白术、附子、肉桂合剂对老龄大鼠心肌Na^＋,K^＋—ATPase和血清TAA的影响

目的:探讨白术、附子、肉桂合剂对老年大鼠心肌细胞膜钠钾ATP酶(Na,K-ATPase)活性和总抗氧化能力(TAA)的影响,及产生显著影响的时间。方法:给老年Wistar大鼠灌服白术、附子、肉桂合剂水煎剂,制备血清、心肌匀浆和心肌细胞膜,分别测定血清TAA和Na+,K+-ATPase活性,并与对照组进行比较。结果:老年大鼠心肌Na+,K+-ATPase活性和TAA明显低于青年对照组(P<0.05,P<0.01)。灌服合剂后30天心肌Na+,K+-ATPase明显高于老年对照组,分别为(0.910.05)、(0.620.09)μmolPimg-1Prh-1 ;而血清TAA在20天时明显高于老年对照组,分别为(8.451.78)、(5.380.58)Uml-1;两组各项比较差异均有显著性(P<0.01);血清TAA和Na+,K+-ATPase呈显著的正相关。结论:合剂能明显增强心肌Na+,K+-ATPase活性,其机理可能与血清TAA的提高有关,其显效时间为30天。     

齐墩果酸对白血病HL-60细胞PI3K、Akt、Cav-1表达的影响

目的：研究齐墩果酸（Oleanic add,OA）对人白血病HL-60细胞PDK、Akt、Cav-1表达的影响.方法：OA作用HL-60细胞后,采用透射电镜观察细胞形态,RT-PCR法检测HL-60细胞PDK、Akt、Cav-1的mRNA表达.结果：OA作用于HL-60细胞后,细胞形态改变明显,出现凋亡小体,且PI3K、Akt、Cav-1的mRNA表达下调（P＜0.01）.结论：OA可抑制肌-60细胞增殖,这可能与其下调HL-60细胞中PI3K、Akt、Cav-1的表达有关.     

齐墩果酸诱导人白血病HL-60细胞凋亡及细胞周期阻滞

目的：探讨齐墩果酸诱导HL-60细胞凋亡作用及其对细胞周期的影响。方法：以HL-60细胞为研究对象，以不同剂量的齐墩果酸处理HL-60细胞12 h、24 h、48 h、72 h后，用MTT法观察HL-60细胞的生长抑制率；琼脂糖凝胶电泳测定DNA梯形条带；流式细胞仪分析HL-60细胞细胞周期的变化；同时用Western blotting 检测凋亡途径最终执行者caspase-3的表达。结果：齐墩果酸对HL-60细胞生长具有明显的抑制作用，其中80 μmol/L齐墩果酸作用48 h对HL-60细胞的抑制率达到50%以上，齐墩果酸诱导细胞凋亡呈明显的时间和剂量依赖性； HL-60经齐墩果酸处理48 h出现典型的DNA梯形条带；以80 μmol/L的齐墩果酸处理HL-60细胞12 h即可以使caspase-3的前体procaspase-3断裂为有活性的caspase-3；流式细胞技术检测结果表明HL-60细胞经齐墩果酸处理后细胞周期阻滞于G₁期，其中48 h和72 h分别达到63.24%和67.90%。结论：齐墩果酸可以诱导HL-60细胞凋亡，并使细胞阻滞于G₁期。     

齐墩果酸对白血病HL-60细胞PI3K、Akt、Cav-1表达的影响

目的:研究齐墩果酸(Oleanic acid,OA)对人白血病HL-60细胞PI3K、Akt、Cav-1表达的影响。方法:OA作用HL-60细胞后,采用透射电镜观察细胞形态,RT-PCR法检测HL-60细胞PI3K、Akt、Cav-1的mRNA表达。结果:OA作用于HL-60细胞后,细胞形态改变明显,出现凋亡小体,且PI3K、Akt、Cav-1的mRNA表达下调(P<0.01)。结论:OA可抑制HL-60细胞增殖,这可能与其下调HL-60细胞中PI3K、Akt、Cav-1的表达有关。     

黄芪血清对衰老细胞抗氧化作用及p16表达影响的研究

目的:观察黄芪血清对HDF细胞SOD 活性,MDA含量及p16mRNA表达的影响.方法:以黄芪水煎剂灌胃家兔获得含药血清,以含黄芪血清的DMEM培养基培养HDF细胞,同时以不含黄芪的家兔血清作空白对照,比色法测定HDF细胞的SOD 活性及MDA含量,RT-PCR检测p16 mRNA表达.结果:含黄芪血清培养基培养的HDF细胞与空白血清培养的HDF细胞比较SOD 活性增加,p16表达减少.结论:含黄芪血清的培养基通过增加HDF细胞SOD活性,减少MDA含量及p16表达而起到抗衰老作用.     

白术、附子、肉桂合剂对老年小鼠脑线粒体Ca~(2+)和脑细胞凋亡的影响

目的从Ca2+与细胞凋亡角度探讨白术、附子、肉桂合剂对老年小鼠脑细胞保护作用。方法将昆明种小鼠分为青年组、对照组和合剂组,合剂组按11.6 g/kg灌服白术、附子、肉桂合剂(简称合剂),30 d后检测脑线粒体Ca2+,以及脑细胞凋亡率。结果与青年组比较,对照组脑线粒体Ca2+的含量减低(P0.01);与对照组比较,合剂组脑线粒体Ca2+的含量升高(P0.01),脑凋亡细胞减少(P0.05)。结论白术、附子、肉桂合剂能增加老年小鼠脑线粒体Ca2+含量,降低脑细胞凋亡数,改善脑细胞功能。     

ROS在齐墩果酸诱导HL-60细胞凋亡中的作用

目的 观察ROS在齐墩果酸(OA)诱导HL-60细胞凋亡中的作用.方法 分瓶培养细胞,实验设空白对照组和12、24、48 h的OA用药组.收集细胞,提取细胞总蛋白,制备去线粒体细胞浆蛋白,Western印迹法检测caspase-9表达.流式细胞术检测ROS水平.结果 OA处理HL-60细胞后,ROS含量增加,并引起caspase-9的激活.结论 OA使ROS量增加,通过线粒体凋亡信号通路诱导HL-60细胞凋亡.     

半合成-酶连法克隆EFsec基因及其初步表达分析

目的将缺失一段编码序列的真核硒代半胱氨酸-tRNA特异性延伸因子(EFsec-)基因补齐,并克隆到真核表达载体进行初步表达分析。方法采用人工合成法合成所缺失的基因片段,然后利用EFsec-基因序列中靠近5’端存在的天然酶切位点进行酶连,再用PCR方法扩增出拼接产物,并将其克隆到pcDNA3.1(-)载体。采用脂质体转染法转染HEK293T细胞后应用RT-PCR法检测EFsec基因的表达。结果准确快捷地将EFsec-基因补齐了其5’端缺失的基因序列,并成功地构建了其表达质粒pcDNA3.1-EFsec,转染哺乳动物细胞后检测到了EFsec基因的显著表达。结论半合成-酶连法可以高效快捷地补齐并克隆缺失的EFsec-基因,提供了一种拼接基因的有效策略和方法,同时也为EFsec基因的下一步研究奠定了基础。     

齐墩果酸对K562细胞bax、bcl-xL mRNA表达的影响

目的 探讨齐墩果酸(OA)对人慢性粒细胞白血病K562细胞bcl-xL和bax基因表达的影响.方法 采用光学显微镜观察OA对体外培养K562细胞的增殖抑制情况;并用RT-PCR法检测bcl-xL和bax mRNA的表达.结果 与空白组和DMSO对照组比较,80 μmol/L OA处理细胞后,细胞增殖受抑制;OA用药组bax mRNA含量增加,bcl-xL mRNA含量减少.结论 OA可以诱导K562细胞凋亡,其机制可能通过上调bax基因表达及下调bcl-xL基因表达有关.     

以职业同一性教育为内容的课程思政建设对临床医学专业学生成长的作用研究

目的：本科阶段是完善职业同一性的关键阶段,培养学生确立职业同一性,有助于使他们对未来的职业与工作更重视,并促使学生在职业探寻中主动采取积极有效的行动。方法：以2018级临床医学专业学生为实验对象,把职业同一性教育贯穿于课程思政教学中,有针对性地分散至每学年。结果：学生的职业兴趣、能力评价、职业决策、职业目标稳定性等指标有明显提高,学生和教师的满意度明显增强,取得了较好的效果。结论：以职业同一性教育为主要内容的课程思政建设促进了学生的职业认同感,提升了学生的岗位胜任力。