5-氮杂脱氧胞苷对肝癌细胞HepG2中抑癌基因FHIT表达的影响

背景与目的：肝癌细胞中由于FHIT基因过度甲基化而导致其表达降低。本实验应用甲基化酶抑制剂5-氮杂脱氧胞苷（5-Aza-2’deoxycytidine,5-Aza—dc）作用肝癌细胞株HepG2。观察用药后肝癌细胞中FHITmRNA和蛋白表达的变化,并观察5-Aza-dC对细胞增殖的影响。方法：以5-Aza—dC作用HepG2细胞．采用甲基化特异性聚合酶链反应（methylation—specific polymerase chain reaction,MSP）检测HepG2细胞中FHIT甲基化变化;采用RT-PCR检测FHITmRNA的表达：采用细胞免疫组织化学染色和Western blot方法检测FHIT蛋白表达,MTT法检测HepG2细胞增殖情况。结果：5-Aza—dC处理前,HepG2细胞FHIT基因呈甲基化状态,mRNA及蛋白表达缺失;经5-Aza—dC作用后,MSP显示HepG2细胞FHIT基因甲基化逆转：经1．0μmol／L、2．0μmol／L及4．0μmol／L的5-Aza—dC作用48h后,FHIT基因mRNA扩增出产物的吸光度值分别为0．80±0．32、1.41±0．54和1．51±0．61。Western blot检测产物积分灰度值分别为0．33±0．20、1．00±0．26和1．12±0．38：当药物浓度达到1．0μmol／L时出现了对HepG2细胞增殖的抑制作用。结论：5-Aza—dC能明显逆转HepG2细胞的FHIT基因异常甲基化,激活因高甲基化所致基因沉默的再转录,诱导该基因的表达;同时抑制细胞增殖。     

雌激素受体在乳腺癌及生殖系统疾病中的表达

应用免疫酶标PAP法和免疫金银法(IGSS)对乳腺癌及5种生殖系统疾病中的雌激素受体(ER)进行检测。结果ER在乳腺癌及良恶性生殖系统疾病中均有表达。恶性肿瘤ER阳性率为84％,在良性病变中,阳性率为68.2％,本文为临床采用内分泌治疗生殖系统疾病提供组织学依据,并认为IGSS法检测ER是一种较简便而实用的方法。     

VIP能神经、生长抑素、5－HT阳性细胞与淋巴组织在人肠的分布

应用免疫组织化学方法，观察人肠相关淋巴组织血管活性肠肽（ＶＩ－Ｐ），神经特异性烯醇化酶（ＮＳＥ）及Ｓ－１００蛋白神经元神经纤维支配以及合５－羟色胺（５－ＨＴ）阳性细胞、生长抑素（ＳＳ）内分泌细胞分布。结果显示肠道相关淋巴，在聚集淋巴组织周围有神经肽ＶＩＰ及ＮＳＥＳ－１００蛋白阳性神经元神经纤维分布并穿插于淋巴细胞之间，淋巴滤泡中心有Ｓ－１００蛋白阳性树突状细胞。ＳＳ、５－ＨＴ阳性细胞分布于回肠和结肠粘膜上皮及腺体，在聚集淋巴组织元上粘膜上皮及腺体内ＳＳ、含５－ＨＴ阳性细胞数减少，与周围粘膜阳性细胞数相比差异有显著性（Ｐ＜０．０１），结果提示肠道神经，内分泌和免疫系统之间有密切关系。     

促血管生成素在大肠癌组织的表达及其临床病理意义

目的　观察促血管生成素（Ａｎｇ）-１、Ａｎｇ-２及其受体Ｔｉｅ-２在大肠癌中的表达,探讨其与大肠癌血管生成的关系及临床病理意义。方法　采用免疫组化ＰＶ-９０００二步法观察５０例大肠癌和１０例正常大肠黏膜组织中Ａｎｇ-１、Ａｎｇ-２、Ｔｉｅ-２的表达,采用ＣＤ１０５标记检测微血管密度（ＭＶＤ）。结果　大肠癌组织Ａｎｇ-１的表达低于正常大肠黏膜,Ａｎｇ-２、Ｔｉｅ-２的表达高于正常大肠黏膜,差异均有统计学意义（Ｐ＜０.０５）;Ａｎｇ-１、Ａｎｇ-２的表达在不同分化程度间差异有统计学意义（Ｐ＜０.０１）;Ａｎｇ-１在淋巴结转移组的表达低于无转移组（Ｐ＜０.０５）;Ａｎｇ-２在淋巴结转移组高于无转移组（Ｐ＜０.０５）,在Ｄｕｋｅｓ'Ｃ、Ｄ期明显高于Ｄｕｋｅｓ'Ａ、Ｂ期（Ｐ＜０.０１）;Ｔｉｅ-２在淋巴结转移组的表达高于无转移组（Ｐ＜０.０５）;Ａｎｇ-２、Ｔｉｅ-２的表达与ＭＶＤ均呈正相关（ｒ＝０.３４５,Ｐ＜０.０５;ｒ＝０.２９９,Ｐ＜０.０５）。结论　促血管生成素与大肠癌的病理分化程度、Ｄｕｋｅｓ分期、淋巴结转移有关,并且在大肠癌血管生成过程中发挥重要作用。     

子宫内膜骨组织化生1例

患者60岁,病历号860871.绝经8年,近半月来阴道有血性分泌物.妇科检查:宫颈充血,宫体萎缩,质硬,未触及明显肿块。诊刮刮出灰红与灰白色碎组织约2g,质硬如石。总体直径约1.5cm.其中杂有片状骨样组织多块,大者如高粱米,小者如小米粒,质地硬。镜检见少许老年性萎缩子宫内膜组织,腺体数目少,纤维组织增生并伴有骨小梁形成,骨小梁结构形状不一,排列方向不定,组织内有散在浆细胞、淋巴细胞及中性白细胞浸润。病理诊断(病理号860214):慢性子宫内膜炎,伴有骨组织化生。绝经后老年的子宫内膜,由于缺乏雌激素作用而萎缩变薄,抵抗力低下,故易发生炎症.再因老年之子宫内膜无月经周期性脱落,故炎症常持续存在,使成纤     

不同幅度牵张力对正常皮肤成纤维细胞向增生性瘢痕成纤维细胞转化的诱导作用

目的 分析不同幅度牵张力对正常皮肤成纤维细胞(NSFB)向增生性瘢痕成纤维细胞(HSFB)转化的诱导作用.方法 体外培养增生性瘢痕患者的NSFB和HSFB.加载牵张力的NSFB作为实验组,分N10％组、N15％组和N20％组3组,分别加载幅度为10％、15％、20％的周期性牵张力24 h,不加载牵张力的NSFB和HSFB作为对照组(N0组和H0组).通过观察细胞形态,以细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖,实时定量荧光PCR法检测整合素β1、P130Cas、转化生长因子-β1(TGF-β1)、Ⅰ型胶原a1链(COL1A1)、Ⅲ型胶原a1链(COL3A1)的基因表达,酶联免疫吸附(ELISA)法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原和TGF-β1蛋白表达,分析NSFB的转化程度.结果 机械牵张力刺激NSFB增殖,N10％组细胞增殖水平显著高于N20％组(0.91±0.09比0.8±0.07,P＜0.05).牵张力作用下各个基因表达上调,N10％组整合素β1、P130Cas、TGF-β1、COL1A1、COL3A1的mRNA表达水平均显著高于N20％组(3.14±0.24、5.01±0.49、1.55±0.08、2.38±0.08、1.37±0.11比1.78±0.32、3.07±0.41、1.18±0.05、1.97±0.05、1.26±0.19,均P＜0.05).机械牵张力引起TGF-β1蛋白表达上调,N10％组TGF-Jβ1的蛋白表达水平显著高于N20％组[(459±12.96)比(372±10.49) pg/ml,P＜0.05].实验组Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达水平均显著高于N0组,但低于H0组(均P＜0.05);N10％组Ⅰ型胶原蛋白表达水平显著高于N20％组[(12.66±1.16)比(11.23±0.75)ng/ml,P＜0.05].结论 10％幅度牵张力对NSFB有明显的诱导转化作用,能够使NSFB表现出HSFB的部分生化特征.     

5-氮杂脱氧胞苷对非小细胞肺癌细胞A549中抑癌基因FHIT表达的影响

DNA甲基化是表观遗传修饰的主要方式之一,启动子CpG的高甲基化是除突变和缺失外肿瘤中抑癌基因失活的重要机制[1].脆性组氨酸三联体(fragile histidine triad,FHIT)是第一个将脆性位点和肿瘤联系起来的抑癌基因[2],并且FHIT基因甲基化异常是肿瘤发生和发展过程中的早期事件.去甲基化治疗已成为一种新的抑制细胞增殖和诱导细胞分化的肿瘤治疗方法.5-氮杂脱氧胞苷(5-Aza-dC)是一种脱甲基化试剂,实验采用5-Aza-dC处理非小细胞肺癌细胞株A549细胞,观察其FHIT基因甲基化改变及对A549生长的影响.     

软组织扩张术后纤维囊的组织学及超微结构观察

目的：探讨纤维囊在软纤维扩张后皮瓣的作用及意义。方法：应用光镜、电镜对６例纤维囊组织进行观察及形态学计量分析。结果：纤维囊主要由成纤维细胞、胶原纤维、成肌纤维细胞所组成， 内的毛细血管数目明显高于正常人真皮内毛细胞血管数目（Ｐ〈０．０１）。．结论：纤维囊对扩张后之皮瓣起支持保护及营养作用，对于填补组织缺损和弹性回缩起一定作用。     

乳腺Paget病1例

患者,女,49岁,左侧乳头皲裂4个月。4个月前无意中发现左乳头皲裂,伴有渗出、结痂、局部疼、痒、不适。曾在外院以乳头湿疹治疗,效果不佳。临床检验为:双乳腺对称,皮肤无桔皮样改变,左乳头皲裂。左乳头外上象限近乳晕处可触及约0.8cm×0.8cm×0.8cm大小肿物,质韧、界清,稍活动,轻触痛。同侧腋窝未扪及肿大淋巴结。病理检查:①肉眼观:不规则皮肤组织2cm×1cm×0.5cm,表面细小颗粒状。不规则乳腺组织8cm×6cm×4cm,大部分为脂肪,穿插于灰白色乳腺组织中;②光镜检查:乳头表皮内有散在、成巢或腺样的Paget细胞,该细胞体积大,圆形或椭圆形,境界清…     

转化生长因子在人膜增生性肾小球肾炎中蛋白和mRNA基因表达

原发性肾小球肾炎是危害人类健康的慢性病、多发病 ,有多种病理类型。其中 ,膜增生性肾小球肾炎(ｍｅｍｂｒａｎｏｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｇｌｏｍｅｒｕｌｏｎｅｐｈｒｉｔｉｓ)可发生于儿童和成人 ,预后较差 ,5 0 %的病例在 1 0年内出现慢性肾功能衰竭。因此 ,早期预测并