日本血吸虫大国大陆株副肌球蛋白编码基因的PCR扩增

根据已知的日本血吸虫菲律宾株的副肌球蛋白分子的部分ｃＤＮＡ序列，设计两对寡核苷酸引物（引物１／２和引物３／４），以聚合酶链式反应（ＰＣＲ），用引物１／２从本室两个日本血吸虫中国大陆株ｃＤＮＡ库中均扩增出与预期大小（９２７ｂｐ）一致的特定ＤＮＡ片断。巢式ＰＣＲ－以第一扩增产物为模板，用引物３／４扩增出约５０００ｂｐ的单一条带，与预期片段（４９４ｂｐ）大小一致。表明ＰＣＲ产物为编码副肌球蛋白的目的基因     

DNA探针技术用于疟疾诊断的研究

在影响人类的诸种寄生虫病中,就社会经济和公共卫生重要性而言,疟疾占首位,当今它仍是我国和世界的一大问题。世界人口中约1/3受到疟疾的威胁,据估计,全世界每年有2亿2千5百多万病人,2～3百万人死亡,其中绝大部分由恶性疟原虫感染所致。在我国,虽已开展了大规模的疟疾防治工作,取得了巨大成就,但目前的疟防任务仍十分艰巨。近年来,蚊媒对杀虫剂及原虫对化疗药物抗性的产生增加了控制本病的困难。因此,从世界范围讲,迫切需要新的控制措施,包括     

寄生虫与临床——(三)寄生虫感染与肝胆疾患

某些人体寄生虫在侵入肝脏后可使肝脏发生不同程度的病变及相应的临床表现。本文就此作些简要介绍。二、引起肝胆疾患的寄生虫种(一)原虫溶组织内阿米巴、杜氏利什曼原虫、弓形体原虫、疟原虫、兰氏贾第鞭毛虫。(二)吸虫日本血吸虫、华枝睾吸虫、猫后睾吸虫、麝猫后睾吸虫、肝片形吸虫、姜片虫、异形吸虫、横川后殖吸虫、卫氏并殖吸虫、斯氏狸殖吸虫、枝双腔吸虫、胰阔盘吸虫、棘球绦虫、猪囊尾蚴。(三)线虫钩虫、旋毛虫、犬弓首线虫、棘     

日本血吸早重组诊断抗原基因的分离和表达

为了提高血吸虫病病因论断的特异性和敏感性，用慢性日本血吸虫病病人血清筛选经λｇｔｌｌ构建的日本吸虫中国大陆株成虫ｃＤＮＡ表达库，获得一阳性克隆Ｓｉｇｔ４，其表达产物为１４８０００融合蛋白。     

应用间接荧光抗体试验连续三年疟疾血清流行病学调查报告

报告以重复横向调查方法,应用间接荧光抗体试验,检测人群的疟疾抗体水平,并同时镜检小学生厚血膜中的疟原虫。调查表明,该地区人群的疟疾抗体阳性率逐年上升,并随年龄的增长而升高;1981年及1982年小学生的原虫阳性率也高于1980年。显示当地疟疾的传播有上升趋势。     

微口膜壳绦虫在体外不同血清中发育状况的比较

在组织培养中,必须供给某种动物的全血清或血清中的某些成份,这已早被证实。有人认为血清可能刺激 RNA 和 DNA 的合成,进而促使细胞有丝分裂;如缺少血清,细胞生长则停止。蠕虫培养工作中的难题之一也即是要选择一种适宜的培养血清。本文作者从几个方面,对微口膜壳绦虫在含7种不同的牛血清或马血清的培养基中的发育状况进行了比较研究。本研究所采用的培养基为 Eagle 氏培养液中加入羔羊肝浸出液和经56℃加热半小     

犬恶丝虫的诱生IgG抗原的分离和一些特性

在寄生虫感染中,宿作可产生具不同作用的种种抗体;在寄生虫体内则存在诱生这些抗体的种种抗原。搞清这些抗原成分,对于了解宿主-寄生虫间的关系具有重要意义。本文作者从犬恶丝虫成虫提取和分离出诱生IgG的抗原,并对其理化性质进行了鉴定。作者从感染大恶丝虫的狗获得成虫,用生理盐水充分洗涤并行冻干后,再用组织匀浆器制成匀浆,经超声粉碎后,溶于pH7.2的磷酸盐缓冲液(PBS)中,置冰箱内2天以提取。此种乳状液在0C以13,000g转速离心20分钟,除去较大的颗粒,诸如细胞碎片、核和线粒体。上清液以CE(细胞提取物)示之,用作原始材料。     

日本血吸虫副肌球蛋白合成肽的免疫学鉴定

目的 鉴定日本血吸虫副肌球蛋白合成肽Sj97-P22。 方法 27只雌性C57BL/6小鼠随机均分为合成肽Sj97-P22免疫组、无关肽免疫组和PBS免疫组,分别于尾基部皮下注射与完全福氏佐剂等体积充分混匀的合成肽Sj97-P22（100 μg）乳化物、无关肽（100 μg）乳化物和PBS乳化物,抗原免疫剂量为100 μg/（只·次）,共免疫2次,间隔1周。于免疫后7~10 d分离各组小鼠脾单个核细胞,运用流式细胞技术三色标记法检测其CD4^＋ T细胞胞内因子干扰素γ（IFN-γ）和白介素4（IL-4）。将Sj97-P22免疫小鼠或PBS免疫小鼠的脾单个核细胞分别与Sj97-P22、无关肽或PBS共培养,采用3H-TdR掺入法观察细胞增殖效果,并用ELISA法检测细胞培养上清中IL-2、IFN-γ和IL-4的浓度。 结果 Sj97-P22免疫组小鼠脾脏CD4⁺ T细胞中胞内分泌IFN-γ的细胞百分率为（8.05±0.54）%,显著高于无关肽免疫组[（4.74±1.04）%]和PBS免疫组[（6.51±0.49）%] （P＜0.05）;而分泌IL-4的细胞百分率[（0.60±0.11）%]显著低于PBS免疫组[（1.31±0.27）%]（P＜0.05）,与无关肽免疫组[（0.84±0.08）%]间的差异则无统计学意义（P＞0.05）。Sj97-P22可明显刺激Sj97-P22免疫小鼠脾单个核细胞增殖,增殖指数达到3.12±1.59,细胞培养上清中IL-2和IFN-γ浓度分别为（9.13±1.54）和（39.75±9.69）pg/ml,与无关肽和PBS刺激相比显著升高（P＜0.05）,而IL-4浓度在3个刺激物间的差异无统计学意义（P＞0.05）。Sj97-P22不能刺激PBS免疫鼠脾单个核细胞增殖及培养上清中IL-2、IFN-γ及IL-4浓度变化。 结论 Sj97-P22可能是C57BL/6小鼠特异的Th1型表位。     

日本血吸虫（中国大陆株）线粒体相关蛋白对小鼠免疫保护性的初步研究

目的 研究日本血吸虫（中国大陆株）线粒体相关蛋白（rSj338/26GST)对小鼠的免疫保护性，预测其作为血吸虫疫苗候选分子的潜能。方法 将编码日本血吸虫线粒体相关蛋白的cDNA经PCR扩增后亚克隆人载体质粒pGEX-6p-1进行表达，并用表达的重组抗原的融合蛋白免疫BABL／c小鼠。结果 与对照组相比，rSj338/26GST重组蛋白免疫小鼠获得了32．3％的减虫率及46．5％肝总减卵率；与Sj26GST免疫组相比，rSj338抗原可能使小鼠获得22．5％的减虫率及30．0％的肝总 减卵率。结论 证明重组的日本血吸虫线粒体相关蛋白(rSj338/26GST及rSj338)可诱导宿主抗血吸虫感染的部分保护力，可望成为新的疫苗候选分子。     

日本血吸虫线粒体相关蛋白的基因克隆及特性鉴定

目的为探索血吸虫病疫苗的新路径,对日本血吸虫线粒体相关蛋白的基因克隆及特性鉴定.方法分析本室筛选日本血吸虫成虫cDNA文库获得的一cDNA片段(Sj338/24)的开读框序列,在其上下游分别设计引物A和B,并以该cDNA片段为模板进行PCR扩增后将该片段重组于pGEM-T中并进行DNA测序鉴定及检索.再经酶切后将该基因片段亚克隆入表达载体pGEX-6P-1,并进行蛋白表达、纯化及抗原性鉴定.结果该目的基因PCR产物全长共487bp,其开读框由459bp组成,编码153个氨基酸残基组成的多肽.DNA序列同源性分析发现,Sj338克隆基因与人及褐鼠的线粒体外膜蛋白的部分编码基因较高度同源.重组质料pPEX-6P-1/Sj338能高效融合表达,融合蛋白的分子量为43kDa.SDS-PAGE和Western blot检测结果表明,重组蛋白rSj338具有良好的抗原性.结论·Sj338可能为日本血吸虫线粒体相关蛋白的基因,重组蛋白有望成为新的疫苗侯选分子.