多囊卵巢综合征肥胖患者与性激素及胰岛素水平相关性研究

目的：分析造成多囊卵巢综合征肥胖患者的发病机理与病因,同时为有效治疗给出参考。方法随机抽取自2010年4月~2013年12月来本院进行治疗的120例多囊卵巢综合征患者,120例多囊卵巢综合征患者当中,经过相关检测得知患者主要以肥胖者为主。检测患者胰岛素、糖耐量以及血清LH、FSH、E2、P、T水平。结果上述患者有胰岛素抵抗的占28.2%,有糖耐量受损并胰岛素抵抗的占了13.1%,糖耐量受损患者占5.5%。仅有胰岛素抵抗的患者,其中肥胖者为35.7%;仅糖耐量受损患者,有36.3%为肥胖者;胰岛素抵抗并糖耐量受损患者,其中34.6%为肥胖者。将其分为甲乙两组,甲组肥胖患者与乙组患者（除了肥胖患者为乙组）的LH、LH/FSH、E2、T水平差异无统计学意义（P〉0.05）。结论有不少多囊卵巢综合征患者存在胰岛素抵抗以及糖耐量受损,而在胰岛素抵抗以及糖耐量受损的患者中多以肥胖者为主,肥胖能够促使患者产生胰岛素抵抗。     

LINC01123通过miR-449a调控HGF/c-MET通路参与宫颈癌发生发展的分子机制

摘要：目的　探讨长链非编码RNA（lncRNA）LINC01123对宫颈癌（CC）细胞增殖、迁移及侵袭的影响及可能的作用机制。方法　在GEPIA数据库分析CC组织中差异表达的lncRNA;体外培养人CC细胞系SiHa、HeLa、CaSki和人正常子宫颈上皮细胞HcerEpic,实时荧光定量PCR（qPCR）检测细胞中LINC01123、microRNA-449a（miR-449a）的表达水平。取对数生长期的CaSki细胞,分成对照组（NC）组、pcDNA3.1-NC组、LINC01123过表达组、si-NC组、LINC01123沉默组、LINC01123沉默+inhibitor-NC组、LINC01123沉默+miR-449a抑制剂组,转染48 h后,收集各组细胞用qPCR法检测转染效果;CCK-8法检测细胞增殖活性;流式细胞术分析细胞凋亡;划痕实验和Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力;Western blot检测细胞中肝细胞生长因子（HGF）/细胞间质上皮转化因子（c-MET）通路相关蛋白的表达;双荧光素酶报告基因验证LINC01123与miR-449a的靶向关系。结果　LINC01123在CC组织和细胞中的表达升高,而miR-449a在人CC细胞中呈低表达（P＜0.05）。与NC组比较,LINC01123沉默组LINC01123表达、细胞增殖活性、迁移和侵袭能力、HGF表达和磷酸化c-MET（p-c-MET）/c-MET比值降低,miR-449a表达、细胞凋亡率升高（P＜0.05）;下调miR-449a的表达可明显减弱LINC01123沉默对CaSki细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用（P＜0.05）。双荧光素酶检测结果显示,miR-449a是LINC01123的靶基因。结论　沉默LINC01123可通过上调miR-449a表达,抑制HGF/c-MET信号通路的激活,从而抑制CC细胞的生长和转移。     

隔膜型主动脉瓣下狭窄起源的初探

为使胚胎学的研究面向临床,我们采用两维-脉冲多普勒超声心动图检查,诊断33例隔膜型主动脉瓣下狭窄(membranous subaortic stenosis,MSS),其中23例同时合并室间隔膜部缺损(包括5例法乐四联症)。MSS系主动脉瓣下左室流出道有隔膜或新月形的纤维环存在,隔膜常位于主动脉瓣下1～3cm处。该隔膜可能主要由于心脏发生过程中心球脊发育不全引起。     

精子功能检测的研究——Ⅰ.底物膜技术对精子顶体酶的测定

本研究应用健康人和不育症患者的精液各30人份,用底物膜技术检测精子顶体酶,同时进行精子形态学和多次曝光摄片分析。结果表明,在精子头部周围,顶体蛋白酶和透明质酸酶活性区域呈现亮区或晕。不育症患者顶体蛋白酶反应率和反应区的平均直径显著降低(P<0.01),但是透明质酸酶无明显变化(P>0.05).不育症患者精子畸形率高于健康人.不育症患者和健康人精子运动平均速度相似,但直线运动方式的精子在前者明显减少.本文对精子的顶体酶、形态异常和运动等相互关系作了讨论.     

沉默circRNA hsa_circ_0061137通过miR-217/ARL6IP1轴抑制宫颈癌细胞生长和转移

目的:探讨环状RNA（circular RNA,circRNA）hsa_circ_0061137对宫颈癌（cervical cancer,CC）生长转移的影响及其相关作用机制。方法:取CC组织样本（93例）及癌旁组织样本（93例）,正常宫颈上皮细胞系（End1/E6E7）和CC细胞系（HeLa、SiHa、C-33A、CaSki）,用qRT-PCR法检测组织和细胞中hsa_circ_0061137、miR-217、ARL6IP1的表达;双荧光素酶报告实验验证hsa_circ_0061137、ARL6IP1与miR-217的靶向调控作用。敲低CC细胞系（HeLa、SiHa）中hsa_circ_0061137及HeLa细胞共转染si-hsa_circ_0061137和miR-217抑制物（miR-217 inhibitor）后,用CCK8法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Transwell检测细胞迁移和侵袭;Western blot检测上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白（E-cadherin、Vimentin）的表达;qRT-PCR法检测各组细胞中hsa_circ_0061137、miR-217、ARL6IP1的表达。裸鼠荷瘤实验检测敲低hsa_circ_0061137后对肿瘤生长的影响。结果:hsa_circ_0061137、ARL6IP1在CC组织及细胞系中表达水平显著高于正常宫颈组织及正常宫颈上皮细胞（P＜0.05）;miR-217在CC组织及细胞系中表达水平显著低于正常宫颈组织及正常宫颈上皮细胞（P＜0.05）。hsa_circ_0061137、ARL6IP1分别与miR-217之间存在靶向负调控关系。敲低hsa_circ_0061137,可抑制CC细胞增殖、迁移、侵袭及EMT特性,并促进CC细胞凋亡（P＜0.05）;miR-217 inhibitor可部分逆转hsa_circ_0061137敲低发挥的抗CC生长及转移作用（P＜0.05）。裸鼠荷瘤实验证实hsa_circ_0061137敲低可显著减弱瘤体生长增殖,并抑制ARL6IP1表达（P＜0.05）。结论:沉默hsa_circ_0061137可发挥抗CC增殖及转移作用,其作用可能与靶向miR-217/ARL6IP1轴有关。     

氯化三乙基锡对大鼠C6胶质瘤细胞增殖抑制作用

目的：探讨氯化三乙基锡（TETC）对体外培养大鼠C6胶质瘤细胞增殖的抑制作用。方法：采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法及倒置显微镜观察方法检测0.5、1.0和2.0 μmol·L^-1 TETC对体外培养大鼠C6胶质瘤细胞作用48 h增殖抑制作用,采用电镜方法观察给予0.5、1.0和2.0 μmol·L^-1 TETC 48 h后C6胶质瘤细胞超微结构变化。结果：0.5、1.0和2.0 μmol·L^-1 TETC在体外均可抑制C6胶质瘤细胞增殖,抑制率分别为15.62%、36.16%和41.92%,存在着剂量依赖性上升趋势,抑制率在不同浓度组间以及不同浓度组与对照组间比较,差异均有显著性（P<0.05）。电镜观察0.5、1.0和2.0 μmol·L^-1 TETC作用于C6胶质瘤细胞48 h后其超微结构变化,可见到核内染色质趋边凝聚,排列于核膜内侧,呈早期凋亡改变细胞。结论：TETC可抑制体外培养大鼠C6胶质瘤细胞增殖。     

氯化三乙基锡对体外培养大鼠C6胶质瘤细胞的增殖抑制作用

目的：探讨氯化三乙基锡（TETC）对体外培养大鼠C6胶质瘤细胞的增殖抑制作用及其机制,为胶质瘤治疗提供实验依据。方法：采用MTT法检测0.5、1.0和2.0 μmol/L TETC对大鼠C6胶质瘤细胞作用24和48 h后细胞增殖抑制率,采用Hoechest33258染色荧光显微镜观察0.5、1.0和2.0 μmol/L TETC作用48 h后 C6胶质瘤细胞核的形态学变化,采用流式细胞术(FCM)检测0.5、1.0和2.0 μmol/L> TETC作用48 h后 C6胶质瘤细胞周期和凋亡。结果：0.5、1.0和2.0 μmol/L TETC在体外可抑制C6胶质瘤细胞增殖,24 h抑制率分别为7.92％、9.51％和19.03％;48 h抑制率分别为15.62％、36.16％和41.92％,存在剂量依赖性和时间依赖性上升趋势,48 h抑制率在各剂量组间及各剂量组与对照组间比较差异有显著性（P<0.05或P<0.01）。荧光显微镜显示TETC作用C6胶质瘤细胞48 h后,细胞呈现核浓缩和碎裂的凋亡形态学改变。1.0和2.0 μmol/L TETC作用C6胶质瘤细胞48 h后,G₀/G₁期细胞比例明显高于对照组（P<0.05）,S期细胞比例明显低于对照组（P<0.05
）,细胞凋亡比例明显高于对照组（P<0.05）。结论：TETC对大鼠C6胶质瘤细胞有增殖抑制作用,通过细胞周期阻滞及诱导凋亡可能是TETC抑制C6胶质瘤细胞增殖的作用机制。     

氯化三乙基锡抑制C6胶质瘤细胞增殖及机制

目的探讨氯化三乙基锡(TETC)对C6胶质瘤细胞体外增殖抑制作用的机制。方法采用MTT法、荧光原位末端标记方法和Western印迹方法,分别检测不用浓度TETC作用C6胶质瘤细胞48 h后细胞增殖抑制率、细胞凋亡率和Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。结果 TETC对C6胶质瘤细胞具有抑制增殖作用,增殖抑制率呈剂量依赖性;TETC可诱导C6胶质瘤细胞凋亡,细胞凋亡率呈剂量依赖性上升;TETC可下调Bcl-2和上调Bax蛋白表达水平。结论 TETC可抑制C6胶质瘤细胞体外增殖并诱导其凋亡,机制可能与其下调Bcl-2和上调Bax蛋白表达有关。     

精子透明质酸酶的底物膜显示法

透明质酸酶存在于精子的顶体内,借此精子能够进入卵细胞内形成受精卵,但该酶至今尚无好的检测方法。Mecombs和White(1968)的方法可显示组织切片中的透明质酸酶,但用于精子涂片尚未见报道。我们参照该方法,用加有透明质酸钠的底物膜来显示精子的透明质酸酶获得了成功,现将该方法介绍如下。     

封闭式集尿袋临床应用的初步体会

我院自1984年10月,参考国外的有关资料,与上海塑料彩印厂共同设计了封闭式的集尿袋引流系统,并于1985年3月应用于临床。4个月来我们连续观察了48例,317人次的病人,并与开放式引流系统作了对比。初步证实了这种封闭式引流系统比传统的开放式引流系统明显地降低了尿路感染率,同时使用方便,节省时间,降低了费用。下面将应用情况做一个简单介绍。一、封闭式集尿袋的结构封闭式集尿袋是由无毒聚氯乙烯制成,其容量为2000ml,尿袋表面标有刻度,袋口连接70～100cm长的导管。导管的远端装有螺旋形接管,可连接各种不同规格的导尿管。紧靠袋口内面有4cm宽的双层塑料薄膜,组成了单向阀门,这样就规定了尿液只能定向流入尿袋,而不致返流。在尿袋的