组蛋白去乙酰化酶抑制剂提高腺病毒对K562细胞转染及杀伤效率的研究

 目的　研究通过观察组蛋白去乙酰化酶（histone deacetylase,HDAC）抑制剂曲古抑菌素A（trichostatin A,TSA）对人类白血病细胞系K562 CAR表达水平的影响,并探讨HDAC抑制剂在以腺病毒为载体的基因治疗中的应用价值。方法　在mRNA和蛋白水平检测TSA处理K562细胞前后CAR的表达情况,采用流式细胞术测定病毒的转染效率,四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测腺病毒及其携带的基因的体外抗瘤效应。结果　TSA处理后,K562细胞CAR 的mRNA 和蛋白表达明显增高;流式细胞仪分析ADV-GFP转染K562 后GFP的表达发现：未处理组的转染率为（8.74±0.34）％,1、10 和100 nmol／L TSA处理细胞48 h后的转染率分别为（12.26±0.55）％、（20.83±1.22）％和（28.66±0.43）％。未处理组与处理组间及各处理组间转染效率的差异有统计学意义（P＜0.05）。MTT结果表明腺病毒M1介导的体外杀伤效应TSA处理组比未处理组增强（P＜0.05）,TSA各处理组间的体外杀伤效应随TSA浓度的提高而增强（P＜0.05）。结论　低浓度的TSA可以增强腺病毒对K562细胞的感染及杀伤效率,可以提高以腺病毒为载体的血液肿瘤基因治疗的疗效。     

催眠治疗改善癌症患者疼痛的临床研究和问卷调查

  目的  研究催眠疗法治疗癌痛的有效性,了解医护人员和患者对催眠疗法治疗癌痛临床应用的认知与需求。  方法  回顾性选取2020年1月至2020年12月于华中科技大学同济医学院附属同济医院招募罹患癌症且伴有疼痛的患者120例,进行8周的认知催眠治疗。比较癌痛患者接受催眠治疗2、4、8周后疼痛数字评分（NRS）、汉密尔顿焦虑量表（HAMA）评分、汉密尔顿抑郁量表（HAMD）评分及睡眠量表（MOS-SS）评分的变化;设计《催眠疗法治疗癌痛认知与需求调查问卷》,对2020年6月至2020年9月住院的354例癌痛患者和301名肿瘤科医护人员展开调查。  结果  120例癌痛患者参与了催眠治疗并完成了2周的评估,109例（90.8%）完成8周的治疗评估。催眠治疗2、4、8周后,NRS评分显著下降（P<0.05）;催眠治疗4、8周后,HAMA、HAMD评分显著下降（P<0.05）,MOS-SS评分显著升高（P<0.05）。84.1%的医护人员认为有必要常规开展认知催眠治疗;64.4%的癌痛患者能接受催眠治疗。  结论  催眠疗法可以减轻癌痛,同时降低癌痛患者的焦虑、抑郁情绪,改善患者睡眠状况;加强医护人员和患者的宣传教育对催眠疗法的临床应用具有重要意义。      

原代胃癌干细胞CD44表达意义探讨

目的 肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)在恶性肿瘤的发生发展中起着重要作用,且是肿瘤耐药及复发的根源.本研究探讨CSCs表面标记蛋白CD44在分离及鉴定胃癌干细胞中的重要作用.方法 收集2015-11-06-2015-12 01华中科技大学同济医学院附属同济医院3例胃癌患者手术标本.首先采用胶原酶消化法获取胃癌细胞,部分细胞分别贴壁及悬浮培养,并采用免疫荧光及流式分析的方法检测胃癌球形体中CD44的表达情况.部分细胞采用流式细胞仪分选得到CD44+及CD44胃癌细胞,并通过无血清悬浮培养法比较两群细胞的球形体形成能力.结果 免疫荧光显示,CD44蛋白在球形体中高表达;流式分析发现,贴壁的原代胃癌细胞中CD44+细胞的比例为(30.73±7.6)％,而球形体中CD44+细胞的比例高达(56.4±5.58)％,差异有统计学意义,P=0.009.球形体形成实验结果表明,与CD44-细胞相比,CD44+胃癌细胞具有更强的球形体形成能力,1 000个CD44+及CD44-胃癌细胞分别形成(14.33±2.52)和(1.67±0.58)个球形体,差异有统计学意义,P=0.001.通过比较发现,球形体培养对胃癌干细胞的富集效率为0.3％,而CD44对胃癌干细胞的富集效率为1.4％.结论 CD44是胃癌干细胞的表面标记蛋白,其可能成为胃癌靶向治疗的可靠靶标.     

基于医学教育改革环境下的肿瘤学临床教学探索

针对肿瘤学临床教学特点及现有教学方式存在的弊端,华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤学教研室进行了教学改革实践,主要包括优化整合基础临床课程、试行CPBL教学模式、设立“行医指导”专题等方面。教学改革已取得初步成效,但仍有不足之处有待改进。     

肝外胆管癌术后辅助放化疗的现况分析

近年来,肝外胆管癌的发病率逐年递增。因其易侵犯周围肝动脉、肝静脉、门静脉,且根治性切除率低,预后较差,即使早期完成根治术,5年生存率仍不足30%。术后辅助治疗能否改善肝外胆管癌的预后一直是研究的热点及争议点,本文将结合最新的研究进展,讨论肝外胆管癌术后辅助治疗的方案,分析术后辅助治疗对于肝外胆管癌预后的意义。     

黄芪注射液治疗原发性肾病综合征的临床疗效研究

目的 观察黄芪注射液对原发性肾病综合征的临床效果.方法 选取39例肾病综合征患者为研究对象,将其随机划分为对照组和试验组.其中对照组21例,用赖诺普利+泼尼松治疗;试验组18例,用黄芪注射液+赖诺普利+泼尼松治疗,分别观察2组患者接受治疗前和治疗后2 w、4 w、6 w后血浆白蛋白、尿蛋白的变化情况.结果 试验组治疗6...     

survivin 基因在乳腺癌组织中的表达及其与HER-2 、p53 的关系

 目的 研究survivin基因在乳腺癌中的表达及其与HER-2、突变型p53的关系。方法 应用免疫组化法检测62例乳腺癌组织中survivin、HER-2、p53的表达。结果 62例乳腺癌组织中survivin、p53阳性率分别为67．7％、35．5％；HER-2过度表达率37．1％。survivin表达水平与患者临床病理特征及p53表达均无相关性（P〉O．05），与HER-2过度表达相关（P=0．013）。结论 survivin表达水平与HER-2过度表达相关；HER2基因与survivin基因之间可能存在某种调控通路。     

阿托伐他汀治疗慢性充血性心力衰竭的临床研究

目的：观察阿托伐他汀治疗慢性充血性心力衰竭患者对心功能及C反应蛋白的影响。方法：将慢性充血性心力衰竭患者62例随机分为阿托伐他汀（20mg／d）组（n=31）与对照组（n=31）,2组均按慢性充血性心力衰竭常规治疗,治疗组另外服用阿托伐他汀,2组治疗前后检查6分钟步行距离、TC、LDC—C、CRP、LVEDD、LVESD、LVEF。结果：6个月后,阿托伐他汀组与对照组治疗前后差值相比,TC（P〈0．05、TDL（P〈0．05）、CRP（P〈0．05）、LVEDD（P〈0．05）、LVESD（P〈0．05）均有不同程度降低,6分钟步行距离（P〈0．05）、LVEF（P〈0．05）则有明显提高。结论：慢性充血性心力衰竭患者在常规扩心衰基础上加用阿托伐他汀20mg／d,治疗6个月可显著改善左室功能,降低C反应蛋白水平。     

曲妥珠单抗抑制辐射诱导下的乳腺癌细胞系SKBR3细胞的Her-2核转运过程研究

 【摘要】　目的　观察曲妥珠单抗对乳腺癌SKBR3细胞中Her-2的入核过程和核内DNA损伤修复的影响,探讨曲妥珠单抗的放疗增敏机制。方法　克隆形成实验检测曲妥珠单抗对辐射后细胞存活分数（SF）的影响,荧光共聚焦观察曲妥珠单抗对DNA 双链断裂（DSB）损伤标志物γH2AX表达和Her-2核转运过程的影响,免疫印迹法检测曲妥珠单抗对辐射诱导细胞的胞核内Her-2蛋白、DNA依赖蛋白激酶（DNA-PK）功能亚单位DNA-PKcs的表达量的改变。结果　细胞克隆形成实验中,曲妥珠单抗干预组接受2 Gy时SF（SF2）为0.321±0.022,单纯照射组为0.547±0.046（P＝0.000）;辐射后γH2AX的荧光灰度表达提高,曲妥珠单抗干预组为85.40±25.63,单纯照射组为18.53±44.32（P＝0.000）;Her-2蛋白入核灰度表达降低,单纯照射组为52.80±19.74,曲妥珠单抗组为21.41±10.55（P＝0.000）;免疫印迹实验表明曲妥珠单抗干预组辐射后早期核内DNA-PKcs及Her-2的表达下降。结论　曲妥珠单抗能够抑制辐射诱导的Her-2入核过程,并减少核内Her-2和DNA-PKcs的表达,从而可能提高辐射后早期的DSB损伤。     

RNAi抑制Ku80表达后促进宫颈癌SiHa细胞的放射敏感性

背景与目的：Ku80为细胞受辐射致DNA双链断裂（DNA double-strand break,DSB）后的主要修复蛋白之一,Ku80的高表达预示着宫颈癌组织对放射线的抵抗,本研究运用RNAi技术抑制Ku80表达,观察宫颈癌SiHa细胞对X线敏感性的变化.方法：构建1个靶向抑制Ku80的siRNA表达载体和1个阴性对照质粒,稳定转染入SiHa细胞后Western blot和RT-PCR检测Ku80表达变化;6 MV X线照射10 Gy后20 h、28 h和48 h收集细胞,流式细胞术检测细胞凋亡率;克隆形成实验检测细胞D0、SF2和α等值.结果：构建表达质粒转染SiHa细胞经筛选后获得2个稳定转染细胞株,Western blot和RT-PCR分析表明转染pKu80-siRNA的阳性克隆Ku80在mRNA和蛋白质水平均受到明显抑制;X线照射28 h及48 h后,Ku80表达受抑细胞其凋亡率均显著高于转染阴性质粒组和空白对照组（P＜0.05）;Ku80受抑细胞的D0和SF2值分别为1.330和0.425,低于转染阴性质粒细胞（1.748和0.580）和空白对照细胞（1.835和0.597）,α值为0.295,高于转染阴性质粒细胞（0.176）和空白对照细胞（0.188）.结论：运用RNAi技术可以有效抑制Ku80的表达从而促进SiHa细胞对X线的敏感性,Ku80可能是一个较理想的肿瘤分子治疗靶点.