结肠肿瘤细胞凋亡途径的研究及其在结肠癌靶向治疗中的可能性

目的观察两种结肠肿瘤细胞的凋亡途径哪种更为重要,并探讨其今后用于靶向治疗的可能性。方法应用免疫组织化学Max VisionTM快捷法检测外源性途径促凋亡蛋白Fas配体（FasL）、Bid及原位分子杂交法检测内源性途径促凋亡蛋白细胞色素CmRNA（Cyt c）在结肠癌（肠癌组）、结肠腺瘤（腺瘤组）的表达及FasL、Bid在正常结肠黏膜（正常组）的表达。表达程度采用半定量积分法。并对其中4例结肠癌、6例结肠腺瘤及7例正常肠黏膜细胞线粒体观察超微结构改变。结果外源性途径凋亡检测显示当正常组和腺瘤组FasL的阳性表达率分别为50%、62.5%时,肠癌组仅达到16.07%,提示结肠癌时外源性凋亡途径不是主要途径。外源性途径促凋亡蛋白Bid参与凋亡活动时,其表达率在肠癌组为66.07%,也低于正常组的72.22%及腺瘤组的94.44%,差异有统计学意义。而内源性途径凋亡的促凋亡蛋白Cyt c检测发现,随分化程度升高表达率亦上升。低、中、高分化肠癌的表达率分别为87.5%（14/16）、93.9%（31/33）及100%（11/11）。肠癌线粒体的超微结构观察显示,Cyt c呈高表达者,肠癌组及正常组均为50%（2/4）,腺瘤组则为66.7%（4/6）。肠癌组细胞线粒体大小不一,分布不均,基质不均,嵴发育不良且分布不均,少数线粒体膜破裂。腺瘤组大部分细胞线粒体丰富、规则,呈卵圆形,大小较一致,嵴发育良好,但基质不均,少部分线粒体嵴有断裂。正常组细胞线粒体嵴发育良好,基质均匀,少部分线粒体嵴有断裂。结论结肠癌时内、外源性凋亡途径均存在,但以内源性途径凋亡为主;对于内源性途径凋亡在结肠癌时发生的病理、生理意义有待进一步研究。在此之前,采用内源性途径的靶向治疗,可能时机尚不够成熟。     

慢性肝病肝组织凋亡蛋白TNF-α、TNFR、Bcl-2家族表达的研究

探讨凋亡蛋白TNF -α、TNFR及Bcl- 2家族在慢性肝炎、肝硬化及肝癌发生、发展中对凋亡的调节作用。 94例慢性肝病患者 ,慢性肝炎 2 8例 ,肝硬化 2 2例 ,肝癌 4 4例 ,采用原位杂交法检测TNF -α、TNFR及免疫组化SP法检测Bcl- 2家族凋亡蛋白及Fas、FasL在其肝组织中的表达。肝硬化TNF -α、TNFR表达率为 90 9%、95 5 % ,明显高于慢性肝炎组 (5 3 6 %、4 6 4 % )及肝癌组 (43 2 %、38 6 % ) ,P <0 0 5或 <0 0 1;Fas在慢性肝炎和肝硬化与肝癌组表达分别为 (10 0 0 %、81 8%、5 6 8% ) ;前二者与肝癌相比P <0 0 1表达明显高于肝癌组。HAI记分越高TNF-α、TNFR和Fas表达越明显 ,而Bcl- 2表达越低。说明在慢性肝病时 ,TNF -α、TNFR、Bcl- 2各凋亡蛋白家族参与了肝组织凋亡的调节 ,引起不同程度的肝组织损伤     

结肠癌患者细胞凋亡与预后意义的初步研究

目的探讨促凋亡蛋白Bid在大肠癌、大肠腺瘤及正常肠黏膜组织的表达差异，了解其在大肠癌生物治疗中的价值。方法应用免疫组化MaxVision^TM快捷法检测正常肠黏膜18例、结肠腺瘤21例及结肠癌83例的Bid表达。结肠癌Dukes分期为A期22例、B期20例、C期20例及D期21例。表达程度采用半定量积分法。结果Bid在结肠腺瘤中阳性表达为95．2％，高于正常肠黏膜（72．2％）及结肠癌（72．3％），前者与后二者相比，差异显著（P〈0．05）。结肠癌DukesD期Bid阳性表达100％与A、B期（40．9％、55．0％）相比有极显著差异（P〈0．001），DukesD期且有28．6％高表达。在结肠癌的高表达DukesD级病例，虽Bid表达为强阳性但结肠癌细胞仍不受限制持续增殖。结论结肠癌的早期阶段（结肠腺瘤）中Bid阳性率高于结肠癌，说明细胞凋亡属于结肠癌变的早期现象。结肠癌细胞可能存在使抗瘤的T细胞及NK细胞发生免疫识别困难而致免疫逃逸的途经。