蛋白质组学在心血管疾病中的研究进展

蛋白质组学是对组织或细胞中全部蛋白质的表达和功能模式进行研究的新学科.蛋白质组学在心血管疾病领域的研究,促进了对疾病本质认识的深入,提高了临床诊断和治疗水平.现就近年来蛋白质组学在心血管疾病领域的研究进展作简要概述.     

钙激活钾通道α亚单位与高血压关系的研究

了解调节血管张力的靶点及内源性活性物质配体的BKca通道的特性,有助于深入研究通道特性及临床治疗药物筛选。用脂质体(lipofectamine2000)转染法转染BKca表达质粒pcDNA3.1-BKca筛选稳定表达单克隆细胞系研究其基本的生理学特性,同时建立BKca动力学研究模型。建立稳定转染BKca通道α亚单位的HEK293细胞系,通过膜片钳记录到与天然细胞BKca电生理BKca相似电流,可以用于分析通道动力模型及药物动力学作用机制。成功建立稳定转染BKca通道α亚单位的HEK293细胞系,膜片钳实验证明具有典型的BKca电生理特性,同时建立细胞系可以较好的运用于BKca通道功能调控研究和动力学参数分析。     

雌激素对人肠系膜平滑肌细胞钙激活钾通道的作用

目的 研究雌激素对人肠系膜平滑肌细胞钙激活钾通道电流的影响.方法 用急性酶分离法分离人肠系膜平滑肌细胞,采用单通道膜片钳技术记录该细胞上的钙激活钾通道电流.结果 雌激素浓度依赖性的不可逆性的激活人肠系膜平滑肌细胞钙激活钾通道.在细胞贴附式膜片(cell-attached patch)下,膜电位为 50 mV时,10、70、150、200、300 μL/mL的雌激素,可使通道开放概率从0.0214±0.0112分别增加到0.0385±0.0146(n=8,P＜0.05)、0.0425±0.0251(n=8,P＜0.01)、0.0614±0.0152(n=8,P＜0.01)、0.1263±0.0346(n=8,P＜0.01)、0.2636±0.1046(n=8,P＜0.01).在内面向外式膜片(inside-out patch)下,膜电位为 50 mV时,10、70、150、200、300 μL/mL的雌激素,可使通道开放概率从0.0342±0.01024分别增加到0.0454±0.0231(n=8,P＜0.01)、0.0617±0.0137(n=8,P＜0.01)、0.0980±0.0202(n=8,P＜0.01)、0.1203±0.0153(n=8,P＜0.01)、0.3149±0.0851(n=8,P＜0.01).随着雌激素浓度的增加,通道活动逐步被激活,这种作用冲洗后不可逆.结论 雌激素对人肠系膜平滑肌细胞钙激活钾通道电流有一定激活作用,提示雌激素对人肠系膜阻力血管有一定的舒张作用.     

灯盏花素对鼠主动脉平滑肌钙激活钾通道的激活作用

目的:观察灯盏花素对大鼠主动脉平滑肌钙激活钾通道(KCa)的影响,揭示灯盏花素在分子水平的作用机制。方法:采用Wistar大鼠20只,应用膜片钳技术,研究灯盏花素对大鼠主动脉平滑肌KCa的作用。结果:细胞贴附式膜片上,应用浓度分别为5×10-4、10-3、1.85×10-3mol/L的灯盏花素后,大鼠的通道开放概率(Po)及通道电导明显增大:Po分别由用药前的0.012±0.047增加至0.427±0.364,0.609±0.312(P<0.05),0.839±0.192(P<0.01);通道电导分别由用药前的(124±59)pS增大至(174±83)pS,(199±41)pS(P<0.05),(269±85)pS(P<0.01)。结论:灯盏花素可激活KCa,从而起到舒张血管的作用。     

高频心电图对小儿川崎病心脏损害的敏感性研究

应用高频心电图（HFECG）技术对48例川崎病患儿和121例正常儿童作对照检测，进行川崎病致心脏损害的敏感性研究，其结果表明：①川俯病组六导联组合切过计数的阳性率（79．16％）与正常组相比，有非常显著性差异（P＜0．01）．②川崎病组在病程不同时期内高频心电图均表现出不同程度的异常，尤在1～8周内明显异常（P＜0．01）．③高频心电图检测阳性率高于二维超声心动图（2DE），尤在患病1～8周内，两组比较有显著性差异（P＜0．01）．④两对照组HFECG切迹数分布规律均为中间部＞终末都＞起始部，而以起始部具有显著性差异（P＜0．01）．     

氯胺酮对缺氧大鼠海马神经元钙激活钾通道的作用

目的 研究氯胺酮对缺氧马神经元钙激活钾通道（KCa通道）的作用,以揭示氨胺酮抗缺血性脑损伤的电生机机制。方法 应用膜片钳制技术记录缺氧海马神经元上的单通道电流活动,经P－clamp软件进行微机采样、储存数据和数据的分析处理。结果 氨胺酮对缺氧海马神经元KCa通道具有明显激活作用：增加通道开放概率P0,缩短通道关闭时间。结论 氯胺酮对海马神经元KCa通道的作用可能为氯胺酮治疗脑缺血损伤的另一种重要机制。     

阴虚证五心烦热与TNF-α IL-1β IL-6相关性的临床观察

目的:观察阴虚五心烦热与TNF-α、IL-1β、IL-6的相关性。方法:采用临床流调方法,选取慢性肾炎、糖尿病两种疾病的阴虚证有五心烦热组为研究对象,设阴虚无五心烦热组与非阴虚证有五心烦热组及无五心烦热组患者为对照组。结果:①血清TNF-α、IL-1β、IL-6含量改变,阴虚证有五心烦热组最高,与该证无五心烦热组、非阴虚证有五心烦热组分别比较均有差异(P<0.05、P<0.05),与非阴虚证无五心烦热组差异最显著(P<0.01);阴虚证无五心烦热组含量升高,与非阴虚证有五心烦热组和无五心烦热组比较均有差异(均P<0.05);非阴虚证有五心烦热组与非阴虚证无五心烦热症组比较有差异(P<0.05)。②TNF-α、IL-1β、IL-6含量与阴虚证积分呈正相关(r=0.685,P<0.05;r=0.573,P<0.05;r=0.693,P<0.05)。结论:TNF-α、IL-1β、IL-6水平升高与阴虚证密切相关,对阴虚证辨证具有重要意义;TNF-α、IL-1β、IL-6水平升高与阴虚证积分呈正相关,随阴虚发热程度的加重,IL-1水平也随之升高。说明TNF-α、IL-1β、IL-6水平升高也可作为阴虚证轻重鉴别的参考指标;TNF-α、IL-1β、IL-6升高与五心烦热症具有相关性。     

平滑肌细胞双信使系统与钙火花相关性研究

在平滑肌细胞的肌醇脂质代谢中产生的肌醇三磷酸(IP3)和二酰甘油(DAG)是胞内重要的第二信使,由它们激动的IP3/Ca2+和DAG/蛋白激酶C(PKC)途径,即是调控胞内许多生理过程的重要信号途径。因此又把这一以肌醇磷脂代谢为基础的细胞信号系统称为“双信使系统”。大量研究表明,双信使系统与平滑肌细胞胞内Ca2+浓度的调节、胞内局部Ca2+释放事件、钙火花的产生和调控紧密相关。本文就此方面的研究进展进行综述。     

加强临床教学管理 提高临床教学质量

本文旨在分析目前影响临床教学质量的因素，并在此基础上提出了一些措施，并从思想认识、健全落实各项规章制度、健全临床教学质量管理系统等方面进行了阐述，以提高临床教学质量，培养高素质人才。     

钾通道在重组改构人肿瘤坏死因子抑制肺癌细胞增殖中的作用

背景与目的 随着膜片钳技术和分子生物学技术的发展，及其在肿瘤细胞膜离子通道研究中的应用，肿瘤细胞膜离子通道已逐渐成为肿瘤基础研究的热点。本研究旨在探讨钾通道（K^＋通道）在重组改构人肿瘤坏死因子（rmhTNF）抑制肺腺癌细胞A-549增殖、促进凋亡中的作用。方法 以人肺腺癌细胞系A-549为研究对象，采用全细胞膜片钳技术记录应用rmhTNF前后细胞膜K^＋电流特性变化，分析rmhTNF对细胞膜K^＋电流的影响；用MTT法检测rmhTNF对细胞增殖的影响；流式细胞仪检测rmhTNF作用后细胞周期分配及凋亡率。结果 经rmhTNF作用48h后肺癌细胞膜上跨膜K^＋电流幅值明显降低（P＜0．01），且与rmhTNF存在剂量依赖关系。MTT实验显示rmhTNF抑制肺癌细胞的体外增殖，随rmhTNF浓度的增加，抑制率由14．56％增至38．68％。流式细胞仪检测细胞周期分配发生变化，G1期由53．02％增至72．93％（P〈0．01），且细胞凋亡率由2．08％增至8．68％（P＜0．01）。结论 rmhTNF可抑制肺癌细胞膜K^＋通道的表达。rmhTNF通过使A-549细胞周期受阻于G1期，激发细胞凋亡而抑制肺癌细胞增殖。在rmhTNF抑制人肺腺癌A-549细胞增殖、促进其凋亡的作用中细胞膜K^＋通道起着一定的作用。