14-3-3ζ对HL-60和HL-60/VCR细胞增殖的抑制作用

本研究旨在进一步探讨14-3-3ζ在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)敏感细胞HL-60和耐药细胞HL-60/VCR中的表达和作用。用半定量RT-PCR和Western blot分别检测多药耐药基因mdr1 mRNA和Pgp的表达以验证基因芯片的结果,用Western blot检测Pgp、14-3-3ζ以及抗凋亡分子BCL-2、MCL-1蛋白的表达;免疫荧光法和激光共聚焦法检测14-3-3ζ在HL-60和HL-60/VCR亚细胞中的定位。采用将小干扰RNA(siRNA)通过脂质体LipofectamineTM2000介导,瞬时转染HL-60和HL-60/VCR细胞,以观察细胞生长的变化。细胞增殖指标采用生长曲线和细胞周期测定法测定。采用RT-PCR和Western blot方法检测Pgp、14-3-3ζ以及抗凋亡分子BCL-2、MCL-1表达的变化。结果表明,mdr1 mRNA和Pgp仅在HL-60/VCR细胞中高表达。与HL-60细胞相比,除了14-3-3σ之外,其他14-3-3亚型均在HL-60/VCR细胞中高表达,尤其是14-3-3ζ同时伴有BCL-2和MCL-1高表达。另外,研究发现14-3-3ζ主要定位于细胞浆和核。通过RNA干涉抑制14-3-3ζ的表达能抑制HL-60和HL-60/VCR细胞的生长,下调BCL-2和MCL-1蛋白。结论:14-3-3ζ可能通过BCL-2和MCL-1介导调控HL-60和HL-60/VCR细胞的增殖,是治疗难治复发AML的潜在新靶点。     

儿童ALL65例免疫分型体会

目的:分析儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)的免疫表型特点。方法:用玻片法单克隆抗体对65例儿童ALL进行免疫分型。结果:T细胞系ALL占27.2%,B细胞系ALL占63.1%,TB急性混合细胞白血病(MAL)占9.2%,其中伴髓系抗原表达率7.7%。结论:免疫分型对于ALL的分型诊断而言,可以认为是金标准。     

脂肪移植改善肉芽肿性乳腺炎术后局部缺损的应用体会

目的 探讨脂肪移植法修复肉芽肿性乳腺炎术后乳房局部缺损畸形的可行性和安全性. 方法 回顾性分析85例脂肪移植填充肉芽肿性乳腺炎术后乳房局部缺损的病例临床资料. 结果 85例患者乳房局部缺损外形明显改善,缺损范围小于1/4 象限的患者,术后改善优良率为82.5%.缺损在1/4象限到1/2象限的患者术后优良率为36.1%,2组优良率比较的差异有统计学意义(P<0.05).2组均无手术相关并发症,随访期间未见肉芽肿性乳腺炎局部复发,受移植乳腺未见乳腺良恶性肿瘤发生. 结论 针对肉芽肿性乳腺炎术后乳房缺损,采用脂肪移植的方法纠正安全有效,且缺损范围小于1/4象限的患者更为有效.     

Th1/Th2细胞失衡对重型再生障碍性贫血CD34+细胞的免疫抑制效应

再生障碍性贫血(再障)的发病与T细胞介导的造血抑制有密切联系[1,2].我们曾发现,重型再障患者骨髓的Th1样细胞因子干扰素(IFN)γ水平明显上调,而Th2样因子IL-4却大致正常,间接提示重型再障可能存在Th1/Th2细胞比例失衡[3].为探讨Th1/Th2细胞失衡对骨髓造血功能的效应,们利用CD34+细胞和Th细胞的混合培养体系,在体外模拟Th1/Th2细胞的交互调节过程,观察了对CD34+细胞扩增和集落形成的影响.     

误诊为肺部真菌感染的分化综合征一例

患者 女性, 47岁,主因齿龈渗血2周于2013 年9月11日入我院.入院后血常规示:白细胞计数5×109/L,血红蛋白60 g/L,血小板计数20×109/L;凝血酶原时间14.80 s,活化部分凝血活酶时间29.0 s,纤维蛋白原含量1.5 g/L,D二聚体6.64 mg/L;经骨髓检查,伴t(15;17),(q22;q21), PML-RARα 阳性, 明确诊断为急性早幼粒细胞白血病(APL). 入院查体:齿龈、皮肤有出血表现,胸骨压痛阳性,右下肺叩诊实音,右肺底呼吸音消失,考虑患者合并肺部感染.入院后立即给予维甲酸20 mg/次,每天2次诱导分化治疗,同时输注新鲜冷冻血浆、纤维蛋白原、冷沉淀纠正出凝血紊乱,输注血小板,降低出血风险,每日输注血液制品前给予地塞米松2 mg,同时给予哌拉西林钠抗感染治疗,积极完善肺部CT等相关检查.患者接受诱导分化治疗5 d后,出现刺激性干咳,伴轻度胸闷、气短.查体右肺底呼吸音消失,右肺可闻及少量湿啰音.肺部CT示:右肺下叶炎症,右侧胸腔积液(图1A).     

MUC1在骨髓瘤骨病中的表达及临床意义

目的:探讨骨髓瘤骨病患者的骨髓及外周血中粘蛋白1（mucins1,MUC1）的表达水平与骨髓瘤骨病程度的关系及临床意义。方法:分别取50例骨髓瘤患者（0、1、2、3、4级骨病者各10例）及10例健康对照者的骨髓及外周血,采用实时定量PCR及Western blot方法检测骨髓及外周血中MUC1 mRNA及蛋白的表达。结果:与健康对照组相比,0级、1级、2级、3级、4级骨髓瘤骨病患者骨髓及外周血中MUC1 mRNA及蛋白的表达均明显增高,且升高程度与骨损坏程度呈正相关。结论:MUC1可能参与骨髓瘤骨病的发生发展。     

CD3AK细胞及其抗肿瘤研究进展

抗ＣＤ３抗体激活的杀伤细胞－ＣＤ３ＡＫ是一种新型抗瘤免疫活性细胞。Ｔ细胞经抗ＣＤ３单克隆抗体激活后，采用极低剂量ＩＬ－２维持即可长期活性增殖，发挥明显的抗肿瘤细胞效应。依诱导培养过程中ＣＤ３单抗持续存在与否，形成ＣＤ３ＡＫ＾＋和ＣＤ３ＡＫ＾－两种亚类，其作用及方式亦有所差异。ＣＤ３ＡＫ的体内外广谱、高效抗肿瘤作用明显优于ＬＡＫ细胞，临床初步应用亦显示出良好疗效。     

硼替佐米对多发性骨髓瘤细胞凋亡及分子伴侣BiP表达的影响

本研究旨在探讨蛋白酶体抑制剂硼替佐米对多发性骨髓瘤细胞株NCI—H929（H929）的凋亡诱导作用及其对H929细胞中分子伴侣BiP表达的影响。以不同浓度硼替佐米处理H929细胞24小时后,采用Annexin V—FITC／PI双染联合流式细胞术检测靶细胞凋亡率;用RT—PCR和Westernblot检测靶细胞BiP mRNA和BiP蛋白的表达。结果表明：不同浓度硼替佐米（20、40、80nmol／L）均可诱导靶细胞凋亡,凋亡率分别为（15．73±0．67）％、（27．83±1．26）％7t．（44．17±2．25）％,呈剂量依赖性,且均显著高于未处理组（1．21±0．07％）（P〈0．05）;经不同浓度硼替佐米处理后,靶细胞BiPmRNA和BiP蛋白水平均高于未处理组,且二者变化一致;在相近的促凋亡条件下（凋亡率约40％-50％）,标准内质网应激诱导剂brefeldin A（500ng／ml,24小时）对H929细胞BiP mRNA和BiP蛋白表达的上调作用与硼替佐米（80nmol／L,24小时）基本一致。结论：硼替佐米诱导H929细胞凋亡并伴有分子伴侣BiP mRNA和BiP蛋白表达上调,表明硼替佐米诱导的H929细胞凋亡极可能涉及内质网应激反应。     

PAIg检测诊断ITP的局限性

０　引言　血小板相关抗体（ＰＡＩｇ）是原发性血小板减少性紫癜（ＩＴＰ）的诊断、疗效及预后估计的有效指标．用ＥＬＩＳＡ法定量测定６７例血小板减少患者的ＰＡＩｇ,结果发现其中有２２例非ＩＴＰ患者的ＰＡＩｇ增高,说明ＰＡＩｇ用于诊断ＩＴＰ存在一定的局限性,在无其它临床指标的前提下,不能单凭ＰＡＩｇ的增高而诊断为ＩＴＰ．１　材料和方法１．１　材料　ＰＡＩｇＡ,ＰＡＩｇＧ,ＰＡＩｇ试剂盒,福建太阳生物技术公司提供;酶标仪,华东电子管厂制造;血小板制备盒,福建太阳生物技术公司提供;缺铁性贫血８例,溶血性贫血…