六味地黄丸增效小鼠黑色素瘤HSV-tk/GCV 自杀基因疗法的免疫机制

目的明确六味地黄丸是否增强单纯疱疹病毒核苷激酶/更昔洛韦（HSV-tk/GCV）自杀基因疗法对小鼠黑 色素瘤的免疫杀伤效果,并对其相关机制进行探索。方法采用Western Blot 实验、免疫荧光实验检测六味地 黄丸对缝隙连接蛋白43（Cx43）表达水平及膜定位的影响;通过荧光黄染料、钙黄绿素荧光传输实验检测六味 地黄丸对小鼠黑色素瘤细胞B16（B16 细胞）缝隙连接通讯（GJIC）功能的影响;PI/Hoechst 染色实验检测CD8+ T 细胞对B16 细胞的免疫杀伤效果;CD8+ T 细胞激活实验观察GJIC 在六味地黄丸增强对小鼠黑色素瘤免疫杀 伤中的作用。结果自杀基因疗法联合六味地黄丸治疗较单独应用自杀基因疗法能更显著地抑制肿瘤生长; Western Blot 及免疫荧光实验显示六味地黄丸组Cx43 表达明显上调,荧光传输实验显示六味地黄丸组B16 细 胞GJIC 功能显著增强;PI/Hoechst 染色实验显示,六味地黄丸组CD8+ T 细胞对B16 细胞的免疫杀伤效果更加 显著,阻断Cx43 后,对B16 细胞的免疫杀伤效果则被逆转,同时CD8+ T 细胞的激活也被减弱。结论六味 地黄丸可通过上调B16 细胞中Cx43 的表达,改善GJIC 功能,促进肿瘤抗原的交叉提呈,更强地激活CD8+ T 细 胞以增强其对肿瘤细胞的免疫杀伤效果。     

茯苓酸缓解小鼠克罗恩病:基于抑制PPII3K/AKT信号通路拮抗肠上皮细胞凋亡

目的 明确茯苓酸（PA）对2,4,6三硝基苯磺酸（TNBS）诱导的小鼠克罗恩病（CD）样结肠炎的作用效果及可能机制。方法 将24只野生型小鼠随机分为对照组（WT组）、模型组（TNBS组）和PA干预组（PA组）,每组8只。TNBS组和PA组采用TNBS诱导CD样结肠炎;PA组在TNBS造模的同时给予PA干预[5 mg/（kg·d）,腹腔注射],而WT组和TNBS组则每日给予等量的生理盐水腹腔注射。1周后处死小鼠,采用疾病活动度（DAI）评分、体质量改变、结肠长度、组织学炎症评分和小鼠结肠黏膜肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平（ELISA检测）评估肠炎程度;采用异硫氰酸荧光素-葡聚糖（FITCdextran）、肠型脂肪酸结合蛋白（I-FABP）及跨上皮电阻抗值（TEER）评估小鼠肠屏障功能;TUNEL染色检测各组小鼠肠上皮细胞凋亡情况;通过网络药理学预测PA治疗CD可能的作用靶点;采用String平台和Cytoscape 3.7.2软件进行蛋白互作网络构建;采用David数据库对预测靶点进行GO功能及KEGG通路富集分析;应用Au...     

基于质量改进项目降低经皮肾镜碎石术后患者低体温的应用效果

目的分析经皮肾镜碎石术后患者通过质量改进项目改善低体温的临床效果。方法选择2019年12月至2020年11月本院收治的行经皮肾镜碎石术的166例肾结石患者为研究对象, 根据奇偶数顺序分为常规组和质量改进组, 每组各83例。两组患者均行经皮肾镜碎石术治疗, 术后低体温预防护理中, 分别行常规护理、护理质量改进项目干预。在两组患者手术前后分别予以体温测量, 统计术后低体温发生率及术后不良事件的发生率。结果在出手术室时即刻、回病房后2 h、回病房后6 h、回病房后12 h时, 质量改进组患者的低体温发生率均低于常规组(9.64%、8.43%、3.61%、1.20% vs. 24.10%、19.28%、13.25%、8.43%, 均P<0.05)。质量改进组患者的术后寒颤、感染、切口出血、低血压等不良事件的总发生率低于常规组(7.23% vs. 18.07%, P<0.05)。结论通过护理质量改进项目的干预, 能有效降低经皮肾镜碎石术后低体温的发生率以及降低低体温相关不良事件的发生率。     

三叶因子1在实验性胃溃疡自愈期大鼠下颌下腺的表达及意义

目的 探讨大鼠实验性胃溃疡自愈期间下颌下腺三叶因子1(TFF1)的表达变化.方法 采用免疫组织化学和RT-PCR法,分别从蛋白水平及基因水平检测42只溃疡组、21只盐水组和6只正常组大鼠下颌下腺TFF1的表达.结果 免疫组织化学SP法显示,正常大鼠下颌下腺颗粒曲管的多颗粒细胞呈TFF1免疫反应阳性,各级导管管腔内也有TFF1阳性物质,纹状管管腔游离面可见线条状TFF1阳性物.溃疡组下颌下腺TFF1肽积分吸光度值明显增加,高于相应的盐水对照组和正常组(P<0.05或P<0.01),其中1d、2d、4d、6d TFF1肽积分吸光度值逐渐增加,6d最高,10d、14d、23d也显著高于盐水对照组.RT-PCR结果 显示,下颌下腺有TFF1 mRNA转录,且溃疡组TFF1/GAPDH mRNA吸光度比值在溃疡2～23d均高于盐水对照组和正常组(P<0.01或P<0.05).结论 下颌下腺TFF1肽在大鼠实验性胃溃疡形成和愈合过程中高表达,主要通过导管系统排泄,参与实验性胃溃疡的愈合.     

从母系遗传研究肾阴虚型慢性再生障碍性贫血的发病机制

背景：多项研究表明恶性血液病可以出现线粒体的突变,但尚未有关于慢性再生障碍性贫血中线粒体变化的研究。目的：研究肾阴虚和肾阳虚型慢性再生障碍性贫血患者线粒体突变情况,探讨母系遗传的本质——线粒体与肾阴虚型慢性再障发生、发展的关系,以期进一步研究慢性再障的发病机制。方法：收集10例诊断明确的肾阴虚型5例肾阳虚型慢性再生障碍性贫血患者骨髓和口腔黏膜上皮,提取DNA,进行线粒体DNA的全测序,比较线粒体基因。结果与结论：肾阴虚型慢性再生障碍性贫血患者线粒体全测序表明许多患者的突变位点发生在与线粒体氧化呼吸链密切相关的区域,涵盖了还原态烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶1~2、4~6,细胞色素B等多个线粒体DNA的编码基因。而肾阳虚型慢性再生障碍性贫血患者线粒体突变不明显。提示线粒体基因突变引起的呼吸链酶复合体表达水平的改变,造成细胞能量代谢障碍,可能在造血干细胞衰竭的发生发展中起到关键作用。而这一变化是与肾阴虚——母系遗传息息相关的。     

慢性粒细胞白血病患者骨髓单个核细胞中CaMKⅡγ在疾病不同阶段的表达及分子机制

目的探讨钙调蛋白依赖性激酶Ⅱγ(CaMKⅡγ)在慢性粒细胞白血病患者从慢性期到急变期过渡的表达及其分子机制。方法 59例来自不同时期慢性粒细胞白血病患者的骨髓,通过Ficoll分离液分离单个核细胞,裂解蛋白进行Western blot检测CaMKⅡγ的表达,并初步探讨其分子机制。结果 CaMKⅡγ在慢粒加速和急变期患者中高表达,而慢性期患者表达量低或不表达,其表达与β-catenin基本一致。结论 CaMKⅡγ在慢性粒细胞白血病慢性期到加速期过渡中发挥重要作用,可通过调控β-catenin的表达影响白血病干细胞的自我更新。     

超声引导腹横肌平面阻滞用于患儿疝囊高位结扎术后镇痛

目的 观察超声引导下腹横肌平面阻滞用于患儿腹股沟斜疝疝囊高位结扎术后镇痛的临床效果.方法 择期行单侧腹股沟斜疝的患儿50例,年龄1～3岁,ASA Ⅰ级,采用随机数字表法,将患儿均分为超声引导下腹横肌平面阻滞组(TAP组)和对照组.TAP组术前在超声引导下行腹横肌平面阻滞,注入0.25％左旋布比卡因0.3 ml/kg,对照组给予等容量生理盐水.记录术后拔除喉罩时间、麻醉后恢复室(PACU)停留时间;PACU期间记录躁动发生情况,采用患儿麻醉苏醒期躁动量化评分表(PAED)评价躁动程度.记录术后1、4、8、12、16和24 h患儿FLACC评分,记录腹横肌平面阻滞相关不良反应的发生情况.结果 与对照组比较,TAP组患儿躁动发生率、PAED评分均明显降低(P＜0.05);TAP组患儿术后1、4、8和12 h的FLACC评分均明显降低(P＜0.05).两组患儿术后16h和24 h FLACC评分、拔除喉罩时间和PACU停留时间差异无统计学意义.两组患儿均未见TAP阻滞相关不良反应.结论 患儿腹横肌平面阻滞给予0.25％左旋布比卡因0.3 ml/kg,能提供至少12 h的术后镇痛效果,有效预防七氟醚麻醉苏醒期躁动的发生.     

高效液相色谱法测定家兔血浆中安妥沙星浓度及药代动力学参数

目的:建立测定家兔血浆中安妥沙星浓度的高效液相色谱方法,探讨安妥沙星在家兔体内的药代动力学特征。方法:取安妥沙星片,按25 mg/kg剂量,研细,分散于0.5%羧甲基纤维素钠溶液中,给家兔灌胃,采血,血样经高氯酸处理后进行高效液相色谱法分析。色谱柱条件:Phenomenex C₁₈柱(250 mm×4.6 mm,4μm);乙腈:50 mmol/L枸橼酸溶液:1 mol/L醋酸胺溶液(19:80:1,体积比)为流动相,流速1.0ml/min;检测波长为295nm,柱温40℃。结果:安妥沙星在家兔血浆中的线性范围为0.164~10.5μg/ml,最低定量限为0.164μg/ml。日内及日间变异均<10%,准确度相对误差<5%。血浆中回收率>80%。实验条件下安妥沙星在家兔体内的药代动力学参数:血药浓度时间曲线下面积为(46.17±13.99)mg·L-1·h-1,达峰时间为(0.9±0.14)h,峰浓度为(5.15±0.54)mg/L,生物半衰期为(11.98±4.02)h,清除率为(0.58±0.19)L·kg-1·h-1。结论:该方法经考察符合生物样品的测定要求,可用于测定家兔血浆安妥沙星浓度和药代动力学的研究。     

典型与非典型应激性心肌病大鼠模型的制备方法

目的 探讨去甲肾上腺素(NE)与异丙肾上腺素(ISO)致应激性心肌病(SCM)的作用,为其模型的制备提供参考.方法 将132只雄性SD大鼠随机分成11组(每组12只),分别为对照组,NE:1 mg/kg组、2 mg/kg组、3 mg/kg组、4 mg/kg组、5 mg/kg组,ISO:50 mg/kg组、100 mg/kg组、150 mg/kg组、200 mg/kg组、400 mg/kg组.通过腹腔注射NE及ISO注射液,90 min后行超声心动图检查,并测量左室心尖段、中间段、基底段的短轴缩短分数(FS)及左室的面积变化分数(FAC),取典型与非典型SCM大鼠左室心尖及基底部心肌组织切片HE染色观察.结果 在NE各剂量组大鼠中,表现为非典型SCM改变的18只,典型SCM改变2只,2 mg/kg、3 mg/kg、4mg/kg组的成功率较高而大鼠的死亡率较低,全心运动减弱4只,死亡8只;而ISO各剂量组中出现SCM改变的均表现为典型,共15只,在50 mg/kg获得较高成功率,未出现全心运动减弱及死亡.结论 与ISO用于大鼠典型SCM模型的制备不同,NA可用于非典型SCM模型的制备.     

黄芪桂枝五物汤治疗糖尿病周围神经病变的研究进展

糖尿病周围神经病变（diabetic peripheral neuropathy,DPN）是指糖尿病患者出现周围神经功能障碍相关症状的慢性并发症,是足部溃疡、感染和截肢的高危因素。临床主要采用疼痛管理、控制血糖和营养神经的药物治疗,多产生耐药性和不良反应,治疗效果并不理想。研究发现黄芪桂枝五物汤（Huangqi Guizhi Wuwu Decoction,HGD）在防治DPN方面具有较好的效果,通过对HGD治疗DPN的药效基础、临床应用及相关作用机制进行综述,为HGD治疗DPN的进一步开发利用提供理论依据和参考。