERK磷酸化水平在顺铂处理组上调,而在西妥昔单抗单药及联用组则较低。结论：西妥昔单抗单药对HONE1鼻咽癌荷瘤裸鼠移植瘤的生长无明显影响,但其与顺铂联用可增加顺铂的抑瘤作用。     

DNA引物酶抑制剂碘化-3,3′-二乙基-9-甲基-硫杂羰花青诱导人白血病HL-60细胞凋亡(英文)

目的研究DNA引物酶抑制剂碘化-3,3′-二乙基-9-甲基-硫杂羰花青(DMTCC I)诱导人粒细胞性白血病HL-60细胞凋亡并探索其机制。方法分别采用不同浓度的DMTCC I处理培养于RPM I-1640培养基的HL-60细胞。采用MTT法检测DMTCC I对HL-60细胞的生长抑制作用。采用流式细胞仪和DNA琼脂糖凝胶电泳方法检测细胞凋亡。采用蛋白免疫印迹(W estern b lotting)法观察凋亡相关蛋白survivin,Bc l-xL,Bad,Bax,Bc l-2,caspase-9,caspase-3,caspase-6,PARP,DFF45和lam in B的表达。采用ApoA lert Caspase-3分析试剂盒检测caspase-3的活性。结果DMTCC I具有抑制人白血病HL-60细胞增殖的作用,其IC50值为0.24μmol.L-1。流式细胞仪和DNA琼脂糖凝胶电泳结果显示,DMTCC I可诱导HL-60细胞凋亡。在经DMTCC I处理的HL-60细胞中,survivin和Bc l-xL蛋白的表达水平下调,Bad和Bax蛋白的表达水平上调,Bc l-2蛋白的表达水平无变化,caspase-9,caspase-3,caspase-6,PARP,DFF45和lamin B被分别裂解,产生相应裂解产物。在HL-60细胞中,caspase-3的活性在1μmol.L-1DMTCCI处理3 h时明显升高,在处理12 h时达到最高峰。结论DMTCCI可抑制人白血病HL-60细胞的增殖并诱导其发生细胞凋亡。Bcl-2家族蛋白、survivin和caspases家族蛋白可能参与了上述诱导HL-60细胞凋亡的过程。     

抗肿瘤药鬼臼毒素衍生物构效关系的研究

目的：探讨鬼臼毒素衍生物的三维定量构效关系（three-dimensional quantiative structure-activity relationship,3D-QSAR)及活性部位。方法：用比较分子力场分析（comparative molecular field analysis,CoMFA)方染对鬼臼毒素23个衍生物进行了三维定量构效关系研究,然后用AM1（Austin model1)方法进行计算,讨论它们的3D－QSAR及活性部位。结果：以CoMFA方法建立了一个有较强预测能力的QSAR模型,在对体外L1210白血病细胞生长的抑制活性上,C4位为改变活性的有效修饰位点;其B环是药物分子接受电子部位,对保持此类药物的生物活性有重要作用;E环及其含氧取代基是分子的负电中心。结论：所得CoMFA模型可预测该类化合物的活性,化合物B环及E环是 活性部位。     

茶多酚与亚硒酸钠联合对EBV抗原表达的抑制作用

用间接免疫荧光法测定Ｒａｊｉ细胞和Ｂ９５－８细胞ＥＢ病毒抗原的表达。结果显示无细胞毒浓度的茶多酚与亚硒酸钠联合对Ｒａｊｉ细胞ＥＢＶ－ＥＡ表达有显著的抑制作用,优于单纯茶多酚或亚硒酸钠的抑制作用。两药显示相互协同增效的作用 。抑制率与药物浓度相关;单纯茶多酚对Ｂ９５－８细胞ＥＢＶ－ＶＣＡ表达无抵制作用,但茶多酚能增强亚硒酸钠对Ｂ９５－８细胞ＥＢＶ－ＶＣＡ表达的抵制作用,抑制率随药物浓度的升高而升高。     

单侧椎弓根固定m-TLIF治疗单节段极外侧腰椎间盘突出伴腰椎不稳的临床效果

目的:研究单侧椎弓根固定改良型腰椎间孔椎间融合(m-TLIF)治疗单节段极外侧腰椎间盘突出伴腰椎不稳的临床效果.方法:收集2015～2019年弋矶山医院脊柱外科收治的采用单侧椎弓根固定m-TLIF治疗单节段极外侧腰椎间盘突出伴腰椎不稳患者20例,记录年龄、性别、手术时间、手术出血量及突出节段等信息,并记录患者术前及术后...     

发夹结构RNA表达载体特异性抑制结肠癌LoVo细胞绿色荧光蛋白基因表达

目的 构建针对绿色荧光蛋白(GFP)基因的发夹结构RNA表达载体(SHi-pU6-GFP)，观察SHi-pU6-GFP对结肠癌LoVo细胞的GFP特异性抑制作用。方法 设计合成针对绿色荧光蛋白GFP基因的发夹RNA(shRNA)序列，构建SHi-pU6-GFP质粒。采用报告基因质粒pCX-GFP(5510bp)和含有鼠U6启动子pU6(3．3kb)质粒，应用Lipofectamine^TM 2000将pCX-GFP质粒和SHi-pU6-GFP质粒转染K562细胞和LoVo细胞。荧光显微镜观察转染效果和不同时间的转染效率。结果 质粒pU6和SHi-pU6-GFP经EcoRⅤ和XbaⅠ酶切电泳后，前者出现3．3kb和约300bp条带，而后者出现3．3kb和约350bp条带，与实验设计的针对GFP的shRNA长度相符。说明本实验已成功构建了针对绿色荧光蛋白GFP基因的SHi-pU6-GFP质粒。K562细胞和LcVo细胞中分别观察到转染pCX-EGFP质粒和SHi-pU6-GFP质粒前后发绿色荧光的细胞数目明显减少。结论 结肠癌LoVo细胞存在RNA干扰现象，可以进行相关RNA干扰抑制实验。     

小细胞肺癌化学治疗的新进展

肺癌包括鳞癌、腺癌、小细胞肺癌、大细胞未分化癌,其中小细胞肺癌占肺癌的25%。在手术治疗、放射治疗和化学治疗中,以化疗效果最佳。小细胞肺癌对单药CTX、VP16、DDP、ADM等均较敏感。为了提高小细胞肺癌的治疗效果,研究者们进行了一系列的临床试验。采用多药的联合化疗、化疗 放疗、大剂量化疗、巩固化疗、维持化疗以及新的抗癌药物的应用,但对生存期的提高不大。小细胞肺癌的2a生存率仍在5%～10%以下,原因是化疗缓解后,很快就出现复发和转移,而复发和转移灶对化疗又极不敏感,因此研究其耐药的机制非常重要。本文对近几年小细胞肺癌…     

DNA引物酶的提取分离与引物合成活性的研究

以小鼠艾氏腹水癌细胞经超声破碎的提取液为材料，依次用ＤＥ５２和Ｐ１１层析柱进行离子线性洗脱，分别在ＫＣｌ浓度为０．１７～０．２ｍｏｌ／Ｌ和０．２５～０．２７ｍｏｌ／Ｌ处ＤＮＡ引物酶被洗脱下来。用大肠杆菌大片段ＤＮＡ多聚酶Ⅰ延长引物法检测ＤＮＡ引物酶比活性为８７５３Ｕ／ｍｇ，酶总获得为２２．１％。放射自显影法检测引物合成活性显示引物酶合成了不同长度的引物     

ST2325对erbB2过表达的乳腺癌细胞周期的影响及分子机制

目的：我们已证明ST2325对erbB2受体酷氨酸激酶有明显的抑制作用，本实验研究ST2325对erbB2过表达的乳腺癌MDA-MB-453ml细胞周期分布的影响及分子机制。方法：流式细胞术检测细胞周期的分布；Western blot法检测蛋白表达量的变化。结果：ST2325处理MDA-MB-453ml细胞24小时后，流式细胞仪分析可见在0、6.25、12.5、25.0、50.0、100μmol/L浓度下，MDA-MB-453ml细胞G0/G1期分别为：48.62%、48.83%、49.59%、52.18%、61.00%、83.96%；S期分别为33.34%、33.16%、32.78%、30.77%、25.62%、7.08%；G2M期分别为：18.04%、18.01%、17.63%、17.05%、13.38%、8.96%。用不同浓度的ST2325处理MDA-MB-453ml细胞24小时后，Western blot法检测呈现ST2325处理后，细胞中p27上调，Rb的高磷酸化状态下降，Cyclin D1蛋白水平下降。ST2325对MAPK和AKT的激活有明显的抑制作用。结论：ST2325能诱导erbB2过表达的乳腺癌MDA-MB-453ml细胞停止于G1期，且与P27上调、Rb的高磷酸化状态下降、CyclinD1蛋白水平下降有关。