浅谈优化病理学实验教学手段

病理学实验教学是病理学教学过程中的重要组成部分,通过Motic数码显微互动实验系统等在病理学实验教学中的充分应用,优化教学手段,提高病理学实验教学质量,为临床各科的学习打下坚实的基础。     

双向分化肿瘤血管生成拟态分子机制初步观察

目的研究肿瘤细胞分泌Ⅳ型胶原和PAS阳性物质在血管生成拟态(VM)中的作用以及VM对肿瘤细胞表达VEGF的影响。方法收集双向分化恶性肿瘤石蜡包埋样本158例，制作成组织芯片，进行CD31和VEGF重复染色及Ⅳ型胶原染色。通过网格计数法，比较CD31与PAS阳性图案围成的管道面积差别及分布特点，以及有VM的点阵和无VM的点阵VEGF表达的差别。结果VM的基底膜样结构表现为PAS及Ⅳ型胶原阳性；无VM的双向分化肿瘤VEGF表达高于有VM者，其中在恶性黑色素瘤及腺泡型横纹肌肉瘤中，二者VEGF的表达差异有显著性(P<0．05)。结论PAS阳性物质和Ⅳ型胶原参与构建了VM的管壁，VEGF表达的差别表明VM的存在可以提供肿瘤细胞氧气和营养物质。     

FasL在染矽尘大鼠肺组织细胞不同时间点的表达

【目的】探讨FasL在矽肺肺纤维化过程中的作用。【方法】随机将Wistar大鼠分为对照组和染矽尘组。采用暴露式气管内一次注入二氧化硅粉尘悬液建立大鼠矽肺模型。模型建立后,分4个时间点(7、14、21、28 d),每组分别取8只大鼠将其处死取肺组织,用组织芯片技术结合免疫组化SP法观察大鼠肺组织不同时间点FasL的表达情况,采用Image-Pro Plus Version 4.5 for windowsTM图像分析计算积分光密度。【结果】大鼠矽肺模型组肺组织FasL在染矽尘后的7、14、21和28 d时,表达显著高于对照组,差异有显著性(P<0.05),表达高峰是在染矽尘后的14 d。【结论】肺组织FasL的表达与矽肺纤维化的发生发展有关。     

染矽尘大鼠不同时间点肺组织细胞凋亡

[目的]探讨细胞凋亡在矽肺肺纤维化过程中的作用.[方法]随机将Wistar大鼠分为对照组和染矽尘组.采用暴露式气管内一次注入二氧化硅粉尘悬液建立大鼠矽肺模型.模型建立后,分6个时间点（1、3、7、14、21、28 d）,每组分别取8只大鼠将其处死取肺组织,用TUNEL法观察大鼠肺组织不同时间点细胞凋亡的情况,并采用Image-Pro Plus Version 4.5 for windowsTM图像分析计算积分光密度.[结果]大鼠矽肺模型肺组织凋亡阳性细胞在染矽尘后的1、3、7、14、21、28 d时,显著高于对照组,有显著性差异（P＜0.05）[结论]染矽尘大鼠肺组织细胞凋亡与矽肺纤维化的发生发展有关.     

染矽尘大鼠肺组织一氧化氮合酶的表达

目的　研究染矽尘大鼠早期炎性肺损伤过程中一氧化氮合酶 (NOS)的表达规律 ,为矽肺纤维化机制提供理论依据。方法　气管暴露法建立矽肺动物模型。测定支气管肺泡灌洗液 (BALF)中诱导型NOS(iNOS)的表达和总NOS的活力。在组织芯片上使用SP法检测大鼠肺组织iNOS的表达 ,并用Image ProPlus图像分析法对iNOS的表达进行定量测定。结果　iNOS主要表达在巨噬细胞和中性粒细胞胞浆内。与对照组相比 ,染矽尘大鼠肺组织中iNOS积分光密度于染尘后 3、7d时分别增加了1.47× 10 5 、2 .73× 10 5 ,2 8d时降低了 1.11× 10 5 ,差异均有显著性 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。大鼠BALF中iNOS活力在染尘后 3、7、14d时分别增加了 0 .86、1.89、0 .92U/ml ,差异均有显著性 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。BALF总NOS活力在染尘后 1、3、7、14d时分别增加了 1.43、2 .0 5、2 .61、2 .19U/ml,差异均有显著性 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。结论　在矽尘诱导下 ,大鼠肺组织中表达iNOS的细胞主要是肺泡巨噬细胞和中性粒细胞 ,其肺组织中iNOS的表达从染尘后 1d至 2 8d有一抛物线型的过程     

血管生成拟态和血管生成及其意义

血管生成拟态(vasculogenic mimicry)是近两年来提出的一种全新的肿瘤内血管生成模式.其特点为肿瘤细胞通过自身变形和基质重塑产生血管样通道,通道内无内皮细胞衬覆,通道外基底膜PAS染色为阳性.该血管样通道生成机制、管壁结构等都与传统的肿瘤内血管生成不一样,因此通过血管生成拟态构建的血管样通道有可能成为某些肿瘤新的治疗靶点.     

多西环素对小鼠黑色素瘤基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9表达和活性的抑制作用

目的 观察多西环索对小鼠恶性黑色素瘤模型MMP-2、MMP-9表达和活性的作用.方法 C57/BL小鼠47只建立黑色素瘤模型,随机分为给药组和对照组.给药组每日腹腔注射盐酸多西环素,对照组给予等量生理盐水.7 d后处死给药组和对照组小鼠各10只.继续给药14 d后处死剩余小鼠,比较两个时间点多西环素对MMP-2、MMP-9、VEGF表达的影响.并用检测MMP.9、MMP-2酶原、活性MMP-2的活性变化.结果 多西环索给药7 d抑瘤率为52.36%,给药14 d抑瘤率为35.63%.给药组的MMP-2、MMP-9表达均低于对照组,而VEGF的表达高于对照组.给药组的MMP-9和活性MMP-2的条带酶解量以及活性MMP-2与MMP-2酶原比值均低于对照组,但两组间MMP-2酶原条带酶解量差异无统计学意义.结论 多西环素可以抑制恶性黑色素瘤小鼠移植瘤的生长,其作用机制可能和抑制MMP-2、MMP-9的表达和活性有关.     

黑色素瘤组织内三种血液供应模式时间关系的初步探讨

目的：探讨血管生成拟态（VM）、马赛克血管和内皮依赖性血管三种血液供应模式在肿瘤生长过程中的时间延续性变化。方法：将B16黑色素瘤组织块接种到C57纯系小鼠鼠鼷部．待肿瘤大小约0．5mm左右时．连续处死小鼠，将瘤组织块制作成切片．在切片上进行三种血液供应模式的计数．初步判定三种血液供应模式的时间关系趋势，同时利用双重免疫组化染色和电镜技术进行形态学观察.结果：随着肿瘤体积的不断增大．VM数目不断减少．而内皮依赖性血管数目呈现出不断增加趋势，马赛克血管的数目多少无明显变化．肿瘤体识的大小与内皮依赖性血管数目呈高度正相关（γ=0．718，P=-0．009）而与VM成高度负相关（γ=0．77，P=0．003）免疫组化双染和电镜观察的结果显示马赛克血管的管壁同时由内皮细胞和肿瘤细胞构成.结论：VM是黑色素瘤生长的早期血液供应的主要形式后来VM逐渐被内皮细胞依赖性血管替代，马赛克血管可能是VM和内皮依赖性血管之间的一种过渡形式.     

262例双向分化恶性肿瘤临床资料及免疫组化的分析

目的：分析262例双向分化恶性肿瘤临床资料及免疫组织化学染色的结果。方法：收集1950～2000年天津肿瘤医院库存双向分化恶性肿瘤组织的石蜡包埋样本约800余例，筛选临床和病理资料完整的样本262例(其中恶性黑色素瘤124例，滑膜肉瘤64例，横纹肌肉瘤47例，间皮肉瘤23例，上皮样肉瘤4例)，制作成组织芯片，进行免疫组化染色，分析不同的免疫组化指标在肿瘤诊断中的作用，并对以前的病理诊断进行复习。在此基础上分析不同肿瘤的发病年龄高峰、性别比例、发病部位及预后。结果：124例恶性黑色素瘤有8例不表达HMB45，不同双向分化恶性肿瘤的发病高峰不一致，手术治疗后患者生存时间也不同。结论：双向分化恶性肿瘤中免疫组化染色特异性较差，综合分析几种免疫组化指标有助于病理诊断。     

滑膜肉瘤患者预后的多因素分析

目的:探讨影响滑膜肉瘤患者的预后因素.方法:采用免疫组织化学方法检测72例滑膜肉瘤中上皮钙粘素(E-cad)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和Ki-67的表达,并对可能影响预后的14项临床病理因素进行单因素和多因素分析.结果:1)E-cad(-)、( )、( )和( )分别为11例(15.28%)、22例(30.56%)、22例(30.56%)和17例(23.60%),MMP-2(-)、( )、( )和( )分别为11例(15.28%)、18例(25.00%)、17例(23.60%)和26例(36.12%),Ki-67标记指数(LI)为2.00%～73.00%(28.30%±16.61%);2)全组术后1、3、5、7和10年生存率分别为86.44%、54.24%、28.81%、16.95%和8.47%;3)单因素分析显示,手术切除范围、转移、组织学分级、临床分期、Ki-67LI、及E-cad和MMP-2表达情况对患者预后有影响(P＜0.05);4)多因素分析表明临床分期、E-cad和MMP-2表达情况影响滑膜肉瘤的预后(X2=21.00,v=3,P=0.000).结论:临床分期、E-cad和MMP-2表达情况是影响滑膜肉瘤预后的重要因素.