Meckel腔及其相关结构显微解剖学研究

目的　研究Meckel腔 (三叉神经腔 )及其相邻结构的显微外科解剖 ,为临床相关疾病的显微手术提供形态学依据。方法　国人成年尸体头颅标本 38例 ,其中 30例标本经双侧椎动脉灌注红色乳胶 ,采用手术显微镜 (8～ 40倍 )观察和测量Meckel腔及其相邻结构。结果　Meckel腔是包绕三叉神经根和三叉神经节的硬脑膜和蛛网膜套 ,打开硬膜间隙 ,可清晰显露Meckel腔及三叉神经节分支 ;其上腔深度 14 11± 1 45mm ,下腔深度 15 78± 1 5 6mm ,宽 12 15± 1 34mm ,厚度 5 6 1±0 5 5mm ;下颌神经颅内段长 4 5 5± 1 76mm ,宽 5 77± 1 6 7mm ,厚度 1 49± 0 33mm。同时对毗邻的海绵窦外侧壁内外层、岩浅大神经、岩上窦及颈内动脉岩骨段水平部等结构的关系进行了显微解剖。结论　Meckel腔及相邻结构的显微解剖学研究 ,对中颅凹硬膜外入路的显微外科手术、侵入Meckel腔的后颅凹肿瘤显微外科手术 ,三叉神经痛治疗和影像学的检查等有临床指导价值。     

兔基底动、静脉与其它血管PGI_2、TXA_2代谢的比较

本文首次报道了用放射免疫方法研究家兔不同部位的血管PGI_2、TXA_2代谢的情况。基底动、静脉的PGI_2生成能力明显高于肾动、静脉;髂外动、静脉;腹主动脉与下腔静脉。而TXA_2生成量各个血管没有明显差异。本文提示PGI_2在维持正常脑血管张力与脑血流量上具有重要作用。     

人骨髓间充质干细胞的分离培养和向神经细胞分化的研究

目的　分离骨髓后培养人骨髓间充质干细胞 (hMSCs) ,进行体外传代扩增 ,并探索体外诱导分化为神经元样细胞的方法。方法　抽取人骨髓血 ,percoll paque液 (1 0 73g/ml)分离 ,DMEM/2 0 %FCS培养传代 ,至第 3～ 5代时加入巯基乙醇 (BME) ,观察hMSCs分化为神经元样细胞的形态学变化。结果　hMSCs在体外可以实现数目扩增 ,在特定诱导剂的作用下向神经元样细胞分化。结论　采用少量骨髓样本 ,经培养获得充足的细胞量 ,满足定向诱导和细胞移植的需要。     

人胚嗅鞘细胞与胚胎脊髓组织联合移植对大鼠脊髓损伤的治疗作用

目的探讨人胚嗅鞘细胞（OECS）和大鼠胚胎脊髓组织（ESC）联合移植在促进大鼠横断脊髓轴索再生方面有无协同作用。方法将体外培养纯化的OECS及新鲜获取的胎鼠脊髓组织用作治疗大鼠脊髓半切洞损伤模型的移植物,通过对动物定期进行行为学评定,结合病理学观察,并通过辣根过氧化物酶-四甲基联苯胺（HRP-TMB）逆行示踪技术,评价OECS和ESC对神经元存活、纤维再生的影响。结果OECS和ESC联合移植对损伤脊髓具有明显保护作用并能促进宿主脊髓轴突再生,ESC不能帮助再生轴索返回宿主组织;而OECS除能帮助再生轴索突破胶质屏障外更能使再生轴突髓鞘化,并具有一定的迁移能力。结论OECS和ESC联合移植在促进大鼠脊髓功能恢复中起到了互补和协同的作用。     

外伤性脑水肿脑组织氧自由基与超氧化物歧化酶活性变化的实验研究

本实验在建立Ｗｉｓｔａｒ大鼠急性外伤性脑水肿模型基础上，动态检测脑损伤后脑组织ＬＰＯ、ＳＯＤ和脑含水量，并作病理学光镜观察。结果表明，脑损伤后２ｈ，两大脑半球ＬＰＯ即显著增高；损伤后２ｈ、４ｈ损伤侧大脑半球ＳＯＤ活性显著增高，但ＳＯＤ／ＬＰＯ却明显下降，对侧半球ＳＯＤ变化不大；但８ｈ时两大脑半球ＳＯＤ均显著下降，且ＳＯＤ／ＬＰＯ显著降低，脑含水量与ＩＰＯ的升高呈平行关系，病理观察见外伤性脑水肿以血管源性为主，但同时伴有细胞毒性脑水肿。说明氧自由基是外伤性脑水肿发生、发展的关键性毒在物质，ＳＯＤ尽管早期有代偿性升高，但由于与ＬＰＯ比值下降，仍无法抗衡氧自由基的毒性作用。     

腺病毒介导的HSV-tk基因治疗人脑胶质瘤SHG44的研究

目的　探讨带有ＨＳＶｔｋ 基因的重组腺病毒（Ａｄ．ｔｋ） 结合ＧＣＶ 对国人脑胶质瘤ＳＨＧ４４ 的治疗作用。方法　Ｘｇａｌ 染色比较带有报告基因ＬａｃＺ的重组腺病毒（Ａｄ．ＬａｃＺ） 转染ＳＨＧ４４ 细胞和大鼠脑胶质瘤Ｃ６ 细胞的效率,ＭＴＴ法比较Ａｄ．ｔｋ／ＧＣＶ 系统对ＳＨＧ４４ 和Ｃ６ 细胞的敏感性,ＤＮＡ片段分析细胞杀伤机制;在活体用Ａｄ．ｔｋ／ＧＣＶ 治疗ＳＨＧ４４ 移植瘤。结果　ＭＯＩ为５０ 时,Ａｄ．ＬａｃＺ感染ＳＨＧ４４ 细胞的效率近１００％ ,较Ｃ６ 细胞高;ＭＯＩ为１００ 时,Ａｄ．ｔｋ 感染的ＳＨＧ４４ 细胞对ＧＣＶ 的敏感性较Ｃ６ 细胞高,其半致死剂量（ＩＣ５０） 分别为０ ．１２ μｍｏｌ／Ｌ 和０ ．２６ μｍｏｌ／Ｌ,有凋亡机制参与其细胞杀伤;５ ×１０８ＰＦＵ 的Ａｄ．ｔｋ 肿瘤原位注射结合ＧＣＶ治疗,有效抑制ＳＨＧ４４ 移植瘤生长,肿瘤组织坏死,出血伴有纤维组织增生;与Ａｄ ．ｔｋ／ＰＢＳ组、Ａｄ．ＬａｃＺ／ＧＣＶ 组、ＰＢＳ组相比,肿瘤抑制效率分别为９２．５ ％ 、９２．６％ 、８９ ．５％ （ Ｐ＜０ ．０１） 。结论　Ａｄ．ｔｋ／ＧＣＶ系统对人脑胶质瘤细胞的感染效率和敏感性较高,治疗国人脑胶质瘤效果显著。     

不同胚龄人神经干细胞的分离和培养

目的 探索不同胚龄人神经干细胞分离和培养的适宜条件。方法 在多种培养条件下，采用无血清培养和单细胞克隆技术，从7周和13周人胚脑中分离和培养神经干细胞，应用免疫荧光染色予以鉴定。结果 从两个不同胚龄的人胚脑中分离出具有自我更新和多分化潜能的神经干细胞，未包被组7周的人胚脑除高密度县浮培养法生长不良，其它密度及培养法均有克隆球形成；13周的人胚脑仅中等密度悬浮培养法及高密度贴壁培养法有克隆球形成；包被组各种密度培养均生长不良。结论 人胚脑中存在具有自我更新能力和多分化潜能的神经干细胞，随着胚龄增大，培养难度逐渐加大，高密度贴壁培养法适宜各胚龄神经干细胞的分离培养。     

神经干细胞与脑肿瘤基因治疗

基因治疗是脑肿瘤治疗的重要辅助手段,但由于肿瘤细胞常常浸润到周围正常脑组织,使得脑肿瘤治疗难以彻底。随着对神经干细胞的深入研究,发现神经干细胞能够迁移追踪肿瘤细胞,并具有多潜能分化、免疫原性低等诸多优点。此外,在动物实验中发现,神经干细胞能整合于宿主细胞,长期、稳定表达外源性基因。因此,神经干细胞是脑肿瘤基因治疗的理想载体。     

体外培养人类神经干细胞神经球中髓鞘的形成

目的：探索人类神经干细胞的体外培养条件和其形成的神经球的超微结构。方法：从胎脑皮质中机械分离细胞，N2培养基培养和扩增人类神经干细胞，应用免疫细胞化学方法对培养的细胞进行鉴定。对形成的神经球应用透射电镜进行超微结构研究。结果：从胎儿的脑皮质中成功分离培养出神经干细胞，形成典型的神经球，大部分细胞表达神经干细胞的标志物波形蛋白，细胞贴壁后可诱导分化 为神经元和胶质。早期培养的神经球中有典型的髓鞘形成。结论：从胎儿的脑皮质中成功地分离、培养出人类的神经干细胞，细胞呈悬浮状态生长，形成神经球。这种早期培养的神经干细胞有形成髓鞘的能力，可作为治疗人类脱髓鞘病变的潜在细胞来源。