紫龙金逆转人膀胱癌细胞多药耐药研究

目的:研究中药紫龙金逆转人膀胱癌细胞多药耐药(Multidrug resistance,MDR)机理.方法:应用MTT法检测紫龙金的细胞杀伤作用,采用流式细胞仪检测细胞凋亡,RT-PCR法检测Bcl-2、Bax基因mRNA水平表达.结果:BIU-87/ADM细胞生存率为(98.00±1.48)％,加入紫龙金后(浓度分别...     

实体瘤的基因转移技术

基因转移技术是肿瘤基因治疗成功的关键因素之一。本文综述了实体瘤基因治疗中的几种基因转移方法，包括逆转录病毒、腺病毒、腺相关病毒三种病毒性载体系统、脂质体介质导法、裸ＤＮＡ直接注射法以及靶向性基因转移技术（其中包括受体靶向性、组织特异性调控序列及肿瘤浸润性淋巴细胞）。实体瘤体内基因转移技术的深入研究，必将促进肿瘤基因治疗早日进入临床，并能提高目前肿瘤体内基因治疗的效果。     

罗丹明123在膀胱癌敏感细胞和耐药细胞中分布模式变化的意义

目的：探讨罗丹明123（rhodamine 123)在膀胱癌敏感细胞（T24）和耐药细胞（TADM）中分布模式变化的意义。方法：罗丹明123与T24或TADM细胞共同培养，应用激光共焦显微镜观察细胞内荧光物质分布及强度的动态变化。结果：TADM细胞中荧光物质主要在胞核两极呈团块状分布，洗去细胞外罗丹明123后，细胞内荧光缓慢减弱；T24细胞中荧光物南主要分布于核膜周围。洗去细胞外罗丹明123后，细胞内荧兴以较快速度减弱。结论：药物外排加快是TADM细胞耐药的主要原因；药物在T24和TADM细胞中分布模式的不同，可能是细胞耐药性产生的另一重要原因。     

前列腺毛细血管内皮细胞屏障功能研究

目的 分离培养大鼠前列腺毛细血管内皮细胞,体外研究大鼠前列腺毛细血管内皮细胞的屏障功能.方法 采用细胞生长特性选择法分离培养大鼠前列腺毛细血管内皮细胞,用第Ⅷ因子相关抗原抗体对分离培养的前列腺毛细血管内皮细胞进行免疫学鉴定.免疫组化观察毛细血管内皮细胞之间紧密连接蛋白claudin-1的表达,采用跨膜电阻测量仪检测毛细血管内皮细胞的跨膜电阻,用酚红渗漏实验检测其通透性,以大鼠肺毛细血管内皮细胞、脑毛细血管内皮细胞作为阴性与阳性对照.结果 成功分离大鼠前列腺毛细血管内皮细胞,体外培养可以形成紧密的单层细胞结构,呈铺路石样生长.第Ⅷ因子相关抗原抗体的免疫荧光结果显示:分离培养的大鼠前列腺毛细血管内皮细胞胞浆表达绿色荧光,提示分离的细胞为毛细血管内皮细胞;免疫组化结果显示紧密连接蛋白claudin-1在相邻的毛细血管内皮细胞之间表达;体外培养的大鼠前列腺毛细血管内皮细胞,阴性对照组肺毛细血管内皮细胞,阳性对照组脑毛细血管内皮细胞的跨膜电阻峰值分别可以达到(142.2 ±3.1)、(43.3±3.5)、(248.2±6.2)Ω/cm2,并稳定保持2～3d,三者比较差异有统计学意义(P＜0.05).酚红渗漏实验结果显示前列腺毛细血管内皮细胞、阳性对照组脑毛细血管内皮细胞随着细胞单层跨膜电阻的增加,基底侧的酚红浓度减低,阴性对照组肺毛细血管内皮细胞酚红渗透量随跨膜电阻的改变变化趋势不明显.结论 大鼠前列腺毛细血管内皮细胞与脑毛细血管内皮细胞等屏障内皮相比拥有相似的结构功能,体外培养的大鼠前列腺毛细血管内皮细胞具有屏障特性,可以作为血前列腺屏障研究的体外模型.     

RDP1258对大鼠脾细胞增殖功能影响的体内研究

目的：探讨一种新型HLA衍生肽（RDP1258）对大鼠脾细胞增殖的全内免疫抑制作用及其机制。方法：人工固相合成PDP1258，用^3H-TdR掺入法观察其对体内大鼠脾细胞增殖反应的影响。采用酶化学法及免疫组化染色方法，观察其对体内脾细胞血纸素氧合酶-1（heme oxygenase-1，HO-1）活性的影响。结果：^3H-TdR掺入法检测表明，RDP1258可显著抑制脾淋巴细胞转化及MLR的增殖反应：但能够明显提高体内HO-1的活性。并增强其表达。结论：RDP1258体内应用能够显著抑制大鼠脾细胞由丝裂原或同种抗原引起的增殖反应，这种作用可能是通过影响HO-1的活性而实现。     

基于抗原表位预测的MUC1模拟肽表位筛选

目的:预测粘蛋白1(Mucin1,MUC1)抗原的B细胞表位,从噬菌体随机多肽文库筛选及鉴定MUC1抗原的模拟表位.方法:对MUC1的二级结构及免疫原性进行分析,预测MUC1的抗原表位.利用纯化获得的Ma695抗体筛选噬菌体随机12肽库,夹心ELISA分析噬菌体克隆,测定阳性克隆DNA序列,竞争性抑制实验鉴定阳性噬菌体克隆.结果:MUC1存在有17个潜在的抗原表位区域.经3轮筛选,获得了14个阳性克隆,DNA序列分析并推导出其氨基酸序列:KHYDPFHHRMPQ,QADTARS VALAG,VPSKPDLHVRSI及MTPIHYWNHNRV;4个噬菌体展示肽克隆抑制率均在50%以上.结论:预测MUC1抗原B细胞表位,为进一步研究MUC1结构和功能奠定了基础.所得序列KHYDPFHHRMPQ,QADTARSVALAG,VPSKPDLHVRSI及MTPIH YWN HNRV能模拟MUC1抗原表位.     

hBMP-7修饰的骨髓间充质干细胞对肾脏BMP-7的影响

目的观察人骨形态发生蛋白-7(hBMP-7)基因修饰的骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)移植对缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)肾脏内源和外源BMP-7表达的影响,探讨其对IRI肾脏的保护作用。方法 45只兔采用随机数字表的方法分为对照组(Ⅰ组)、单纯BM-MSCs移植组(Ⅱ组)和基因修饰的BM-MSCs移植组(Ⅲ组)(n=15)。构建hBMP-7重组腺病毒并转染兔BM-MSCs,建立肾脏IRI模型后,移植组于肾血流恢复后经肾动脉推注单纯和基因修饰的自体BM-MSCs,对照组同法推注等量生理盐水。3组分别于术后3、7、14 d采用随机数字表的方法取5只兔经耳缘静脉采血,检测血清肌酐(Crea)和尿素(Urea),观察肾功能情况;同时取肾组织进行HE染色行肾小管损伤评分,ELISA和RT-PCR法分别检测肾脏hBMP-7和BMP-7的蛋白浓度和mRNA表达。结果肾脏IRI后3、7、14 d,Ⅲ组Crea和Urea明显低于Ⅰ组和Ⅱ组(P<0.05);Ⅲ组肾小管损伤评分均低于Ⅰ组和Ⅱ组(P<0.05);Ⅲ组检测到第3、7、14天hBMP-7蛋白[(81.8±25.5)、(107.8±33.4)、(49.6±17.8)pg/mg]和mRNA(0.82±0.12、0.69±0.13、0.42±0.10)的表达并维持至少2周;Ⅲ组第3、7、14天BMP-7 mRNA(1.08±0.33、1.36±0.17、1.64±0.21)和BMP-7蛋白(95.9±21.3、137.0±14.9、192.1±18.0)的表达均高于Ⅰ组和Ⅱ组(P<0.05)。结论 hBMP-7基因修饰的BM-MSCs移植既能携带外源性hBMP-7在缺血再灌注损伤肾脏中表达,又能提高内源性BMP-7的表达,减轻肾脏损伤,促进肾脏修复,改善肾脏功能。     

新型HLA衍生肽对人外周单核细胞免疫功能的抑制作用

目的：探讨一种新型HLA衍生肽（RDP1258）对人外周血单核细胞增殖的免疫抑制作用及其机制。方法：人工固相合成RDP1258，用3H-TdR掺入法观察其在体外对人外周单核细胞增殖反应的影响，以酶化学法观察其对淋巴细胞血红素氧合酶-1（Heme oxygenase-1，HO-1）活性的影响。结果：RDP1258可显著抑制淋巴细胞转化及MLR的增殖反应；该肽体外降低HO-1活性呈现出剂量依赖性。结论：RDP1258能够显著抑制人外周单核细胞经丝裂原或同种抗原刺激引起的增殖反应，这种作用可能是通过影响HO-1活性而达到的。     

我国膀胱癌诊治指南解读

世界范围膀胱癌患者每年新发病例已超过30余万例,目前位列人体常见肿瘤的第7位,肿瘤死亡排位第8,严重威胁着人类的生命安全.从欧美的诊疗指南以及我国的诊疗指南的制订特点来看,循证医学已被充分地认识和贯彻.从临床细微的症状入手,分步骤、先简后繁、早期诊断、早期干预是循证医学的精髓所在.针对肿瘤疾病的诊治原则应当是预防为主,早期诊断,早期治疗.早期诊断强调及早进行膀胱镜活检及术后二次经尿道膀胱肿瘤电切活检.早期治疗方案则采用外科手术切除为主、膀胱灌注以及放化疗为辅的联合治疗措施.     

RDP1258对人外周血单核细胞增殖能力及HO-1活性的影响

目的观察一种新型HLA衍生肽(RDP1258)针对人外周血单核细胞由丝裂原以及同种异体抗原刺激导致的增殖能力的影响,并探讨其机制.方法人工固相合成RDP1258, 3H-TdR掺入法观察其在体外对人外周单核细胞增殖反应的影响,以酶化学法观察其对淋巴细胞血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1, HO-1)活性的影响.结果 RDP1258可显著抑制人外周血单核细胞的转化及MLR增殖反应;该肽体外降低HO-1活性呈现出剂量依赖性.结论 RDP1258能够显著抑制人外周单核细胞经丝裂原或同种抗原刺激引起的增殖反应,这种作用可能是通过影响HO-1活性而达到的.