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目的 观察含外源性人表皮细胞生长因子(hEGF)基因改造的角朊细胞(hEGF-MHK),对正常培养的角朊细胞(NHK)增殖的影响;探讨转hFGF对创面愈合的生物学效应及作用机理。方法 收集含真核表达质粒pcDNA3-hEGF的Hegf-MHK细胞培养上清,采用放射免疫分析法检测收集的上清液中hEGF含量;以10%的浓度加入由正常人皮肤组织分离培养的NHK细胞培养基内;MTT法测定NHK细胞增减15 相似文献
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目的观察糖尿病治疗药物胰高血糖素样肽-1(GLP-1)对糖尿病大鼠学习与记忆功能障碍的改善作用。方法雄性SD大
鼠随机分为正常组(Normal),糖尿病模型组组(DM)和GLP-1治疗组(GLP-1)。采用高脂高糖喂养合并链脲佐菌素(STZ)诱导
建立2型糖尿病模型。将糖尿病大鼠模型随机分为糖尿病组和GLP-1组,糖尿病组大鼠不进行治疗,GLP-1组大鼠于糖尿病成
型后第25天,以经皮下埋缓释泵方式给予GLP-1(30 pmol/kg/min)治疗7 d。治疗结束后先使用Morris水迷宫实验评估各组大
鼠的学习及认知能力,然后或获取大鼠大脑海马区组织,用实时定量PCR(Real-time PCR)检测认知相关基因的转录,蛋白印迹
法(Western blotting)检测认知相关蛋白的表达,免疫组化检测认知相关蛋白的表达和细胞定位。结果Morris水迷宫实验显示
糖尿病组大鼠的学习和记忆功能显著下降(P<0.05),荧光定量PCR结果发现糖尿病大鼠脑内APP,BACE1,Arc,ERK1/2,PKA,
PKC的基因转录升高(P<0.05),Western Blotting和免疫组化结果显示Arc蛋白分子在糖尿病大鼠中表达升高。而GLP-1处理
组大鼠的学习和记忆功能比糖尿病组有显著改善(P<0.05),脑内APP,BACE1,Arc,ERK1/2,PKA,PKC基因转录表达明显减少
(P<0.05),Arc表达降低。结论GLP-1治疗能够显著改善2型糖尿病大鼠的学习与记忆功能障碍,其效果可能是通过调控细胞
的PKC,PKA,ERK1/2通路,抑制Arc的表达而实现的。 相似文献
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目的观察培养的人视网膜色素上皮细胞(retinalpigmentepithelialcels,RPE)的增殖细胞核抗原(proliferativecelnuclearantigen,PCNA)和bc1-2的表达。方法用SABC法对培养的人RPE作鼠抗人PCNA单抗及兔抗人bc1-2抗体免疫组织化学染色。结果RPE在接种后24小时和48小时,PCNA的阳性率分别为31.2%和50.6%,阳性染色位于细胞核内,斑块状。bc1-2的表达为76%~90%,阳性染色在细胞浆,细颗粒状。结论培养中一半RPE有PCNA抗原表达,提示这些细胞处于S期;bc1-2抗原在大多数RPE表达阳性。这些生物标记物可能与培养的RPE生长活性有关。 相似文献
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0引言卜葡萄糖醛酸耷酶(以下简称eG)是溶酶体内的一种水解糖昔酶,与机体的许多生理、病理及药物代谢过程关系密切「“.近年研究表明,该酶的活性高低,与肿瘤的恶性程度及侵袭能力有关.抗体导向前体酶解前体药疗法(ADEPT)已将该酶作为重要的研究对象”’,为了特异地研究pG作为前体酶及预施前体药抗肿瘤的生物学效应,我们构建了含人pG一全片段的逆转录病毒表达载体pDOR-pG,为探讨pG对肿瘤生物学行为的影响及基因治疗奠定了基础,1材料和方法1.l材料pGEM-4-pG质粒由加拿大Toronto大学KyleJW教授惠赠,在其ECORI位点… 相似文献