急性缺氧对大鼠海马神经元钙激活钾通道的作用

目的:本实验采用膜片钳单通道技术研究缺氧条件下对培养新生大鼠海马神经元钙激活钾通道的作用;方法:取1 ～3天的SD大鼠海马神经元组织,制成细胞悬液,加入含80 %DMEM(dulbecco' s modified eagle' s medium)、20 %小牛血清培养基进行培养,将培养3 ～5天的形态典型的神经元置于对称性高钾溶液中,用膜钳技术记录单通道电流,其通道电流通过膜片钳放大器(CEZ -2200)放大,滤波(3KHz)后,经A/D、D/A转换器输入计算机,采用pClamp6 .0 .6软件采样分析;结果:在细胞贴附式下,应用氰化钠(20μmol/L)造成细胞急性缺氧,在缺氧早期(5 ～20 min)通道开放概率增加(P<0 .01或P<0 .05 ,n=5) ,而缺氧后期(20 ～30 min) ,通道开放概率明显降低,表明缺氧时间对通道的开放概率有明显影响。结论:缺氧早期神经元钙激活钾通道有自身激活作用,当钙激活钾通道激活时,钾离子外流增加,产生膜的复极化,使去极化不易产生,从而稳定细胞膜及降低细胞的兴奋性,这可能是缺氧早期神经元自身的一种代偿机制。     

灯盏花素对鼠主动脉平滑肌钙激活钾通道的激活作用

目的:观察灯盏花素对大鼠主动脉平滑肌钙激活钾通道(KCa)的影响,揭示灯盏花素在分子水平的作用机制。方法:采用Wistar大鼠20只,应用膜片钳技术,研究灯盏花素对大鼠主动脉平滑肌KCa的作用。结果:细胞贴附式膜片上,应用浓度分别为5×10-4、10-3、1.85×10-3mol/L的灯盏花素后,大鼠的通道开放概率(Po)及通道电导明显增大:Po分别由用药前的0.012±0.047增加至0.427±0.364,0.609±0.312(P<0.05),0.839±0.192(P<0.01);通道电导分别由用药前的(124±59)pS增大至(174±83)pS,(199±41)pS(P<0.05),(269±85)pS(P<0.01)。结论:灯盏花素可激活KCa,从而起到舒张血管的作用。     

氯胺酮对缺氧大鼠海马神经元钙激活钾通道的作用

目的 研究氯胺酮对缺氧马神经元钙激活钾通道（KCa通道）的作用,以揭示氨胺酮抗缺血性脑损伤的电生机机制。方法 应用膜片钳制技术记录缺氧海马神经元上的单通道电流活动,经P－clamp软件进行微机采样、储存数据和数据的分析处理。结果 氨胺酮对缺氧海马神经元KCa通道具有明显激活作用：增加通道开放概率P0,缩短通道关闭时间。结论 氯胺酮对海马神经元KCa通道的作用可能为氯胺酮治疗脑缺血损伤的另一种重要机制。     

增龄引起心房离子通道重构与房颤的关系

心房颤动（atrial fibrillation,AF）,简称房颤,是临床上最为常见的快速性心律失常之一,尤其多见于老年人。年龄一直被认为是AF发生的重要危险因素之一。大量研究发现,心房重构（atrial remodeling,AR）是增龄性AF得以发生和维持的重要因素,心房肌细胞相关离子通道电流的变化及其通道蛋白、基因表达的变化在心房电重构（atrial electrial remodeling,AER）中起重要作用。本文就增龄引起心房离子通道重构与AF的关系予以综述。     

山羊在位心肌细胞动作电位的测定

采用悬浮式玻璃微电极技术,对10只山羊在位心室肌细胞动作电位多项参数进行了测定,并观察了开胸后动物的心率变化和人工电刺激于易颤期时,心室发生纤颤的动作电位图形,以及动作电位和心电图的关系。结果是:APH109.97±13.29mv、Vmax335.88±70.38v/s,ERP239±35.10ms、ApD100、50、10分别为318.63±48.58ms,275.58±44.94ms,138.16±13.22ms。开胸2—3小时后,心率可由开胸时的120—130次/分减慢至90—100次/分。心室纤颤一旦出现,均呈不可逆改变。心电图的QRS上升支同动作电位O相相一致,T波相当于快速复极期。     

胆心综合征60例的高频心电图研究

通过微机对60例胆心综合征患者和60例正常成人记录三个最大肢导联和V_4～V_5导联的高频心电图。对两组的切迹、最高频率以及频谱含量和切迹与最高频率的关系进行分析,结果表明:(1)患者组六导联组合切迹数≥3个的例数占总例数80％,平均每例切迹数4.18±1.88;正常对照组六导联组合切迹数≥3个的例数占总例数6％平均每例切迹数1.20±0.47,组间显著性检验P<0.01。(2)患者组切迹和最高频率主要出现Ⅱ、     

Mg~(2+)对猪冠脉平滑肌细胞钙激活钾通道的激活作用的初步研究

目的：研究Mg2+对猪冠脉平滑肌细胞钙激活钾通道的作用,以揭示Mg2+扩血管作用的电生理机制。方法：应用膜片钳制技术inside－out方式记录冠脉平滑肌上的单通道活动,经PCLAMP软件进行微机采样储存数据和数据的分析处理。结果：Mg2+对猪冠脉平滑肌钙激活钾通道具有明显激活作用：增强通道开放概率P0,增加膜片通道开放数目。结论：Mg2+对钙激活钾通道的激活作用可能为Mg2+调节心血管活动的重要机制之一。     

多非利特与维拉帕米联合应用对豚鼠乳头肌动作电位的影响

目的 研究钾通道拮抗剂多非利特与钙通道拮抗剂维拉帕米联合应用对豚鼠乳头肌动作电位各参数的影响.方法 应用标准微电极技术记录离体豚鼠乳头肌动作电位,观察在不同刺激频率下(0.2,0.5 ,1.0,1 25,2.0 Hz),不同浓度的胺碘酮(1,5,10 μmol/L)、多非利特(10,50,100 nmol/L)或100 nmol/L多非利特与1 μmol/L 维拉帕米联合应用对乳头肌动作电位的影响.结果 胺碘酮浓度依赖性的延长动作电位复极50%(APD50)和90%(APD90)的时程,其作用不表现为频率依赖性;多非利特延长APD具有明显的浓度依赖性,刺激频率增加时,延长APD的作用明显减弱,表现为明显的负性频率依赖性;100 nmol/L多非利特与1 μmol/L维拉帕米联用后,上述频率依赖性得到改善.结论 胺碘酮和多非利特均能浓度依赖性地显著延长动作电位时程,但复合性Ⅲ类抗心律失常药物胺碘酮对频率的依赖性明显低于纯Ⅲ类抗心律失常药物多非利特,而多非利特与维拉帕米联合应用达到一定的平衡状态时可以减少这种负性频率依赖性作用.     

延迟整流钾通道阻断药物与维拉帕米联合应用对豚鼠心室乳头肌动作电位的影响

目的:研究IKs特异性阻断剂Chromanol 293B、IKr特异性阻断剂多非利特与L-型钙通道阻断剂维拉帕米联合应用对豚鼠心室乳头肌动作电位的作用,探讨Ⅲ类和Ⅳ类抗心律失常药物相互作用的机制。方法:用标准玻璃微电极技术记录豚鼠乳头肌的动作电位,观察不同刺激频率(0.2,0.5,1,1.25,2 Hz)对动作电位各参数的影响。结果:(1)Chromanol 293B(1,5,10μmol.L-1)能剂量依赖性的延长APD,在不同刺激频率下,Chromanol 293B 10μmol.L-1延长APD不具有频率依赖性;(2)Chromanol293B 10μmol.L-1能延长APD90,当加入多非利特0.1μmol.L-1后,显著延长APD90,增强了在低频率时的作用,表现为负性频率依赖性。(3)在结果(2)的基础上加入维拉帕米(0.1、1、2.5μmol.L-1),使APD90有一定程度的缩短,减弱了慢心率时APD90的延长作用。结论:Chromanol 293B是选择性作用于IKs的Ⅲ类抗心律失常药物,非频率依赖性的延长APD:Chromanol 293B与多非利特联合应用明显增强了延长APD的作用,表现为明显的负性频率依赖性。钙通道阻断剂维拉帕米改善了Ⅲ类抗心律失常药物的作用特性,钾和钙通道阻断剂的联合应用减弱了纯Ⅲ类抗心律失常药物导致的负性作用。     

在inside-out膜片上caffeine对猪冠状动脉平滑肌细胞钙激活钾通道的调节作用及ryanodine的影响

目的:利用膜片钳技术,研究咖啡因对钙激活钾通道(calcium-activated potassium channel,KCa)的作用机制,及咖啡因存在时兰尼定(ryanodine)对KCa的影响以阐明冠状动脉平滑肌的调控机制。方法:采用急性酶分离方法,应用膜片钳单通道电流记录技术记录猪冠状动脉平滑肌钿胞上KCa电流活动。电流信号经放大、滤波及A/D、D/A转换后输入微机进行采样和储存。应用PCLAMP9.0软件系统进行数据采集及分析。结果:在内面向外式(inside-out)膜片下,咖啡因(0.1、0.5、1.0、5.0mmol/L)可浓度依赖性地增加通道开放概率,而对电流幅值无明显影响,开放概率增加是通过明显缩短平均关闭时间实现的(n=8,P0.01);洗去药物后通道活性可以恢复到对照水平;5.0mmol/L咖啡因对KCa激活作用最大(P0.01)。在细胞贴附式(cell-attached)膜片上,咖啡因激活KCa后,ryanodine(10-40μmol/L)浓度依赖性地抑制通道开放概率,开放时间缩短,关闭时间延长,对电流幅度无明显影响。结论:在inside-out膜片下,咖啡因能够直接激活猪冠状动脉平滑肌细胞KCa通道。在cell-atta-ched构型上,ryanodine可通过胞内一定的信号通路浓度依赖性间接抑制咖啡因对KCa激活。