人骨髓间充质干细胞源性神经元样细胞移植治疗局灶性脑缺血后神经功能障碍的实验研究

目的探讨人骨髓间充质干细胞（hBMSCs）源性神经元样细胞移植对局灶性脑缺血后神经功能缺失的治疗作用。方法应用胶氧尿苷（Brdu）标记全反式维甲酸联合细胞因子诱导的hBMSCs源性神经元样细胞,通过立体定向分别将磷酸盐缓冲液（BS）、hBMSCs及hBMSCs源性神经元样细胞植入局灶性脑缺血模型大鼠纹状体内。观察移植后各组大鼠神经功能恢复情况。结果hBMSCs和hBMSCs源性神经元样组术后神经损伤严重缺损评分（NSS）、平衡木试验（BBT）、一次性被动回避平台试验（SDPAT）、水迷宫试验（WMT）较PBS组显著好转（P〈0.01）;hBMSCs组术后1、3周NSS、BBT较hBMSCs源性神经元样组明显好转（P〈0.05）,术后6、8周两组比较差异无统计学意义（P〉0.05）;hBMSCs源性神经元样组SDPAT、WMT较hBMSCs组改善明显（P〈0.05）。结论hBMSCs和hBMSCs源性神经元样细胞脑内移植均能有效改善局灶性脑缺血大鼠的神经功能症状,hBMSCs移植作用快,而hBMSCs源性神经元样细胞移植在学习、记忆功能方面改善更好,可能是治疗局灶性脑缺血的一种方法。     

经蝶窦显微手术治疗蝶窦性脑脊液鼻漏（附7例报告）

７例蝶窦性脑脊液鼻漏患者，经４周保守治疗无效后，行经蝶窦入路颅外修补术，术后无１例复发。这种颅外修补术具有创伤小、并发症少、成功率高的优点，并可同时处理鞍内病变，是修补蝶窦性脑脊液鼻漏的最佳入路。     

脑干肿瘤的术后放疗和单纯放疗的治疗价值(附34例分析)

脑干(包括丘脑)肿瘤因解剖部位和生理功能的重要性,难以作手术全切,化疗效果不佳,故以放疗为主.我院自1975年5月～1989年2月,采用手术(部分切除和托氏分流术)加放射治疗12例,单纯放射治疗22例,回顾分析两种方法的治疗结果,重点探讨本病的治疗方案和手术作用.34例中男21例,女13例.年龄5岁～64岁,平均年龄28岁±5.53岁.肿瘤位于丘脑14例,其中累及侧脑室4例;脑桥18例,累及Ⅳ脑室、小脑4例、全脑干2例;中脑累及丘脑和脑桥1例;延髓累及Ⅳ脑室1例.诊断主要根据临床、气脑、脑室造影、CT检查和手术所见.获病理诊断者9例均为星形细胞瘤,其中Ⅰ级3例,Ⅱ级4例,Ⅲ和Ⅳ级各1例.     

人骨髓间充质干细胞体外优化条件的研究

目的通过比较5种不同体外培养人骨髓问充质干细胞（hMSCs）条件，找到一种能在质和量上均能满足需要的体外培养条件。方法使用Percoll-Paque液（1．073g／ml）分离人骨髓血，采用DMEM＋15%的小牛血清、人体白蛋白、人血清、脐带血清及MesenCult培养基，在相同培养条件下，动态观察hMSCs的生长状况、细胞数量变化，通过流式细胞仪检测细胞的纯化状况。结果5种培养条件在一定时相内均能获得较为纯化的hMSCs，但在生长速度和纯化率上存在一定的差异。结论Mesen Cult是一种较为优秀的hMSCs培养基．胎儿脐带血清培养也能在短期内获得足量纯化的hMSCs．人血清的使用还需要做进一步的研究。     

抑制NGF表达的pSUPER-H1 RNAi系统的构建

目的 构建抑制神经生长因子活性的siRNA表达载体。方法构建含有PolⅢ H1启动子的pSUPER-H1质粒，化学合成2对编码短发夹RNA的寡核苷酸序列，各64个碱基。退火、克隆到经BgiⅡ、HindⅢ酶切处理的pSUPER-H1质粒PolⅢ H1启动子下游，获得重组pSUPER-H1质粒。转化感受态大肠杆菌．挑选阳性克隆，抽取重组质粒，EcoRⅠ、Hind Ⅲ双酶切电泳、测序鉴定。结果重组pSUPER-H1质粒成功转化感受态大肠杆菌。经EcoRⅠ、HindⅢ双酶切琼脂糖凝胶电泳分析，表明64个碱基的寡核苷酸成功插入到预计位点，经测序鉴定，表明序列完全一致。结论重组pSUPER-H1载体的成功构建，为进一步研究神经生长因子活性打下基础。同时开展了质粒介导在体内表达siRNA的方法。     

靶向胰岛素样生长因子受体的RNA干扰技术抑制胶质瘤生长

目的研究靶向胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)的小干扰RNA(siRNA)对胶质瘤生长的抑制作用.方法逆转录-聚合酶链反应和Western blot测定RNA干扰后IGF-1R表达水平;采用Transwell体外侵袭实验进行细胞体外的侵袭力分析;流式细胞仪检测细胞凋亡率;裸鼠成瘤实验测定IGF-1R基因表达下调后胶质瘤C6细胞在体内致瘤能力的改变.结果靶向IGF-1R基因的siRNA可以有效抑制IGF-1R基因的表达,使IGF-1R mRNA表达减少60%,蛋白表达减少50%;流式细胞术检测到细胞凋亡率明显升高(P＜0.01);裸鼠体内成瘤能力降低.结论siRNA介导的IGF-1R基因下调能明显抑制胶质瘤细胞生长.     

犬重型脑损伤后神经源性肺水肿的实验研究

目的 探讨犬重型脑损伤后神经源性肺水肿（NPE）的血流动力学发生机制及多巴酚丁胺（Dobutamine)的治疗作用。方法 采用自由落体致犬重型脑损伤模型，24h动态监测血儿茶酚胺（CA）、血流动力学参数及血气变化，测定肺含水量及伊文思蓝透入量，观察肺脏病理改变，并用多巴酚丁胺进行实验治疗。结果 犬脑外伤后30min血CA显著增高，此后3h、8h、12h观察：血CA始终维持于高水平，体循环血管指数（SVRI）、肺循环血管阻力指数（PVRI）、中心静脉压（CVP）持续上升，心脏指数（CI）、左室每搏作功指数（LVSWI）、右室每搏作功指数（RVSWI）呈进行性下降，肺动脉楔压（PAWP）上升，血氧分压（PaO2)下降，至24h CI、PaO2降至最低，PAWP达最高值。统计分析显示：脑外伤组肺含水量和伊文思蓝透入量显著高于对照组。相关分析显示：脑外伤组24h时相CI与PaO2呈显著正相关、与肺含水量呈显著负相关。治疗组使用多巴酚丁胺后，CI趋于正常，PAWP明显下降，PaO2迅速好较。统计分析显示：治疗组肺含水量及伊文思蓝透入量显著低于脑外伤组。结论 1、重型脑损伤后血CA升高引起心脏前、后负荷持续增加，导致心功能失代偿引发急性心功能障碍。2、急性左心功能障碍可直接导致或加重神经源性肺水肿。3、多巴胺丁胺治疗有效。     

脑胶质瘤的基因治疗

1992年 ,美国ＮＩＨ批准了第 1个运用腺病毒介导的单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶 /丙氧鸟苷 (ＨＳＶ -ｔｋ/ＧＣＶ)系统治疗脑胶质瘤的临床方案 ,随后在全球掀起了肿瘤基因治疗的热潮。到目前为止 ,世界上已有 2 3 2项基因治疗临床试验方案获批准 ,其中 1 0 5项为肿瘤基因治疗 ,而脑肿瘤基因治疗又是肿瘤基因治疗中的热点 ,占 1 6项 (包括我国 1项 ) ,其中 1 4项针对恶性脑胶质瘤 ,另两项针对脑膜肉瘤和颅内转移癌。目前 ,脑肿瘤的基因治疗在全世界已进行了 2 0 0 0多例的临床试验。虽然其效果还不尽人意 ,然而 ,随着研究的进展 ,方法的逐渐…     

人脑胶质瘤组织中p21WAF1/CIP1表达及临床意义

[目的]探讨人脑胶质瘤组织中p21WAF1/CIP1基因蛋白表达水平与人脑胶质瘤恶性程度的关系。[方法]随机选取的Ⅰ￣Ⅳ人脑胶质瘤标本48例,正常外伤脑组织10例为对照。应用免疫组化技术(SP法)检测p21WAF1/CIP1基因蛋白在人脑胶质瘤中的表达水平。[结果]p21WAF1/CIP1基因蛋白在正常脑组织中均为阴性表达,而在胶质细胞瘤组织中表达增高,阳性率为70%￣78%,在Ⅰ～Ⅳ级胶质瘤组织中表达数值分别为2.11±0.10,1.44±0.56,1.0±0.12及0.89±0.32,表达水平随胶质瘤恶性程度的升高呈下降趋势,在高分化与低分化肿瘤之间存在显著性差异(P<0.05)。[结论]p21WAF1/CIP1可能参与胶质瘤的发生和发展,并可作为评估胶质瘤细胞瘤恶性程度以及预后的手段之一。     

垂体腺瘤引发的高泌乳素血症的临床特点及其影响因素

目的　探讨因垂体腺瘤引发的高泌乳素血症的临床特点及其影响因素。方法　收集42例表现为高泌乳素血症的垂体腺瘤病人的临床资料、病理资料 ,测定血清PRL水平 ,按性别、年龄、临床表现、病理类型和肿瘤最大直径分组 ,比较分析各组间血清PRL的差别以及各组间发病年龄的差别。结果　年龄、症状和肿瘤的病理类型分组之间的血清PRL水平差异有统计学上的意义(P <0 0 5 ) ,性别上无统计学上的意义 (P≥ 0 0 5 ) ;性别、临床表现、肿瘤的病理类型分组之间的患病年龄的差异有统计学意义 (P <0 0 5 )。结论　因垂体腺瘤所致的高泌乳素血症患者具有女性年龄轻、有症状的年龄轻、PRL腺瘤年龄轻的特点。患者的泌乳素水平与年龄、是否有临床内分泌症状的出现、肿瘤类型有关 ,但与患者的性别、肿瘤最大径的大小无关。